赵志军
- 作品数：9 被引量：45H指数：4
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划食品科学与技术国家重点实验室科研基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学医药卫生更多>>
- 氮源对枯草芽孢杆菌WSHDZ-01合成过氧化氢酶的影响被引量：6
- 2008年
- 为提高枯草芽孢杆菌WSHDZ-01合成过氧化氢酶的水平,尝试了不同种类氮源的添加.结果表明,硝酸钠(NaNO3)为适宜氮源,虽然生物量仅1.25g/L,但过氧化氢酶活力最高可达3200U/mL.在添加NaNO3的基础上,研究了添加其它氮源麦芽汁、酵母膏、玉米浆对提高WSHDZ-01生物量的影响,发现适宜浓度的麦芽汁不仅可以提高生物量,并且能够缩短发酵周期.经进一步优化,在3L发酵罐中,WSHDZ-01生物量提高到6g/L,过氧化氢酶活力达到11000U/mL,与优化前相比,发酵周期缩短了近60%,生产强度提高了3倍.
- 邓宇华兆哲赵志军姚丹丹堵国成陈坚
- 关键词：枯草芽孢杆菌过氧化氢酶氮源生物量
- LC-MS/MS法测定E.coli胞内24种代谢物被引量：1
- 2011年
- 建立了一种快速、准确的同时测定大肠杆菌(E.coli)24种胞内代谢中间产物的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经过淬灭、洗涤和提取后得到胞内代谢物,高速冷冻离心去除杂质。经Waters Atlantis HILIC silica色谱柱分离,以乙腈-10 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为250μL/min。电喷雾负离子(ESI-)模式电离,多反映监测模式(MRM)检测,基质标准溶液法进行定量。结果表明:24种代谢物在0.10～100μmol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99;24种代谢物的检出限(S/N>3)为0.05～0.34μmol/L,3个添加水平的回收率为83.7%～108.1%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。该方法具有简便、灵敏度高、定性准确等特点。
- 梅辉戴军刘文卫宋鹏飞吴敬赵志军
- 关键词：高效液相色谱-串联质谱代谢组学
- 碱性过氧化氢酶高产菌WSHDZ-01的筛选、鉴定及发酵条件优化
- ＜正＞自纺织厂的车间污水分离获得菌株WSHDZ-01,生长pH范围为5-9．5,所产过氧化氢酶的活性pH范围为5-12,其产过氧化氢酶酶活为600 U／mL且稳定。根据《常见细菌系统鉴定手册》和《伯杰氏细菌鉴定手册》第八...
- 赵志军华兆哲陈坚
- 关键词：枯草杆菌酶活
- 文献传递
- 微生物发酵法生产L-色氨酸的代谢工程研究被引量：9
- 2011年
- L-色氨酸作为人体内的一种必需氨基酸,广泛应用于医药、食品与饲料等行业。工业上采用的色氨酸生产方法有化学合成法、转化法及微生物发酵法。近年来,随着代谢工程在色氨酸菌种选育中的成功运用,微生物发酵法逐渐成为主要的色氨酸生产方法。系统综述了微生物发酵法生产色氨酸所涉及的代谢工程策略,包括生物合成色氨酸的代谢调控机制以及途径改造的措施和效果,此外,还探讨了L-色氨酸未来的发展前景。
- 赵志军陈晟吴丹吴敬陈坚
- 关键词：L-色氨酸代谢工程微生物发酵法
- 高效液相色谱-串联质谱法分析大肠杆菌代谢组中样品提取方法的比较被引量：4
- 2011年
