沈兴家
- 作品数:206 被引量:392H指数:9
- 供职机构:江苏科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 昆虫激素体外调节家蚕滞育激素受体基因的表达被引量:2
- 2013年
- 为了深入研究家蚕滞育的分子机理,从家蚕基因组中扩增了1395 bp和972 bp 2个不同长度的滞育激素受体基因Bmdhr启动子片段,以pGL3.0 Basic为载体,分别构建荧光素酶报告质粒,利用家蚕细胞瞬时表达系统分析其转录活性以及昆虫保幼激素类似物(JHA)、蜕皮激素(20-OH-ecdysone)和滞育激素(DH)对其活性的影响.结果表明:1395 bp的Bmdhr启动子活性显著低于972bp的Bmdhr启动子,这说明Bmdhr启动子在-941^-1364nt区间存在负调控元件.JHA浓度为2,4,6μg/mL时,极显著地增强启动子活性;浓度为1μg/mL时活性显著减弱,而为8μg/mL时则活性极显著减弱.20-OHecdysone对Bmdhr启动子活性的影响具有剂量效应,低浓度(1,2μg/mL)时显著增强启动子活性;浓度为4μg/mL时,启动子的活性显著减弱;但当浓度继续升高时,启动子活性又极显著增强.DH对Bmdhr启动子活性的影响同样具有剂量效应,其浓度为10~40 nM时,显著增强启动子活性;而当其浓度达到60 nM时,启动子活性变化不显著.
- 王力刚朱娟王猛唐顺明沈兴家
- 关键词:昆虫激素家蚕启动子基因表达调控
- 一种提高家蚕细胞表达外源蛋白分泌率的方法
- 一种提高家蚕细胞表达外源蛋白分泌率的方法,设计并合成用于干扰家蚕BmN细胞中BiP基因的RNAi干扰片段,转染BmN细胞24h后继续转染携带外源基因的表达载体,72h后即可以显著提高外源蛋白的分泌率。该方法操作简单易行,...
- 郝碧芳刘娜孙璐萍徐瀛潘世佳沈兴家黄金山
- 文献传递
- 利用BmIML-2基因筛选家蚕核型多角体病毒病抗性的方法
- 本发明公开了利用BmIML‑2基因筛选家蚕核型多角体病毒病抗性的方法,所述方法在上蔟前最后一次给桑时添食核型多角体病毒,并以BmIML‑2基因的转录水平为检测指标,判断家蚕对病毒的抗性强弱。与现有技术相比,本发明具有以下...
- 赵巧玲沈东旭郭际云佟美金夏定国裘智勇沈兴家
- 文献传递
- 用人工饲料育进行家蚕一代杂交种的杂交率检验初报被引量:4
- 2005年
- 用人工饲料育对21个家蚕品种进行了调查,收蚁24h疏毛率最高的是菁松×皓月,达到9988%,最低的是春·蕾×锡·,为7807%,大部分品种收蚁48h疏毛率达到98%以上。分析供试家蚕品种的蚁蚕疏毛率、杂交率的检验结果和饲料成本认为,菁松×皓月、春·蕾×镇·珠、苏·镇×春·光、鲁7×9202、781×782·734、871×872等适合用人工饲料育进行一代杂交种的杂交率检验。
- 汪萍李奕仁叶夏裕李桂芳沈兴家蒋建敏韦先龙
- 关键词:人工饲料育家蚕一代杂交种杂交率检验
- Bmo-miR-2788对家蚕丝胶蛋白基因Ser-1的表达调控
- 2019年
- 通过生物信息学分析发现,家蚕丝胶蛋白基因BmSer-1的3′非翻译区(3′-UTR)存在微小RNA Bmo-miR-2788的结合位点。半定量PCR结果显示,Bmo-miR-2788在家蚕5龄第4天幼虫的8个受试组织中均有表达,但在中部丝腺中表达水平最高;而BmSer-1仅在中部丝腺中被检测到。分别构建BmSer-13′-UTR和Bmo-miR-2788的表达载体pGL3.0(A3-luc-BmSer-1-3′-UTR-SV40)和pcDNA3.0(ie1-egfp-pri-Bmo-miR-2788-SV40),共转染BmN细胞,结果表明Bmo-miR-2788上调BmSer-1表达(P<0.01);当将上述载体与合成的Bmo-miR-2788抑制剂共转染BmN细胞时,BmSer-1表达显著下调(P<0.05)。为验证Bmo-miR-2788在蚕体内对BmSer-1表达的调控作用,将Bmo-miR-2788表达质粒与其阴性对照(pcDNA3.0)分别注射到家蚕5龄第3天幼虫体内,qRT-PCR分析结果显示,与阴性对照相比,注射Bmo-miR-2788后36 h中部丝腺中的BmSer-1表达显著上调(P<0.01)。上述结果表明Bmo-miR-2788正向调控BmSer-1基因的表达。
- Rehana Kandhro陈艳花钱平钱平沈兴家
- 关键词:MIRNA基因调控
- 谈我国蚕品种改良的现状
- <正>1897年杭州蚕学馆设立,标志着我国现代蚕业科技研究的开端.经过一百多年几代蚕业科技工作者的艰辛努力,特别是新中国成立后的50余年里,我国的蚕品种改良取得了举世瞩目的成就,育成的常规蚕品种基本上达到国际先进水平.近...
