陆彩玲 作品数:18 被引量:54 H指数:5 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
新烟碱类杀虫剂吡虫啉对大鼠卵巢功能的影响 被引量:2 2023年 目的 探讨新烟碱类杀虫剂吡虫啉(IMI)对大鼠卵巢功能的影响。方法 将30只21日龄的雌性SD大鼠随机分为3组,每组10只,根据IMI暴露的浓度分为低浓度组(19 mg·kg^(-1)·d^(-1))和高浓度组(38 mg·kg^(-1)·d^(-1)),对照组则给予同等体积的生理盐水。连续灌胃30 d,对动物状态进行记录;采用电化学发光法测定大鼠血清中孕酮和雌二醇(E_(2))的含量,Western Blot法检测大鼠卵巢中胆固醇侧链裂解酶(P_(4)50scc)和芳香化酶(Aromatase)的表达量,行卵巢组织切片苏木精-伊红(HE)染色以观察卵泡形态、统计各级卵泡数量,同时进行抗苗勒管激素(AMH)免疫组化染色观察其表达量的变化。结果 各组大鼠灌胃期间毛发、进食情况、活动情况均无明显异常。随IMI暴露剂量增加,大鼠血清孕酮和E_(2)水平也逐渐增加;与对照组相比,低浓度组和高浓度组孕酮水平略增高,但均无显著性差异(P>0.05);与对照组相比,高浓度组血清中E_(2)水平显著升高(P<0.05)。Western Blot结果显示,IMI暴露后大鼠卵巢组织中P_(4)50scc和Aromatase表达量随IMI浓度增加而升高,与对照组相比,低浓度组中P_(4)50scc和Aromatase的表达量虽有增加但无显著性差异(P>0.05),高浓度组中P_(4)50scc和Aromatase的表达量显著增加(P<0.01)。卵泡计数结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组大鼠卵巢中总卵泡数均显著减少(P<0.001);与对照组相比,高浓度组原始卵泡比例显著降低(P<0.001),低浓度组生长卵泡比例显著增加(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组的AMH表达均下降,IMI高浓度组AMH下降更明显。结论 IMI暴露后会导致大鼠卵巢甾体激素的生成增加,并改变卵泡发育的进程。 张雨彤 骆海燕 高二二 高小博 陆彩玲关键词:吡虫啉 卵巢 卵泡 甾体激素 五氯硝基苯影响大鼠卵泡发育的机制研究 被引量:3 2022年 目的探究有机氯农药五氯硝基苯(PCNB)影响大鼠卵泡发育的分子机制。方法将14只青春前期SD雌性大鼠随机分为对照组和实验组,每组各7只。实验组给予PCNB(100 mg·kg^(-1)·d^(-1)),对照组给予等体积玉米油,连续灌胃7 d。取卵巢组织HE染色,观察并统计各级卵泡数目;通过RNA-Seq测序筛选差异表达基因,随后进行GO富集和KEGG功能注释分析;Western Blot检测大鼠卵巢AKT的磷酸化水平和张力蛋白同源物(PTEN)的表达。结果与对照组相比,实验组原始卵泡显著减少(P<0.05),生长卵泡显著增加(P<0.05)。测序结果共筛选出261个差异表达的基因(|log2 Fold change|>1,q<0.05),与对照组相比,实验组上调的基因有62个,下调的基因有199个;GO分析显示差异表达基因主要富集在细胞分化、细胞内信号转导、ATP结合的微管装配等;KEGG富集分析提示PI3K-AKT信号通路富集的差异基因数目较多;Western Blot结果显示,与对照组相比,实验组AKT磷酸化水平显著增加(P<0.05);PTEN表达量显著减少(P<0.05)。结论PCNB加速大鼠原始卵泡发育与卵巢PI3K-AKT信号通路激活相关。 淡清华 骆海燕 张雨彤 高小博 陆彩玲关键词:五氯硝基苯 卵巢 卵泡发育 PI3K-AKT 槲皮素对结肠癌细胞生长的影响 被引量:14 2008年 通过MTT试验观察槲皮素对结肠癌细胞系RKO生长的影响;通过流式细胞仪技术观察槲皮素对细胞周期和细胞凋亡的影响;采用RT-PCR和Western印迹技术,确定槲皮素对p21、p27和p53表达的影响。MTT法显示槲皮素加药组生长抑制作用明显,且具有剂量依赖性;流式细胞仪分析结果显示,经5μmol/L槲皮素作用后细胞周期明显阻滞在G0/G1期;5、10、20μmol/L3个剂量组的细胞凋亡率分别为23.4%、24.2%、47.9%,而对照组为13.2%;p21和p27的mRNA及蛋白质表达水平上调,促凋亡蛋白p53表达水平上调。因此,槲皮素对RKO生长有明显的抑制作用,槲皮素可能通过上调p21和p27表达使RKO细胞周期阻滞于G0/G1期,可能通过上调促凋亡蛋白p53表达诱导RKO细胞发生凋亡。 