- 比较了基于液相色谱和串联质谱联用技术（LC-MS/MS）的E.coli代谢组分析的5种不同样品提取方法。在对样品进行淬灭和洗涤后,分别使用冷甲醇法、热乙醇法、甲醇/氯仿法、热甲醇法和高氯酸法对样品平行提取3次,每个样品重复进样3次。结果显示,冷甲醇法所得到的相对提取率最高,且重复性好（RSD〈5%）。从相对提取率、重复性等方面综合考察5种提取方法,从优到劣依次为：冷甲醇法〉甲醇/氯仿法〉高氯酸法〉热乙醇法〉热甲醇法。此外,以冷甲醇法的提取溶剂配制系列不同浓度的代谢物标样测定的结果表明,本方法的代谢物检测线性较好,线性范围较宽,提取溶剂的基体效应对代谢物的定量分析影响较小。本方法的检出限为0.05~0.36 mmol/L。
- 梅辉戴军刘文卫凌霞朱鹏飞赵志军
- 关键词：液-质联用大肠杆菌
- 大肠杆菌色氨酸转运系统多基因敲除对色氨酸生产的影响被引量：10
- 2011年
- 大肠杆菌中色氨酸向胞内的转运主要是由mtr、tnaB和aroP 3个基因编码的通透酶进行调控。利用Red重组技术,在mtr单基因敲除菌的基础上,成功构建了mtr.tnaB和mtr.aroP双基因敲除菌以及mtr.tnaB.aroP三基因敲除菌,并通过发酵实验首次考察了色氨酸转运系统多基因缺失对大肠杆菌合成色氨酸的影响。发酵结果表明,mtr.tnaB和mtr.aroP双基因缺失后,色氨酸产量分别达到1.38 g/L和1.27 g/L,与出发菌株相比分别提高了17%和9%,而mtr.tnaB.aroP三基因缺失后,菌体生长受到了明显抑制,发酵后色氨酸产量仅为0.63 g/L。在补料分批发酵实验中,mtr.tnaB双基因敲除菌的色氨酸产量进一步提高至12.2 g/L,与出发菌株相比色氨酸产量提高了27%。
- 赵志军陈晟吴丹吴敬陈坚
- 关键词：转运系统基因敲除L-色氨酸大肠杆菌
- 极端路径分析及在色氨酸合成代谢网络中的应用被引量：1
- 2009年
- 代谢途径分析在鉴别和量化生化反应网络中的大量代谢物变得越来越重要,其中极端路径分析是用来分析复杂代谢网络结构和功能的方法。本文主要论述了当今最常用的代谢途径分析方法,描述了极端路径算法的具体方法,并将这种方法用于色氨酸合成代谢网络中,分析其代谢网络的结构和功能,并与传统的路径比较。
- 王栋刘丽赵志军须文波
- 关键词：代谢网络
- 碱性过氧化氢酶高产菌的筛选、鉴定及发酵条件优化被引量：15
- 2007年
- 从纺织厂的车间污水分离获得菌株WSHDZ-01,其产过氧化氢酶酶活为600U/mL,酶活的pH范围为5.0-12.0。根据对该过氧化氢酶生产菌的形态和生理生化特征的分析和16SrDNA序列分析,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌。通过对该菌株发酵培养基中碳氮源的优化,其最佳碳源为10g/L的葡萄糖,氮源为5g/L的NaNO3,在此条件下产酶达3258U/mL。此外,该菌株所产过氧化氢酶的最适反应pH为11.0,最适温度为55℃,在pH11.0和50℃下保持15min后,剩余酶活仍达98%以上。
- 赵志军华兆哲刘登如堵国成陈坚
- 关键词：枯草杆菌发酵优化酶学性质
- 重组大肠杆菌生产L-色氨酸发酵条件优化被引量：4
- 2012年
- 为了提高重组大肠杆菌FB-04/pSV-04发酵生产L-色氨酸的产量,减少代谢副产物乙酸的生成,考察了比生长速率和无机盐对重组大肠杆菌发酵生产L-色氨酸的影响。在确定了合适的比生长速率和无机盐浓度之后,乙酸积累很少,L-色氨酸的产量为53.4 g/L,比优化前提高了141.6%。经30 L发酵罐初步放大,L-色氨酸的产量达53.6 g/L,发酵结果稳定,具有工业化应用前景。
- 邹纯陈晟赵志军王磊罗锋吴丹陈坚吴敬
- 关键词：比生长速率无机盐L-色氨酸乙酸
