刘晓欢
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：西南大学园艺园林学院南方山地园艺学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 甘蓝BoSU03蛋白基因的克隆及其与SRK相互作用分析被引量：2
- 2015年
- 扩增了从甘蓝柱头蛋白质谱鉴定中获得的泛素蛋白BoSU03基因的编码序列。序列分析表明BoSU03与甘蓝泛素蛋白Bo1003815的核苷酸序列相似性最高,达98%,含有臂重复结构域,属于植物泛素蛋白家族。为探究BoSU03是否为自交不亲和S位点受体激酶(SRK)下游的互作蛋白,以SRK与ARC1相互作用为对照,利用GAL酵母双杂交系统对SRK与BoSU03进行了相互作用验证,结果表明,BoSRK/BoSU03的转化酵母在四缺平板SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/x-α-gal/25 mmol 3-AT上长势较好,显色较深,进一步检测发现BoSRK/BoSU03转化酵母的β-半乳糖苷酶活性值大于BoSRK/BoARCl转化酵母的活性值,这为进一步分析鉴定BoSU03是否参与SRK下游信号传导过程提供了依据。
- 毕云龙高启国施松梅刘晓欢蒲全明张莹张林成廉小平柳菁朱利泉
- 关键词：甘蓝酵母双杂交系统
- 结球甘蓝叶片卷曲过程中6个生长素相关基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2015年
- 生长素在结球甘蓝球叶向上、向内自然卷曲的过程中发挥着重要的调控作用。为挖掘重要的影响结球甘蓝叶片卷曲的生长素相关基因,通过对结球甘蓝莲座期叶片与结球期叶片的转录组进行对比分析,筛选出6个显著差异表达的生长素相关基因,分别为调控生长素动态平衡的Bo ILL6、Bo ASA1基因,控制极性运输的Bo SF21、Bo PIN4基因,参与信号转导的Bo ARF8、Bo GH3.5基因。对上述6个基因进行同源克隆,分别获得全长c DNA序列,序列分析发现6个基因均含有生长素相关的结构域。分子进化树分析发现各基因与芜菁的对应基因遗传关系最近,拟南芥次之。荧光定量PCR检测结果显示,Bo ILL6、Bo ASA1与Bo SF21的表达量变化最为显著,结球期叶片相对莲座期叶片的表达量差异均高达12倍以上,变化趋势与转录组数据分析结果基本一致,说明这3个基因可能与结球甘蓝叶片的卷曲发育密切相关。
- 蒲全明高启国张林成施松梅刘晓欢张莹毕云龙任雪松刘豫东朱利泉
- 关键词：结球甘蓝基因克隆
- 甘蓝MLPK的原核表达及其互作蛋白分离体系的建立被引量：1
- 2015年
- M–位点受体激酶(MLPK)是甘蓝自交不亲和反应的正向调控关键元件,其参与自交不亲和反应的分子机制尚不明确。为了分离与MLPK相互作用的蛋白,在分析了MLPK功能域的基础上采用PCR技术扩增了MLPK激酶结构域编码序列(记为MLPKK),通过体外定点突变技术构建了两种MLPK失活突变体(记为mlpk1和mlpk2),然后以p ET43.1a为载体构建了原核表达质粒p ET43.1a-MLPKK、p ET43.1a-mlpk1和p ET43.1a-mlpk2,并进行了原核表达和纯化。纯化的融合蛋白p ET43.1a-MLPKK、p ET43.1a-mlpk1和p ET43.1a-mlpk2分别与高度自交不亲和甘蓝‘A4’柱头总蛋白提取液进行孵育,孵育后利用融合蛋白序列中的6×His标签与Ni+结合的特性,钓取MLPK的互作蛋白,建立了分离MLPK互作蛋白的新方法。孵育产物经SDS-PAGE电泳显示,与两个突变体蛋白泳道对比,在p ET43.1a-MLPKK与柱头总蛋白提取液孵育产物的泳道中成功获得了候选的与MLPK互作的蛋白条带,这为后续互作蛋白质谱鉴定以及功能解析提供了技术支持。
- 刘晓欢高启国施松梅蒲全明毕云龙张莹朱利泉王小佳
- 关键词：甘蓝自交不亲和
- 辣椒离体培养中不定芽的诱导和伸长研究进展被引量：2
- 2013年
- 综述了辣椒离体培养中影响不定芽诱导的基因型、外植体、植物生长调节剂、其它添加物和基础培养基、碳源、培养容器等因素和影响伸长的植物生长调节剂、基础培养基等的研究进展;讨论了辣椒离体培养中不定芽诱导和伸长存在的问题以及今后的研究方向。
- 臧顺刘晓欢王启军
- 关键词：辣椒离体培养不定芽伸长
