公共文化服务平台

反馈激活STAT3调控HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药的机制被引量：2: 2019年; 目的探讨白介素-6(IL-6)在HER2阳性BT-474乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及其相关分子机制。方法建立BT-474耐拉帕替尼细胞株(BT-474~R)。Western blot检测耐药标志蛋白P-gp的表达,MTT法检测BT-474~R细胞的IC_(50)。Caspase-Glo~?3/7法检测拉帕替尼BT-474~R与BT-474细胞的Caspase3/7酶活性的变化。Western blot法检测IL-6、p-STAT3、STAT3、Cleaved Caspase 3的蛋白表达水平;RNAi法沉默STAT3基因表达;Caspase-Glo?3/7法和Annexin V-FITC/PI染色检测沉默后细胞凋亡程度。结果 BT-474~R组P-gp表达水平显著高于BT-474组(P<0.05)。拉帕替尼增强STAT3活性,沉默STAT3基因可恢复BT-474~R细胞对拉帕替尼的敏感度、增加cleaved caspase 3蛋白表达水平和Caspase3/7酶的活性(P<0.01)。沉默STAT3增强了拉帕替尼诱导的耐药细胞凋亡(P<0.01)。拉帕替尼诱导的IL-6表达和分泌激活STAT3,用IL-6抗体抑制拉帕替尼诱导的IL-6,可以阻止拉帕替尼刺激STAT3活性。结论拉帕替尼通过诱导BT-474细胞分泌IL-6激活STAT3信号通路,增加HER2阳性乳腺癌细胞对拉帕替尼的耐药性。; 胡晓红柏华段娟娟雷秀张启芳; 关键词：HER2阳性乳腺癌拉帕替尼白介素-6

幽门螺杆菌临床分离株CagA的序列比对及其对胃上皮细胞形态与功能的影响被引量：1: 2021年; 【背景】细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin Associated Gene A Protein,CagA)是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)重要的效应蛋白,CagA的多态性与胃癌的发生发展密切相关。【目的】比较幽门螺杆菌临床分离株的CagA结构差异,探讨不同CagA对胃上皮细胞形态及功能的影响。【方法】对27株幽门螺杆菌的CagA序列进行比对,分析氨基酸组成差异及变异情况,用含不同CagA序列的5株H.pylori感染低恶性胃上皮细胞AGS 6 h,感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)为30:1,显微镜观察细胞形态变化,Western Blot法检测极性调节激酶1b(Polarity-Regulating Kinase 1b,PAR1b)的表达,ELISA检测培养液中白介素8(Interleukin-8,IL-8)的浓度。【结果】临床分离株的CagA存在结构和氨基酸组成差异,西方株的EPIYA基序存在更多变异,具有完整cagA基因的菌株感染后细胞形态发生显著变化。Western Blot分析结果显示:与对照组比较,西方株NCTC 11639和H.pylori 26695感染的细胞中PAR1b的表达升高,而东亚株H.pylori GZ7感染的细胞中PAR1b表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);突变株H.pylori GZ15及H.pylori GZ7/ΔcagA感染后PAR1b的表达无显著变化。与对照组比较,实验组中H.pylor感染的细胞培养液中IL-8浓度均增加,东亚株促进IL-8分泌的能力大于西方株。【结论】含不同CagA的幽门螺杆菌发挥不同的生物学功能。东亚株能抑制PAR1b的表达,促进IL-8分泌的能力更强,H.pylori感染引起的细胞形态变化依赖cagA基因的完整性。; 全欣莹曾晓燕熊林王文玲赵艳谢渊王琴容张启芳周建奖; 关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A 白介素8

阿糖胞苷对人急性髓系白血病细胞活力、凋亡的作用及机制被引量：6: 2021年; 目的探讨阿糖胞苷(Ara-C)对人急性髓系白血病(AML)细胞活力、凋亡的作用及机制。方法选取对数生长期人AML细胞株MV4-11,分别用二甲基亚砜(DMSO)及0.5、1.0、1.5μmol/L Ara-C作用24、48和72 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)和流式细胞仪检测各组细胞不同时间的光密度(OD)值和细胞凋亡情况;取对数生长期MV4-11细胞分为空白组和1.0μmol/L Ara-C组,1.0μmol/L Ara-C组细胞分别处理3、6、12、24及48 h,采用蛋白印迹法检测各组MV4-11细胞中Caspase 3、c-Myc及高迁移率族蛋白1(HMGB1)的蛋白表达;利用cBioportal在线分析工具和R包(survminer)分析c-Myc表达水平与AML患者生存期的相关性。结果与DMSO组相比,0.5、1.0及1.5μmol/L Ara-C组MV4-11细胞不同时间的细胞活力均降低、凋亡细胞比例升高,且对Ara-C均有浓度依赖性(P<0.0001或P<0.01);与DMSO组相比,1.0μmol/L Ara-C组MV4-11细胞经不同时间处理后Caspase 3表达水平均降低,且有时间依赖(P<0.05);与DMSO组相比,1.0μmol/L Ara-C组MV4-11细胞经不同时间后,细胞的HMGB1和c-Myc蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);c-Myc高表达与AML患者较差生存期呈正相关((P<0.05)。结论Ara-C可抑制人AML细胞活力和诱导细胞凋亡,其机制可能与HMGB1/c-Myc的下调有关。; 彭煜晖梁欣明付文莉喻艳琴段娟娟吴昌学张启芳; 关键词：阿糖胞苷细胞凋亡急性髓系白血病 C-MYC基因

