陈秀珍 作品数:11 被引量:61 H指数:5 供职机构: 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心 更多>> 发文基金: 中央财政支持地方高校发展专项资金 教育部留学回国人员科研启动基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
岗梅种子检验规程研究 被引量:7 2016年 目的建立岗梅种子的检验方法。方法参考《国际种子检验规程》和《农作物种子检验规程》的方法,通过对岗梅种子扦样、真实性、净度、发芽率、含水量、生活力及千粒重等7项指标进行研究,确定各指标标准检验方法。结果扦样时种子批的最大总质量可选为5000 g,送检样品的质量最少为150 g;真实性可利用岗梅种子外观结构、大小和颜色等形态特征进行鉴定;净度分析可按照GB/T 3543.1-1995《农作物种子检验规程总则》中的相关方法进行;发芽试验条件为50 mg·L^(-1)赤霉素浸种24 h后于20℃、光照10 h,砂上发芽;种子水分测定采用高恒温[(130±2)℃]烘干法烘2 h;生活力测定采用四氮唑(TTC)染色法,浸种时间为4 h,种子横向切去1/3后于40℃、0.5%TTC溶液中避光染色24 h;质量测定采用百粒法。结论确定了可控指标检验的最优条件,本规程可用于岗梅种子的质量检验。 李俊仁 陈秀珍 张振山 邢建永 詹若挺 何瑞关键词:岗梅 种子 检验规程 青天葵中一个分枝发育相关基因的研究 葵[Herba Nervilia Plicatae]为兰科芋兰属植物毛唇芋兰[Nervilia fordii(Hance) Schltr.]的块茎或全草,为岭南道地药材,对小儿呼吸到疾病疗效显著.近年来由于过度采挖以及自... 陈秀珍 梁凌玲 李俊仁 汤小婷 詹若挺 何瑞关键词:药用作物 青天葵 基因表达 岗梅种苗质量分级标准研究 被引量:15 2016年 目的:研究岗梅种苗质量分级标准。方法:测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法。结果:确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种苗分为三级,其中一级种苗株高≥59cm,根长≥22cm,株径≥6.96mm;二级种苗株高43~59cm,根长18~22cm,株径4.88~6.96mm;三级种苗株高15.5~43cm,根长10~18cm,株径2.18~4.88mm。结论:建立了适用于生产实践的岗梅种苗质量分级标准。 李俊仁 陈秀珍 梁凌玲 张振山 邢建永 詹若挺 何瑞关键词:岗梅 种苗 聚类分析 连作对穿心莲基因组DNA甲基化的影响 被引量:3 2018年 目的:探究连作条件下穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式变化情况。方法:结合甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术和液相色谱-质谱(LC-MS/MS)法对3个连作年限(0,1,2年)穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式进行分析。结果:LC-MS/MS测定的连作0-2年穿心莲基因组DNA甲基化水平为13.91%,12.72%,10.26%,MSAP测定的结果则为10.16%,9.64%,8.98%,两者均表明穿心莲基因组DNA的甲基化水平与连作年限呈现负相关,即DNA甲基化水平随着连作时间的延长而逐渐下降。MSAP技术对DNA甲基化模式分析也显示,穿心莲基因组DNA的CCGG位点在连作过程中主要发生了去甲基化。结论:连作条件下,穿心莲基因组DNA的甲基化水平和模式发生改变并以此来响应连作胁迫。 李俊仁 陈秀珍 曾湘达 卓一南 何瑞 詹若挺关键词:穿心莲 DNA甲基化 连作 甲基化敏感扩增多态性 液相色谱-质谱法 南药青天葵资源和分子生物学研究进展 被引量:4 2016年 对青天葵资源和分子生物学研究进展进行综述。近年来青天葵资源和分子生物学的研究涉及青天葵原植物与生药学鉴定、人工栽培和组织培养、分子鉴定及功能基因等方面,这些技术研究内容主要包括青天葵多倍体培养、分子鉴定、遗传多样性、转录组特征及功能基因克隆等。应用现代分子生物学技术已实现了青天葵及其近缘种、混伪品的分子鉴定,全面揭示了其遗传多样性及品种间的亲缘关系;通过构建青天葵转录组数据库,促进了对该植物的生长发育和代谢调控等相关功能基因的研究。近年来青天葵资源和分子生物学研究虽已取得一定成果,但尚未能真正解决青天葵资源匮乏的关键问题。今后可利用青天葵转录组数据及其基因资源,大规模挖掘基因信息,深入研究候选基因的功能,明确青天葵生长发育过程中的基因调控网络,利用基因工程手段保护青天葵的种质资源和促进种质资源开发进程。 陈秀珍 何瑞 詹若挺关键词:青天葵 生药鉴定 人工栽培 分子鉴定 功能基因 连作对穿心莲生长及药材质量的影响 被引量:9 2017年 目的探讨连作对穿心莲植株生长及药材质量的影响。方法以盆栽穿心莲为对象进行连作试验,在栽培周期内测定不同连作年限(连作0~2年)穿心莲植株的生长指标、生理指标、产量及活性成分含量。