张帆
- 作品数：14 被引量：13H指数：2
- 供职机构：大连大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省普通高等教育本科教学改革研究项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 2-D-脱氧葡萄糖对二甲双胍抑制人结肠癌细胞作用的影响及机制被引量：1
- 2019年
- 目的观察己糖激酶抑制剂2-D-脱氧葡萄糖(2-DG)对降糖药二甲双胍抑制人结肠癌细胞作用的影响,并探讨其机制。方法将不同浓度的2-DG、二甲双胍单药或联合作用于人结肠癌HT-29细胞,采用台盼蓝染色法测算细胞死亡率观察细胞活力,MTT掺入法测算细胞存活率观察细胞增殖能力,流式细胞术以Annexin V/PI双染色法测算细胞凋亡率,免疫印迹法检测细胞中的蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(TOR)信号通路相关蛋白[AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、核糖体p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化核糖体p70S6激酶(p-p70S6K)]、自噬相关蛋白p62。结果不同浓度2-DG(1、5、10 mmol/L)和二甲双胍(5、10 mmol/L)联合处理24 h后,HT-29细胞死亡率均高于单药处理细胞(P均<0. 05);在2-DG、二甲双胍均为10 mmol/L时,HT-29细胞死亡率最高(P均<0. 01)。以10mmol/L 2-DG与不同浓度的二甲双胍(0、1、5、10、15、20 mmol/L)联合处理48 h,在二甲双胍浓度≥5 mmol/L后HT-29细胞存活率低于单药处理的细胞(P均<0. 05),10 mmol/L时HT-29细胞存活率最低(P均<0. 01),20 mmmol/L时HT-29细胞存活率未继续明显降低。不同浓度2-DG(5、10 mmol/L)和10 mmol/L二甲双胍联合处理24 h,仅10 mmol/L 2-DG与二甲双胍处理时HT-29细胞凋亡率高于单药处理细胞(P均<0. 05),且细胞中p-AKT、pp70S6K、p62蛋白相对表达量低于单药处理细胞(P均<0. 05)。结论 2-DG能增强二甲双胍抑制人结肠癌HT-29细胞活力、增殖和诱导细胞凋亡的作用,以10 mmol/L 2-DG时增强作用最明显;其作用机制可能与两者协同抑制AKT/mTOR信号通路及细胞自噬有关。
- 谢敏李红霞顾馨仪郝舒捷王仁军王仁军刘庆平秦建中
- 关键词：二甲双胍细胞自噬
- 7-酮基胆甾醇-9-羧基壬烷活化的巨噬细胞受体CD36信号通路研究
- 目的:氧化低密度脂蛋白(oxLDL)被认为是动脉粥样硬化发生的主要和独立危险因子,清道夫受体CD36由于其具有识别并大量摄取oxLDL的能力而成为动脉粥样硬化研究中重要的靶基因。7-酮基胆甾醇-9-羧基壬烷(7-keto...
- 刘庆平李文哲迟彦王仁军张帆刘哲
- 文献传递
- 生物学技能比赛促进本科实验教学的探讨与实践被引量：1
- 2015年
- 根据四年来举办生物学实践技能比赛取得的经验和结果,就目前实践教学中存在的问题进行了分析,探讨了比赛在提高教学质量、激发学习兴趣、引领创新、提高实验技能、改革考核模式、提高学生综合素质等方面的作用。
- 曹阳那杰姚子昂夏秀英吴海歌张帆侯义龙
- 关键词：生物学比赛实验教学
- 抗磷脂综合症动脉血栓发病机理研究
- 刘庆平松浦荣次王仁军张帆迟彦刘哲林芃李清朱永宁逄越董晓宇李文哲
- 本项目属医药卫生基础研究领域，是在国家自然科学基金30371380和教育部留学人员科研启动基金资助下完成的。抗磷脂综合症(antiphospholipid syndrome; APS)是1986年新确立的一种隶属于系统性...