阿尔茨海默病与血管性痴呆患者外周血中激肽原和激肽释放酶-6的比较研究被引量：3: 2018年; 目的通过对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)和血管性痴呆(vascular dementia,VD)患者血液中高分子量激肽原重链蛋白(heavy chain of high molecular-weight kininogen,hc-HK)和激肽释放酶-6(kallikrein-6,KLK-6)的比较分析,从神经性炎症反应信号通路角度探索AD的发病机制。方法收集AD组、VD组和对照组各15例的外周血标本,分别用蛋白质免疫印迹法检测其中hc-HK蛋白含量,用酶联免疫吸附法检测其中Aβ42和KLK-6蛋白的含量;并对Aβ42与KLK-6进行相关性分析。结果 AD患者外周血中hc-HK含量较VD组或对照组均显著增加(均P<0.01)。AD组患者血液中的KLK-6水平为(4.80±0.78)ng/mL,VD组KLK-6为(3.72±0.87)ng/mL,AD组较VD组明显增加(t=3.57,P<0.01)。AD组患者血浆中Aβ42蛋白浓度为(0.261±0.024)μg/L,与VD组或对照组比较均明显增加(均P<0.01)。通过相关分析发现,在AD组患者血液中KLK-6与Aβ42的增加呈正相关(r=0.65,P<0.01)。结论AD患者外周血液中hc-HK和KLK-6蛋白比VD患者及非痴呆对照有明显增加,提示AD发病中有血凝接触系统的激活;激肽释放酶-激肽系统的异常激活有可能参与了AD的发病过程。; 刘俐杰丁彬彬邓飞飞周少军张启芳徐坚余德军柏华; 关键词：阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白血管性痴呆

信号转导与转录激活因子3在肿瘤发生发展中的研究进展被引量：2: 2015年; 信号转导与转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）最早在白介素-6（interleukin-6,IL-6）诱导的肝细胞急性时相反应（acute phase response）中被发现[1-2],随后发现STAT3被干扰素调节发挥效应[3]。; 张启芳; 关键词：信号转导与转录激活因子3 肿瘤免疫抑制肿瘤微环境

抑制信号转导与转录激活因子3对人前列腺癌细胞DU145生长的作用研究: 2015年; 目的:研究抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达对人前列腺癌细胞DU145生长的影响。方法:用慢病毒p FLU-EGFP STAT3 shRNA(shRNA)质粒转染人前列腺癌细胞DU145构建抑制STAT3表达的稳定细胞株作为shRNA组,转染空载体作为空白对照(mock)组,采用荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)和免疫印迹(Western blot)方法检测STAT3的mRNA和蛋白的表达水平,用结晶紫染色法检测抑制STAT3表达对细胞生长的影响;用Matrigel细胞侵袭实验检测抑制STAT3表达对DU145细胞迁移侵袭能力的影响。结果:与mock组相比,shRNA组STAT3 mRNA和蛋白表达水平显著下降,约为mock组的15%和20%,shRNA组DU145细胞的生长数目明显减少,仅为空白对照组的41.8%;shRNA组DU145细胞对基底膜的侵袭能力降低,抑制率为mock组52.9%。结论:抑制STAT3表达可降低前列腺癌细胞生长和迁移能力。; 张启芳禹文峰官志忠; 关键词：信号转导与转录激活因子3 前列腺癌细胞细胞生长细胞侵袭

