刘志明
- 作品数：5 被引量：58H指数：5
- 供职机构：中南林业科技大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金中南林业科技大学青年科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 绣球花品种遗传多样性的ISSR分析及指纹图谱构建被引量：12
- 2016年
- 利用ISSR-PCR分子标记技术对23个绣球花品种进行遗传多样性研究,从100条引物中筛选出10条引物对供试材料基因组总DNA进行PCR扩增,共扩增出条带123条,其中多态性条带102条,占82.93%,具有较高的多态性。经Pop Gen32软件包分析,23个绣球花品种的平均有效等位基因数为1.493 7,平均Nei’s基因多样性指数为0.290 7,平均Shannon信息指数为0.435 7,遗传距离介于0~0.769 1之间,遗传一致度介于0.463 4~1.000 0之间,具有广泛的遗传多样性,梦幻蓝和史欧尼10条引物的扩增结果一致,二者可能为同一个品种。UPGMA聚类将23个品种分成2类,聚类结果与叶片特征一致。引物UBC855可以将23个绣球花品种完全区分,依此建立了23个绣球花品种的指纹图谱。研究结果为绣球花分类,品种鉴定、分子育种和子代鉴定提供了重要的依据。
- 彭继庆曹福祥曹基武董旭杰刘志明任锐熊亚丽张鹏鸿
- 关键词：绣球花ISSR指纹图谱
- 珙桐种子败育相关基因CesA的克隆及表达分析被引量：9
- 2016年
- 严重的种子败育是影响珙桐自然繁殖的重要原因之一,调控种子败育的分子机制及关键基因目前尚不清楚。根据本研究小组前期获得的珙桐种子转录组数据,筛选到22个转录本,分属14个纤维素合酶Ces A编码基因,所有转录本在败育种子中均呈现上调表达趋势。分析珙桐种子中的纤维素含量发现,正常种子在发育过程中纤维素含量持续升高,而在败育种子中纤维素含量显著高于正常种子。挑选4个在败育种子中显著上调的Ces A基因进行q PCR分析,结果表明它们表达模式相似,在败育种子中表达量均显著高于正常种子,且在正常种子发育后期上调表达。挑选其中表达差异最显著的c43681.graph_c0进行克隆获得882 bp片段。经序列比对,其编码产物包含292个氨基酸,与拟南芥纤维素合酶Ces A4同源性最高。分析c43681.graph_c0在珙桐不同组织中的表达量发现,该基因在茎中表达量较低,而在果肉中表达量较高,在败育种子中表达量显著高于其它组织。本研究筛选到的c43681.graph_c0可能是一个在珙桐生殖器官中调控纤维素合成的关键基因。
- 熊亚丽曹福祥刘志明董旭杰李萌
- 关键词：种子败育发育
- 珙桐MYB转录因子DiMYB1基因的克隆及表达分析被引量：11
- 2016年
- 根据珙桐转录组测序结果,筛选到一个与原花青素合成相关的基因,通过克隆该基因片段并进行序列分析确定该基因编码一个珙桐MYB转录因子,将其命名为DiMYB1(GenBank登录号KR996175)。该基因开放阅读框全长为924 bp,编码产物包含307个氨基酸。对其编码产物的基本理化性质、亲水性和疏水性、保守结构域、亚细胞定位等方面进行了生物信息学分析和预测。对DiMYB1基因编码产物的氨基酸序列进行聚类分析表明,其与拟南芥MYB123转录因子的同源性最高。应用qRT-PCR分析该基因的表达模式发现,DiMYB1基因在珙桐紫色幼叶中的表达量最高,其次是雄蕊,在芽、茎、成熟叶片、苞片、果肉和种子中只有微量表达。另外,DiMYB1基因的表达量在珙桐败育种子中显著高于正常种子,且在中期败育种子中表达量达到最高。构建原核表达载体pET-28a(+)-DiMYB1,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。本研究通过对DiMYB1基因进行克隆与表达分析,为探索该基因在珙桐逆境胁迫、花青素合成和种子发育过程中的调控功能奠定基础。
- 戴鹏辉任锐曹福祥刘志明李萌
- 关键词：MYB转录因子逆境胁迫
- 珙桐实时定量PCR内参基因的筛选及稳定性评价被引量：25
- 2016年
- 实时荧光定量PCR(qPCR)技术被广泛应用于基因表达分析,选用合适的内参基因是运用该技术准确分析目标基因表达变化的前提。本研究以珙桐不同器官为材料,采用qPCR技术分析了珙桐中6个管家基因(ACT7、eIF、EF1a、GAPDH、β-TUB、18S rRNA)及2个新内参基因(CAC、TIP41),共8个候选内参基因的表达情况,并利用ge Norm、Norm Finder和BestKeeper3种软件对候选内参基因的表达稳定性进行了评价。结果表明,CAC和ACT7在珙桐营养器官与生殖器官中均表达稳定,且新内参基因CAC的表达稳定性优于ACT7;GAPDH、EF1a、18S rRNA和TIP41在珙桐营养器官与生殖器官中均表达不稳定,尤其是GAPDH和18S rRNA的表达稳定性更差;β-TUB在珙桐营养器官中表达更稳定,而eIF在珙桐生殖器官中表达更稳定。
- 任锐戴鹏辉李萌刘志明曹福祥
- 关键词：实时定量PCR内参基因
- 珙桐种子快速繁殖技术的研究被引量：9
- 2016年
- 珙桐种子在自然条件下一般需要经过1-2年的休眠期才能萌发成苗,较长的休眠期限制了珙桐的繁殖能力。本研究以采集刚结出的珙桐种子为材料,利用种胚组织培养培育珙桐幼苗。研究从培养基成分、灭菌方式、激素配比、培养条件等方面分析了影响珙桐种子萌发和幼苗生长的因素。结果表明,在适合的条件下,当年产的珙桐种子可以跳过休眠期直接发育成苗。本研究为打破珙桐种子休眠,实现高效率、低成本快速育苗提供了理论基础。
- 吴俊长李萌曹福祥吴林世刘志明邓飘云
- 关键词：种子休眠