- 沈兴家李奕仁
- 文献传递
- 家蚕bmo-miR-34对BmE74基因表达的调控被引量:1
- 2016年
- 为了研究家蚕bmo-miR-34(一类高度保守的miRNA)对E74基因(BmE74)的表达调控作用,首先利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22进行结合位点预测,然后从家蚕丝腺组织中克隆了bmo-miR-34前体序列,分别构建bmo-miR-34表达载体和靶基因BmE74 3'UTR重组表达载体,利用双报告基因荧光检测系统在细胞水平研究bmo-miR-34对BmE74基因的转录后调控作用。生物信息学预测结果表明,BmE74 3'UTR具有bmo-miR-34潜在结合位点;体外转染试验结果显示,与对照相比,转染bmo-miR-34重组质粒的细胞荧光素酶活性极显著下调(P<0.01),但是当加入人工合成的bmo-miR-34抑制物后荧光素酶活性显著上调(P<0.01)。说明bmo-miR-34对BmE74的转录后表达具有抑制作用。
- 王欣范洋洋陈晨谢雨辰蒋涛汪生鹏沈兴家
- 关键词:家蚕
- 一种家蚕实用品种转基因用蚕卵的制备方法
- 本发明公开了一种家蚕实用品种转基因用蚕卵的制备方法。该方法是以二化性家蚕实用品种“秋丰”为材料,从越年蚕卵丙<Sub>2</Sub>胚胎期开始用15℃~20℃的温度黑暗催青,胚胎发育至己<Sub>5</Sub>期时用25...
- 沈兴家唐顺明赵巧玲陈丽媛张国政郭锡杰
- 文献传递
- BmNPV和AcMNPV egt基因启动子特性及家蚕海藻糖酶基因启动子活性的滞育激素调节研究
- 昆虫杆状病毒是潜在的无污染杀虫剂,但是其缓慢的发病致死作用,极大地限制了它作为杀虫剂的应用.杆状病毒的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(egt)基因为病毒复制的非必需基因,缺失egt基因的病毒可以加速宿主昆虫的死亡,提高...
- 沈兴家
- 关键词:家蚕EGT基因
- 文献传递
- 基于trnL内含子序列的桑属植物分子系统学初探被引量:11
- 2008年
- 用PCR产物直接测序法对12份桑种质、1份无花果和1份构树的亮氨酸转运RNA基因(trnL)内含子序列进行了测定。tmL序列长度变异范围为534~561bp,平均核苷酸组成为0.39100(A)、0.27114(T)、0.17679(C)、0.16086(G),平均A+T含量为0.66214,说明该序列富含A/T。利用PHYLIP软件构建其最大简约数(maximum likelihood,DNAML)分子系统发育树,聚类结果表明桑属所有材料聚为一类,进一步证明桑属为单系,为探明桑属植物的亲缘关系提供了新的分子生物学证据。
- 汪伟王兴科朱昱苹汪生鹏张林潘一乐沈兴家杨永华赵卫国
- 关键词:桑属植物叶绿体DNA系统学分析