- 关键词：
- 关键词：抗磷脂抗体氧化型低密度脂蛋白
- 基础生命科学实验课程的建设与实践
- 2019年
- 大连大学为培养学生基础课程的实践能力,其生命科学与技术学院为学校非生物类本科生开设“基础生命科学实验”课程,通过精心筛选实验项目,严格管理和安排实验过程,细致的课程建设,取得了良好的教学效果,参与课程建设和实践的全体教师在学生评教环节均获得了修课学生高度好评,各老师的教学水平和授课效果都取得了优异的成绩。基础生命科学实验课程体系的建设与实践得到了辽宁省和大连大学教学改革项目的资助。
- 迟彦张立娟付常振曹阳张帆王欢金晔侯义龙
- 关键词：实验课程素质教育
- 缺乏葡萄糖和谷氨酰胺对黑色素瘤A375细胞增殖与凋亡的影响
- 2016年
- 目的:探讨体外培养条件下,缺乏葡萄糖(No-Glu)或谷氨酰胺(No-Gln)对黑色素瘤细胞生长和凋亡的影响。方法:分别利用MTT、流式细胞术、化学发光、Western blotting以及免疫荧光染色等方法检测No-Glu和No-Gln对人恶性黑色素瘤A375细胞初级纤毛形成、增殖、ATP含量、细胞周期以及细胞凋亡等多方面的影响。结果:在No-Glu或No-Gln培养液中培养,A375细胞的细胞增殖率显著低于对照组(正常培养液)[(21.0±1.9)%或(46.2±9.8)%vs 100%,P<0.01或P<0.05]。No-Gln培养液使A375细胞纤毛形成阳性细胞率显著高于对照组[(16.8±2.3)%vs(6.2±1.0)%,P<0.01],G1期细胞减少(14.4±6.7)%(P<0.05)、S期细胞增加(75.0±1.9)%(P<0.05)。No-Glu培养液对A375细胞纤毛形成与G1和S期细胞比例均无显著影响。此外,No-Gln使A375细胞内ATP含量下调了(64.5±4.9)%(P<0.01),而No-Glu仅使ATP含量下降了(11.1±2.1)%(P>0.05)。No-Glu使A375细胞的凋亡率显著高于对照组[(26.1±1.5)%vs(6.1±7.1)%,P<0.01],并上调促凋亡蛋白Noxa、降低抗凋亡蛋白Mcl-1的表达水平。No-Gln对细胞凋亡率、Noxa和Mcl-1蛋白表达无明显影响。结论:No-Glu或No-Gln均可抑制A375细胞增殖,但No-Gln导致S期细胞周期阻滞、抑制ATP合成的作用更明显,而No-Glu诱导细胞凋亡的作用更强。
- 于田田张帆路遥李红霞谢敏刘庆平卢腾秦建中迟彦
- 关键词：黑色素瘤A375细胞葡萄糖谷氨酰胺
- 光谱法研究Cu^(2+)诱导的不同时间的LDL体外氧化被引量：3
- 2009年
- 氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)被认为是动脉硬化的关键致病因素。文章综合运用紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(circular dichroism,CD)光谱研究了Cu2+诱导不同时间的LDL体外氧化过程。随着氧化时间的增加,生成的丙二醛(malonaldehyde,MDA)的量逐渐增加,其相对应的430nm处的荧光强度也随之加强,氧化过程中生成了新的氧化产物。氧化低密度脂蛋白紫外吸收增强;表征氨基酸残基信息的特征荧光强度和同步荧光强度降低;载脂蛋白B-100(apolipoprotein B-100,apoB-100)α-螺旋含量减少。实验结果表明,LDL氧化过程中Cu2+不仅诱导了氧化产物的生成,而且改变了apoB-100的构象进而导致了生色基团的微环境的变化。
- 孙霞刘庆平郑学仿刘哲王仁军黄振宇张帆
- 关键词：氧化低密度脂蛋白紫外光谱荧光光谱同步荧光光谱
- β2糖蛋白Ⅰ第五结构域及其突变体、短肽片段的原核表达及活性分析被引量：1
- 2018年