谭赛男 陆彩玲 崔熠 马旭关键词:槲皮素 细胞周期 凋亡 植物类雌激素杨梅素对结肠癌细胞系RKO生长的影响 被引量:2 2008年 目的检测一种植物类雌激素杨梅素对人结肠癌细胞系RKO生长的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测杨梅素对RKO细胞系生长的影响;流式细胞仪技术检测杨梅素对细胞周期的影响;半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)确定杨梅素对抑癌基因p16INK4a表达的影响。结果MTT法显示杨梅素处理组对结肠癌细胞系生长有明显抑制作用;流式细胞仪分析结果显示,经杨梅素处理后RKO细胞周期明显阻滞在G0/G1期;RT-PCR结果显示杨梅素恢复了RKO细胞系p16INK4a的转录。结论杨梅素对RKO细胞系生长有明显的抑制作用,杨梅素可能通过上调抑癌基因p16INK4a的表达使RKO细胞周期阻滞于G0/G1期。 陆彩玲 柏珊珊 石心泉 马旭关键词:植物雌激素 杨梅素 细胞周期 P16INK4A 散发性夜发额叶癫痫遗传学病因分析 2011年 目的研究中国夜发性额叶癫痫(nocturnal frontal lobe epilepsy,NFLE)散发患者遗传学病因,探讨烟碱乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)相关基因在NFLE发病机制中的作用。方法经临床资料、家族史及辅助检查综合诊断,收集77例中国非家族性NFLE患者,提取基因组DNA,聚合酶链反应扩增nAChR相关基因CHRNA4、CHRNB2及CHRNA2部分区域,确认是否存在突变。如存在突变,则进一步分析突变对蛋白质疏水性和二级结构造成的影响。结果发现1例6岁患儿存在1种CHRNA4的新型杂合错义突变,导致nAChR-α4亚单位第3、4跨膜区间胞内环405位的丝氨酸突变为苯丙氨酸(S405F)。在200例中国人群健康对照筛查中未见同样突变。突变对蛋白质疏水性及二级结构均有一定影响。结论中国人群散发NFLE病例中存在CHRNA4基因的S405F突变,可能是NFLE新型遗传学病因。 刘慧 李震中 陆彩玲 吴立文关键词:遗传筛查 脑电描记术 亚砷酸钠对胚胎p66Shc表达调控的机制研究 2018年 目的探究亚砷酸钠对胚胎p66Shc表达调控的分子机制。方法利用5μmol/L亚砷酸钠处理HEK293ET细胞,收集细胞样品,利用实时定量PCR(Q-PCR)检测p66Shc转录水平,Western Blot检测Sirt1的蛋白表达;利用Sirt1siRNA和对照siRNA分别转染细胞,随后5μmol/L亚砷酸钠处理细胞,收集细胞样品,Western Blot检测亚砷酸钠对Sirt1和p66Shc蛋白表达的影响。结果与对照组相比,5μmol/L亚砷酸钠处理组p66Shc转录水平显著升高(P<0.001),Sirt1蛋白水平显著降低(P<0.001)。Sirt1siRNA转染能够抑制细胞Sirt1的表达。亚砷酸钠处理后,Sirt1siRNA转染组Sirt1的表达与对照siRNA转染组相比显著降低(P<0.001),p66Shc的表达显著升高(P<0.001)。结论亚砷酸钠可能通过抑制Sirt1的表达上调p66Shc的表达。 高小博 高小博 郑盼盼 张辰 马旭 陆彩玲关键词:亚砷酸钠 SIRT1 P66SHC 氧化应激 五氯硝基苯亚急性暴露对卵巢甾体激素合成的影响 被引量:1 2021年 目的探究五氯硝基苯(PCNB)亚急性暴露对SD大鼠卵巢甾体激素合成的影响。方法将30只3周龄雌性SD大鼠随机分为3组:给予50 mg·kg^(-1)·d^(-1)PCNB灌胃给药的为低剂量组,给予100 mg·kg^(-1)·d^(-1)PCNB灌胃给药的为高剂量组,给与等体积玉米油灌胃给药的为对照组,每组10只,连续灌胃28 d。用电化学发光法检测各组大鼠血清孕酮和E2水平;用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠卵巢组织中3种甾体激素合成关键酶:类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)及芳香化酶(Aromatase)的表达情况。结果PCNB亚急性暴露期间,两实验组大鼠的体重变化、卵巢系数与对照组比较均无显著差异(P>0.05);两实验组大鼠血清孕酮水平均显著高于对照组,血清E2水平均显著低于对照组(P<0.05)。Western Blot结果显示,大鼠卵巢组织中StAR的表达量低剂量组>高剂量组>对照组,各组组间无统计学差异(P>0.05);大鼠卵巢组织中P450scc表达量高剂量组>对照组>低剂量组,各组组间无显著性差异(P>0.05);低、高剂量组大鼠卵巢组织中芳香化酶表达水平均显著低于对照组(P<0.05),并呈剂量依赖性下降。