抑制STAT3表达增强多西他赛对人前列腺癌细胞的抗肿瘤作用: 2015年; 目的:研究抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)的表达增强多西他赛对人前列腺癌细胞DU145的抗肿瘤作用的影响。方法:用慢病毒p FLU-EGFP sh STAT3质粒转染人前列腺癌细胞DU145、构建抑制STAT3的稳定细胞株作为shRNA组,转染空载体作为空白对照(mock)组,采用Western blot方法检测两组人前列腺癌细胞DU145上STAT3和Bcl-2蛋白表达,用Annexin V/PI染色法测定经过多西他赛处理的已抑制STAT3表达的DU145细胞的细胞凋亡;成瘤实验检测采用STAT3抑制与多西他赛(DOX)联合分别注射接种于雄性免疫缺陷小鼠(NSG)的DU145肿瘤和腹腔,观察接种22 d时的小鼠体质量和肿瘤体积。结果:p FLU-EGFP STAT3shRNA载体在沉默STAT3基因表达后,人前列腺癌细胞DU145中抗凋亡基因Bcl-2表达下调,显著降低STAT3和Bcl-2蛋白表达水平;抑制STAT3表达后DU145细胞对多西他赛敏感性显著增加,凋亡细胞显著增多,对多西他赛的敏感性提高了4倍;小鼠成瘤实验表明,接种Dox+shRNA小鼠体质量和肿瘤体积明显下降,抑瘤率增加约80%。结论:抑制前列腺癌DU145细胞中STAT3表达能增强多西他赛抗癌的敏感性,STAT3抑制与多西他赛联合注射接种可增强多西他赛对人前列腺癌的抗癌效果。; 张启芳吴昌学官志忠; 关键词：前列腺癌细胞多西他赛敏感性

放疗联合抑制STAT3表达对恶性B细胞免疫原性分子表达的影响: 2015年; 目的:研究放疗联合抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达对恶性B细胞免疫原性的影响。方法:在BALB/c小鼠大腿皮下接种小鼠恶性B细胞淋巴瘤表达GFP的A20细胞形成肿瘤,在肿瘤内注射STAT3基因特异的shRNA质粒并进行放疗;采用荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)和免疫印迹法(Western blot)方法分别检测肿瘤组织中STAT3 mRNA和蛋白表达水平;细胞膜蛋白分子染色法检测恶性B细胞表面分子MHCII、CD40和CD80的表达,用流式细胞仪收集细胞染色数据。结果:放疗联合抑制STAT3表达能显著降低STAT3 mRNA和蛋白表达水平,与单纯放疗比较,放疗联合抑制STAT3表达治疗显著增加A20细胞表面分子MHCII、CD40及CD80的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:放疗联合抑制STAT3表达能增强决定恶性B细胞免疫原性的分子表达。; 张启芳禹文峰吴昌学官志忠柏华; 关键词：信号转导与转录激活因子3 聚合酶链式反应免疫印迹流式细胞术

放疗联合抑制STAT3表达对肿瘤浸润树突状细胞成熟的影响: 2015年; 目的:研究放疗联合抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达对肿瘤浸润树突状细胞(TIDCs)成熟的影响。方法:在BALB/c小鼠大腿皮下接种小鼠恶性B细胞淋巴瘤A20细胞形成肿瘤,在肿瘤内注射STAT3基因特异的shRNA质粒并进行放疗;从肿瘤中富集TIDCs,采用荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)方法检测TIDCs中STAT3 mRNA表达水平,蛋白染色方法检测磷酸化STAT3蛋白表达水平和DCs表面分子MHCII、CD40及CD80的表达,用流式细胞仪收集细胞染色数据。结果:放疗联合抑制STAT3表达显著降低肿瘤浸润TIDCs中STAT3 mRNA表达水平和STAT3蛋白磷酸化水平;与单独放疗相比,放疗联合抑制STAT3表达显著增加肿瘤浸润TIDCs表面分子MHCII、CD40、CD80及CD86的表达水平。结论:放疗联合抑制STAT3治疗表达能促进肿瘤浸润TIDCs的成熟。; 张启芳吴昌学禹文峰官志忠柏华; 关键词：信号转导与转录激活因子3 放射疗法树突状细胞肿瘤浸润

STAT3在Aβ寡聚体诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用被引量：4: 2016年; 目的研究β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导小胶质细胞产生炎症反应中信号转导和转录激活子3(STAT3)的表达水平及作用。方法用蛋白印迹法检测STAT3在Aβ寡聚体诱导的BV2小胶质细胞炎症反应中的表达水平;用siRNA沉默STAT3的表达后,实验分为正常对照组、siRNA STAT3组、Aβ处理组、Control siRNA+Aβ组以及siRNA STAT3+Aβ组,用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL1-β、TNF-αmRNA和蛋白的表达水平。结果 Aβ寡聚体处理小胶质细胞后p-STAT3的表达水平增高,与Aβ寡聚体的浓度和处理时间有关。siRNA沉默STAT3使其mRNA和蛋白表达分别下降约67%和65%;与正常对照组相比,Aβ处理组的IL1-β及TNF-αmRNA和蛋白的表达水平增高;与Aβ处理组相比,siRNA STAT3+Aβ组的IL1-β及TNF-αmRNA和蛋白的表达水平降低。结论 STAT3参与调控Aβ寡聚体诱导的小胶质细胞炎症反应中炎症因子的释放,在阿尔茨海默氏病(AD)的Aβ作用机制中可能有一定的作用。; 郭秀美张启芳官志忠; 关键词：STAT3 阿尔茨海默氏病 Β淀粉样蛋白小胶质细胞炎症反应

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

张启芳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张启芳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