- β2糖蛋白Ⅰ（beta 2-glycoproteinⅠ,β2GPⅠ）是抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome,APS）血清中抗磷脂抗体（antiphospholipid antibody,a PL）的主要抗原。β2GPⅠ通过第五结构域与阴性磷脂ox LDL结合,进而被a PL识别,是APS动脉血栓发生的关键事件。该研究构建了编码β2GPⅠ第五结构域（β2GPⅠ-DⅤ）、β2GPⅠ-DⅤ突变体及β2GPⅠ-DⅤ的Phe280-Ala320片段的原核表达载体,对其进行诱导表达和纯化,解析了β2GPⅠ-DⅤ与阴性磷脂结合的分子机制,结果表明,β2GPⅠ-DⅤ中Cys281-Cys288以及Ser311-Lys317区段在空间上维持一定构型是与CL结合所必须的前提条件,而C245-C296,C288-C326两个二硫键在维持二者空间构型方面起到一定的作用。在此基础上,进一步检测了具有结合CL生物学活性的r DⅤ结合ox LDL以及APS血清中ox LDL的活性,表明r DⅤ具有与天然β2GPⅠ相一致的生物学活性。该研究获得的rβ2GPⅠ-DⅤ,以及与ox LDL结合的方法体系的建立,为APS早期实验室诊断奠定基础。
- 李明英王仁军张帆迟彦
- 关键词：抗磷脂综合征心磷脂氧化低密度脂蛋白原核表达
- 富马酸二甲酯对人角质形成细胞HaCat生长和自噬的影响被引量：1
- 2016年
- 该文探讨了富马酸二甲酯（dimethyl fumarate，DMF）对人角质形成细胞HaCat增殖、细胞周期和细胞自噬的调节作用以及相关机理的影响。应用MTT实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和细胞周期的变化。并用免疫荧光染色、Western blot技术检测自噬相关蛋白的水平与分布。结果显示，DMF在25μmol／L时，可较明显地抑制HaCat细胞的增殖，当浓度达到150μmol／L时，细胞几乎完全失去增殖能力。低剂量DMF（25～50μmol／L）同时也可显著抑制HaCat细胞DNA合成，与对照组相比，S期细胞减少50％（P〈0．01），而G1期细胞增高近20％（P〈0．05）；高剂量DMF（100μmol／L）可导致G2与M期阻滞（P〈0．01），而氧自由基抑制剂NAC（N-Acetyl—L—cysteine）预处理则几乎完全逆转这一现象。DMF处理诱导细胞出现明显的自噬特征，表现为LC3-II（microtubule associated protein 1 light chain 3-II）免疫荧光染色呈点状分布并与溶酶体颗粒重合，LC3蛋白质脂化为LC3-II以及自噬相关蛋白成熟型Cathepsin D、LAMPI（lysosome—associated membrane glycoprotein 1）、p62水平增加。此外，DMF对ERK（extracellular regulated protein kinases）、AKT（phosphatidylinositol 3 kinase）以及mTOR（mammalian target of rapamycin）信号相关蛋白的磷酸化也有显著的抑制作用。这些结果表明，DMF可显著抑制人角质形成细胞增殖、抑制DNA合成、诱导细胞发生自噬，其机理可能与DMF抑制AKT／mTOR、ERK信号功能有关。
- 李红霞张帆姚廷燕樊星王仁军刘庆平秦建中
- 关键词：富马酸二甲酯HACAT细胞自噬AKT/MTOR
- 3D培养人工皮肤组织黑色素瘤模型建立及评价
- 2018年
- 目的建立体外人工皮肤组织黑色素瘤模型,为研究黑色素肿瘤侵袭和转移的机制及药物筛选奠定基础。方法采用3D培养技术,制备体外人工皮肤组织黑色素瘤C8161、A375模型。应用不同浓度血清(0.5%、5%)优化模型的最优培养条件。HE和免疫荧光观察该模型基底膜形成情况,检测黑色素瘤细胞C8161、A375侵袭能力。应用单层细胞培养检测细胞生长速度和细胞分泌E-钙黏素情况。采用Transwell实验检测不同黑色素瘤细胞侵袭能力。结果体外人工皮肤组织肿瘤模型建立成功,血清浓度0.5%为最佳3D培养条件。构建的人工皮肤组织肿瘤模型形成的基底膜良好,黑色素瘤细胞在此模型中发生侵袭和转移,且C8161侵袭能力强于A375细胞。侵袭力较弱的A375细胞增殖速度高于侵袭力较强的C8161细胞。C8161和A375细胞均不产生E-钙黏素。结论成功建立体外人工皮肤组织肿瘤模型,血清浓度为0.5%为最佳3D培养条件;黑色素瘤细胞的侵袭与生长速度并无直接关系,且失去E-钙黏素表达能力并不是导致肿瘤细胞侵袭的必要条件。
- 谢敏李明英张帆刘庆平秦建中迟彦
- 关键词：恶性黑色素瘤