结论PCNB亚急性暴露可导致大鼠血清孕酮和E2水平发生改变,其机制可能与卵巢组织中甾体激素合成关键酶的表达量改变有关。 李雯 李雯 淡清华 郐艳荣 高小博 陆彩玲关键词:卵巢 五氯硝基苯 槲皮素对结肠癌的抑癌机制研究 被引量:9 2009年 目的探讨槲皮素对结肠癌细胞系RKO中P53蛋白以及其下游基因Gadd45a表达的影响。方法采用免疫细胞化学的方法检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的P53蛋白表达的变化,采用RT-PCR与Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的Gadd45amRNA和蛋白表达的变化。此外,采用Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于EC109细胞后的Gadd45a蛋白表达的变化。结果槲皮素作用于RKO细胞后,细胞的P53表达增高,Gadd45amRNA和蛋白表达水平逐渐增高,并且呈现出一定浓度依赖性。另外,槲皮素作用于EC109细胞后,Gadd45a蛋白表达水平逐渐增高,也呈现出一定浓度依赖性。结论槲皮素可能通过上调P53依赖途径中p53基因表达使Gadd45a表达增高,由此介入了对肿瘤发生发展的抑制。 王冲 谭赛男 陆彩玲 姚楠 马旭关键词:槲皮素 RKO细胞 P53 GADD45A N-乙酰半胱氨酸抑制亚砷酸钠诱导心肌细胞凋亡和自噬作用的研究 被引量:2 2015年 目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制亚砷酸钠诱导H9C2细胞凋亡和自噬作用及机制。方法:用亚砷酸钠诱导H9C2细胞构建凋亡和自噬模型。采用CCK-8比色法检测细胞的存活率,Hoechst 33258核染色法观察凋亡细胞的形态和数量改变.双氯荧光素染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western Blot法测定蛋白P53、Bcl-2、Bax及LC3的表达水平,以及磷酸化ERK1/2蛋白及ERK1/2蛋白总量的表达水平。结果:与对照组相比,15μM亚砷酸钠处理的H9C2细胞存活率显著降低.细胞内ROS水平明显增加.凋亡细胞数量明显增多,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ比值明显增大(P<0.01)。1 mM NAC预处理后显著减少H9C2细胞内ROS的生成和促凋亡蛋白P53和Bax的表达,诱导抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高,同时降低自噬相关蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的比值。亚砷酸钠处理诱导ERK1/2蛋白磷酸化(P<0.01),而NAC和亚砷酸钠共处理抑制了ERK1/2蛋白的磷酸化。结论:亚砷酸钠降低H9C2细胞的存活率,增加细胞内ROS的生成,诱导细胞凋亡和自噬。NAC通过降低H9C2细胞内的ROS水平和抑制ERK1/2蛋白的磷酸化拮抗亚砷酸钠诱导的细胞凋亡和自噬。 焦延娜 李建辉 高小博 骆海燕 马旭 陆彩玲关键词:N-乙酰半胱氨酸 亚砷酸钠 H9C2心肌细胞 细胞凋亡 细胞自噬 硫代硫酸钠干扰斑马鱼胚胎发育并致畸 被引量:5 2009年 硫的衍生物潜在的威胁着胚胎的发育过程.斑马鱼被用于研究不同浓度(1×10-6~1mol/L)的硫代硫酸钠(sodiumthiosulfate,STS)对胚胎发育的影响,在解剖显微镜下实时观察斑马鱼胚胎发育的全过程.采用Western印迹法检测乙酰化的微管蛋白——α-微管蛋白(acetylatedtubulin,α-tubulin)和神经元增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达,分别检测STS暴露后胚胎的运动神经元功能,神经元的增殖状态.发育中的斑马鱼胚胎暴露于0.1~1mol/LSTS,呈现出严重的发育迟缓,并且伴随多脏器畸形;暴露于10μmol/L~10mmol/LSTS,胚胎呈现循环系统,神经系统以及颌面部畸形.胚胎在48hpf(hourspostfertilization)时,对STS的暴露敏感高于24hpf和96hpf.STS可能干扰细胞的增殖及运动神经元的正常分化.STS可能干扰正常的细胞骨架结构,并在胚胎发育晚期影响细胞增殖,对胚胎神经系统、循环系统及颌面部有致畸作用. 胡玮 程露阳 宋韫韬 夏鸿飞 孙大光 李鹏 李丹 陆彩玲 马旭关键词:硫代硫酸钠 斑马鱼 畸形 微管蛋白