结果穿心莲植株的株高、叶总面积、叶绿素含量及产量均随着连作年限的增加而增加,连作1,2年与连作0年比较,差异有统计学意义(P<0.05);连作后穿心莲花期和果期提前了5~7 d;连作1,2年的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量均比连作0年的降低;穿心莲叶片膜脂过氧化程度及抗氧化酶活性测定发现丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)及过氧化氢酶(CAT)的活性均随连作年限的增加而升高。结论连作后的穿心莲长势良好、产量提高,连作胁迫产生的活性氧可及时被酶系统清除,连作对穿心莲的主要障碍效应表现为活性成分含量的降低。 李俊仁 陈秀珍 汤小婷 曾湘达 卓一南 何瑞 詹若挺关键词:穿心莲 连作 活性成分 携带芋兰属LATERAL SUPPRESSOR(LS)-EGFP融合基因植物表达载体的构建 被引量:1 2015年 LATERAL SUPPRESSOR(LS)是GRAS家族参与植物分生组织发育的转录因子,是控制植物分枝的关键基因。增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)是目前应用广泛的分子生物学报告基因之一,为筛选转基因植株提供了简便有效的方法。为了探讨LS基因在青天葵及其同属植物广布芋兰中的功能,本研究利用降落-重叠PCR(Touchdown-Overlap Extension PCR,TD-OE PCR)方法,分别构建了两种芋兰属植物LS基因和EGFP融合基因。通过酶切和连接的方法,将融合基因构建到植物双元表达载体p RI 101-AN DNA中,成功获得了两个携带芋兰属植物LS-EGFP融合基因的植物表达载体p RI 101-LS-EGFP,并成功转化至农杆菌,下一步拟用于转化拟南芥,为深入研究该基因功能提供基础。 陈秀珍 梁凌玲 李俊仁 汤小婷 詹若挺 何瑞关键词:青天葵 穿心莲连作土壤提取物对其种子的化感作用 被引量:5 2016年 【目的】考察不同质量浓度穿心莲连作土壤提取物对其种子的化感作用。【方法】制备连作0年、连作1年及连作2年的穿心莲栽培土壤水、醇提取物,稀释至不同试验浓度用于穿心莲种子发芽试验。【结果】穿心莲连作土壤的水提物及醇提物均对穿心莲种子的发芽指数、发芽势、发芽率及胚根长有不同程度的抑制作用,但其抑制作用与连作年限无明显关联,3个连作年限土壤的抑制效果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。水提物中,以125 mg/m L的抑制效果最强。醇提物中,高浓度醇提物的抑制作用较强,尤以抑制胚根长度的作用最为明显。在水提物和醇提物作用下,穿心莲种子各萌发指标的化感效应指数(RI)均RI<0,并且化感综合效应(SE)也均SE<0。【结论】穿心莲连作土壤提取物对其种子萌发存在化感抑制作用,化感作用可能是造成穿心莲连作障碍的原因之一。 李俊仁 陈秀珍 刘凯频 彭秋菊 詹若挺 何瑞关键词:种子萌发 化感作用 广藿香FPPS重组蛋白表达及互作蛋白筛选分析 被引量:3 2019年 对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白。利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终得到带有GST标签的PatFPPS融合蛋白。利用GST Pull-Down技术,将GST-PatFPPS融合蛋白分别与广藿香叶片总蛋白进行体外孵育,洗脱得到蛋白复合物,经SDS-PAGE及LC-MS/MS鉴定。结果表明,PatFPPS原核表达体系成功建立,获得纯化重组蛋白,并且筛选得到一些候选PatFPPS互作蛋白。利用优化的原核表达体系,可获得可溶性的PatFPPS蛋白,并鉴定得到与之互作的候选蛋白。 钟李婷 陈秀珍 唐云 李俊仁 王小兵 刘彦婷 周璇璇 詹若挺 陈立凯关键词:广藿香 蛋白表达 广藿香醇 茉莉酸甲酯 穿心莲转录组SSR位点信息分析 被引量:17 2018年 为了探讨穿心莲转录组中SSR位点信息及其所在基因的生物学功能,并为开发穿心莲分子标记奠定基础,该研究以穿心莲转录组测序获得的43 683条Unigene为对象,采用Micro SAtellite(MISA)软件分析其中的SSR位点信息,并利用Primer3.0软件对符合鉴定要求的SSR基元设计引物和进行初步验证,同时用Blast软件对含SSR的Unigene进行功能分析。结果显示,在穿心莲转录组中共搜索到14 135个SSR位点,分布于9 973条Unigene中,SSR位点出现频率为32.36%。二核苷酸和三核苷酸是SSR序列中最主要的重复类型,共占SSR总数的75.54%。SSR所包含的重复基元中,AT/AT和CCG/CGG分别是二核苷酸和三核苷酸的优势重复基元类型。通过设计、筛选,共获得4 740对具有潜在多态性的SSR引物组合,随机挑选的20对引物中有10对可以扩增出与预期大小吻合的条带。通过基因功能注释发现,含SSR的Unigene主要与穿心莲的基础代谢功能相关。以上结果表明,穿心莲转录组中SSR位点出现频率高、类型丰富、多态性潜能较高,同时SSR序列的功能分析也为穿心莲功能基因的定位研究和分子标记辅助育种提供了有利参考。 李俊仁 陈秀珍 汤小婷 何瑞 詹若挺关键词:穿心莲 转录组 SSR