谢雨辰
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院蚕业研究所更多>>
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- 家蚕山梨醇脱氢酶基因转录特性分析
- 为了明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH（BmSDH-1,BmSDH-2a和Bm SDH-2b）的转录特性。用5′RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆家...
- 朱娟谢雨辰陈艳荣唐顺明易咏竹沈兴家
- 关键词：家蚕启动子滞育转录起始位点
- 文献传递
- 家蚕滞育关联山梨醇脱氢酶基因的启动子活性分析被引量：2
- 2018年
- 【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动子区序列,分别构建带有萤火虫荧光素酶报告基因的载体pGL3-BmSDH-P-luc,并与pRL-CMV报告质粒(含海肾荧光素酶报告基因)共转染家蚕BmN细胞,通过双荧光素酶检测系统检测BmSDH基因启动子活性;分别在BmN细胞培养基中添加昆虫保幼激素、蜕皮激素和滞育激素,通过双荧光素酶检测系统检测不同浓度激素处理对BmSDH-2a基因启动子活性的影响。【结果】BmSDH-1的转录起始位点为A(-41),BmSDH-2a的转录起始位点为C(-41),BmSDH-2b的转录起始位点为A(-40)(翻译起始位点为+1)。双荧光素酶检测结果表明,BmSDH-2a启动子活性极显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,BmSDH-2a 355 bp长度片段的启动子活性极显著高于674 bp和1 117 bp长度片段。用不同浓度滞育激素处理BmN细胞后,BmSDH-2a的1 117 bp启动子活性随着滞育激素浓度的升高有上升的趋势,当浓度高于100 ng/mL时启动子活性有所降低但仍保持在较高水平;用保幼激素进行处理后,随着激素浓度的升高启动子活性逐渐降低;蜕皮激素处理后,0.1 ng/mL激素显著增强启动子活性,当激素浓度继续升高启动子活性逐渐降低。【结论】确定了BmSDH基因的转录起始位点。BmSDH-2a启动子活性显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,一定浓度的蜕皮激素能显著提高BmSDH-2a启动子活性。研究结果有助于阐明BmSDH基因在家蚕滞育中的功能。
- 朱娟朱娟陈艳荣谢雨辰易咏竹沈兴家
- 关键词：家蚕启动子滞育转录起始位点
- 家蚕bmo-miR-34对BmE74基因表达的调控被引量：1
- 2016年
- 为了研究家蚕bmo-miR-34(一类高度保守的miRNA)对E74基因(BmE74)的表达调控作用,首先利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22进行结合位点预测,然后从家蚕丝腺组织中克隆了bmo-miR-34前体序列,分别构建bmo-miR-34表达载体和靶基因BmE74 3'UTR重组表达载体,利用双报告基因荧光检测系统在细胞水平研究bmo-miR-34对BmE74基因的转录后调控作用。生物信息学预测结果表明,BmE74 3'UTR具有bmo-miR-34潜在结合位点;体外转染试验结果显示,与对照相比,转染bmo-miR-34重组质粒的细胞荧光素酶活性极显著下调(P<0.01),但是当加入人工合成的bmo-miR-34抑制物后荧光素酶活性显著上调(P<0.01)。说明bmo-miR-34对BmE74的转录后表达具有抑制作用。
- 王欣范洋洋陈晨谢雨辰蒋涛汪生鹏沈兴家
- 关键词：家蚕
- 家蚕山梨醇脱氢酶基因启动子的特性分析
- 山梨醇脱氢酶（sorbitol dehydrogenase，SDH）是山梨醇转化为糖原的关键酶，家蚕卵中山梨醇含量的变化与卵期滞育的发动、持续和停止有着密切的平行关系。家蚕有3个SDH基因，分别为BmSDH-1、BmSD...
- 谢雨辰
- 关键词：家蚕基因启动子特性分析
- 家蚕山梨醇脱氢酶基因特性分析
- 为了明确家蚕滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因（Bm SDH）Bm SDH-1、Bm SDH-2a和Bm SDH-2b的特性,我们用5′RACE技术确定3个Bm SDH基因的转录起始位点;分别克隆3个Bm SDH基因约1kb及...
- 朱娟谢雨辰陈艳荣唐顺明易咏竹沈兴家
- 关键词：家蚕启动子滞育转录起始位点
- 对丝腺细胞因子SGF-1具有调控作用的家蚕miRNAs功能研究被引量：1
- 2016年
- 为了研究家蚕miRNAs对丝腺细胞因子SGF-1表达的调控作用,以SGF-1为靶基因,利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22预测对SGF-1具有潜在调控作用的候选家蚕miRNAs,经茎环PCR鉴定后分别构建重组表达载体,在细胞水平研究家蚕miRNAs的功能。结果表明,转染了bmo-miR-305*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P<0.01);转染了bmo-miR-3327*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P<0.01);再各自转染了inhibitors后荧光蛋白表达量均上调(P<0.05)。说明SGF-1 3'UTR上存在bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*的结合位点,且bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*对SGF-1的转录后表达具有一定抑制作用。
- 王欣陈晨范洋洋谢雨辰钱平唐顺明沈兴家
- 关键词：家蚕MIRNAS
