丁红晖
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:同济大学医学院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
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- 丙型肝炎病毒1b型NS3基因扩增方案的改进
- 2012年
- 目的优化扩增武汉地区HCV1b型患者HCV非结构蛋白3(NS3)的cDNA,并进行测序。方法从患者血清中提取HCVRNA,采用型特异性引物扩增分型法检测HCV患者基因分型。设计3对外侧引物和3对内侧引物,采用套式PCR技术(方案一)分别扩增HCV1b型患者的HCVNS33个区段,然后用3对内侧引物进行测序。为了优化NS3扩增和测序效果和减少操作繁琐,对引物进行改进,设计1对外侧引物和1对内侧引物,采用改进的套式PCR技术(方案二)直接扩增HCV1b型患者的HCVNS3区,然后用3个正向引物和1个逆向引物进行测序。结果改进的套式PCR技术(方案二)与套式PCR技术(方案一)相比,操作较为简单,而且扩增效率增高,扩增效果较好。结论采用改进的套式PCR技术(方案二)扩增和测序HCVNS3区更迅速、有效、实用。
- 柯晓煜丁红晖郭燕陈明发林永夏幼辰孙潺杨东亮吴珺
- 关键词:HCVNS3套式PCR