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靶向PKCI基因RNAi对DEV增殖的影响被引量：2: 2016年; 为研究蛋白激酶C抑制蛋白(PKCI)在鸭肠炎病毒增殖的作用机制,根据Gen Bank PKCI基因序列,设计并构建p Silencer-PKCI-l^4,比较后选取抑制效率最高的p Silencer转染DEF细胞,采用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析靶向PKCI基因RNA干扰下PKCI基因转录变化。结果显示:p Silencer-PKCI-1~4分别转染DEF细胞,其沉默效率分别为70.01%、66.45%、74.6%和76.02%;p Silencer-PKCI-4转染DEF细胞48 h,对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为64.97%;p Silencer-PKCI-4转染24 h后再感染DEV,在36 h时p Silencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为54.25%;感染DEV 24 h后再转染p Silencer-PKCI-4,再处理72 h时p Silencer-PKCI-4对DEV-NP基因转录的沉默效率最高,为47.83%。本试验结果以期为鸭肠炎病毒核衣壳蛋白的致病机理研究奠定基础,为DEV的防控提供新思路。; 罗乐熊朝丽郑敏吴良涛文明; 关键词：鸭肠炎病毒 RNA干扰

DEV感染对鸭主要TLRs转录水平影响研究: 鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus，DEV)又称鸭瘟病毒(Duck plague virus，DPV)，是危害养鸭业健康发展的重要病原之一。目前对DEV的研究主要集中在基因结构与功能、快速检测技术及诱导...; 罗乐; 关键词：鸭肠炎病毒免疫应答 TOLL样受体基因转录; 文献传递

一例猪圆环病毒病2型的诊断: 引言猪圆环病毒病(Porcine circovirus infection)是由猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)引起猪的一种传染病,临床症状主要表现为进行性呼吸困难、消瘦、体表淋巴结肿大、腹泻、...; 吴良涛郑敏罗乐文明; 文献传递

鸭瘟强毒人工感染雏鸭的显微和超微病理学变化被引量：7: 2017年; 为了解鸭瘟病毒(DPV)人工感染雏鸭后的组织器官病变规律、感染后病毒分布情况及细胞超微结构变化,试验以DPV GZ强毒株人工感染90羽15日龄健康雏鸭,分别在感染后3、6、10、18、30、48、72、96、108 h剖杀,采用PCR技术进行病原鉴定,并通过光学显微镜和透射电镜进行病理组织显微和超微结构观察。结果显示,人工感染3 h后即可通过PCR技术检测出DPV核酸;透射电镜观察表明感染后10 h可在脾脏中首先观察到少量的病毒,30 h后胸腺开始发现病毒,病毒的数量随感染时间增加逐渐增加;感染18 h后,中枢免疫器官胸腺表现为淋巴细胞数量降低,组织间隙增大;脾脏组织病变严重,其余器官组织结构均出现程度较轻的组织损伤;感染后30 h,中枢免疫器官的淋巴细胞极度减少,器官组织结构模糊不清,出血较为严重;一些器官则出现细胞肿胀,肠道等器官组织也有细胞变性、出血等病理变化;在死亡鸭的肝脏、脾脏、十二指肠、胸腺发现数量极多的病毒。对照组鸭组织中未发现病理变化。这些研究结果可以为鸭瘟病毒的致病机制研究和鸭瘟的病理学诊断提供试验依据。; 刘忠伟杨颖江楠罗乐文明; 关键词：鸭瘟病毒雏鸭组织病理变化超微结构变化

猪伪狂犬贵州株gE基因的克隆及其分子特征分析: 引言/目的随着养猪业的规模化及集约化飞跃发展,猪伪狂犬的发病也在日益增多.猪伪狂犬病给养猪业造成的经济损失仅次于猪瘟和口蹄疫[1].gE糖蛋白是其主要的独立因子之一,缺失gE基因能使PRV毒力很大程度上降低但又不会影响...; 罗乐文明王杰吴良涛郑敏

贵州某猪场4种主要疫病抗体检测分析: 引言随着饲养方式的改善和管理水平的提升,规模化猪场的生产效益得到了较好的提高。但由于一些疫病的发生与流行,常常给猪场造成了很大的经济损失。目前,在规模化养猪场中,危害最大的传染病主要是猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪瘟...; 郑敏吴良涛罗乐文明; 文献传递

鸭源PKC基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2016年; 为建立基于鸭源宿主细胞的蛋白激酶PKC基因的实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank数据库的PKC基因设计、合成特异性引物,通过PCR技术扩增目的基因片段,构建重组质粒GV pXT19-TPKC,并以其为阳性标准品建立荧光定量PCR检测方法和标准曲线,进行重复性、特异性和敏感性验证。结果显示,荧光定量PCR标准曲线为y=-3.334 0x+44.199,相关系数为0.995 4,扩增效率为99.19%;熔解曲线仅出现单特异峰,未检测到H5亚型/H7亚型/H9亚型禽流感病毒疫苗毒株、新城疫病毒和鸭肝炎病毒等参考毒株的核酸样本的荧光信号。说明,建立的荧光定量PCR方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏性。; 罗乐赵碧郑敏吴良涛文明; 关键词：实时荧光PCR 蛋白激酶C SYBR

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罗乐