王莎
- 作品数:6 被引量:6H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 用糖基工程酵母制备具有动物细胞糖基化修饰流感血凝素糖蛋白的方法
- 本发明公开了用糖基工程酵母制备具有动物细胞糖基化修饰流感血凝素糖蛋白的方法。本发明提供的方法,包括如下步骤:使流感病毒的血凝素HA基因在酵母突变体中表达,得到重组酵母;将所述重组酵母培养,制备得到具有哺乳动物糖型结构且无...
- 刘波吴军巩新唱韶红王莎马清钧
- H7N9流感病毒血凝素HA在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析被引量:6
- 2015年
- 目的利用毕赤酵母表达制备H7N9流感病毒血凝素[HA 1-525个氨基酸(aa)],并对其免疫原性进行研究。方法经全基因合成获得H7N9流感病毒[A/Hangzhou/1/2013(H7N9)]全长HA,以其为模板,PCR得到片段HA^1-525,通过NspⅤ和NotⅠ双酶切连入pPICZαA载体,转入毕赤酵母X33,ELISA筛选阳性克隆。发酵培养后,表达上清经PEG20000沉淀获取HA^1-525,并用糖苷内切酶H(endo H)酶切分析其N-糖链。将制备的HA^1-525免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测特异性HA7抗体滴度,红细胞凝集抑制实验分析血抑活性。结果培养上清用抗HA7抗体经ELISA检测,重组菌成功表达HA7,且Western印迹检测发现有特异性弥散条带,经endo H酶切后,HA^1-525为均一条带,相对分子质量约58×10^3,与理论大小相当,表明HA^1-525存在甘露糖基化结构。HA^1-525两次免疫小鼠后可产生1∶36 000的抗体滴度。以H7N9裂解苗为抗原,检测其血抑活性为1∶700。结论利用毕赤酵母表达的H7N9流感病毒HA1-525可以诱导小鼠产生针对HA7的中和抗体。
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- 关键词:血凝素类毕赤酵母
- 一种流感血凝素糖蛋白多聚物纳米颗粒的制备方法
- 本发明公开了一种流感病毒血凝素糖蛋白聚合物纳米颗粒的制备方法,利用该方法可以制备出空间结构完整的流感病毒血凝素糖蛋白聚合物。本发明公开一种制备流感病毒血凝素糖蛋白聚合物纳米颗粒的方法,包括如下步骤:使N端上游含有信号肽序...
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- 基因工程酵母制备H7N9流感病毒血凝素颗粒型亚单位疫苗的研究
- 血凝素是流感病毒表面的主要蛋白之一,以三聚体形式存在,是流感疫苗的主要成分.流感血凝素变异、重配快,各种新型流感频发,新疫情爆发后,疫苗的快速研发和生产是疫情控制的关键.现有的流感疫苗主要通过流感病毒减毒株或重配株的鸡胚...
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- 关键词:流感疫苗基因工程
- 文献传递
- 用糖基工程酵母制备具有动物细胞糖基化修饰流感血凝素糖蛋白的方法
- 本发明公开了用糖基工程酵母制备具有动物细胞糖基化修饰流感血凝素糖蛋白的方法。本发明提供的方法,包括如下步骤:使流感病毒的血凝素HA基因在酵母突变体中表达,得到重组酵母;将所述重组酵母培养,制备得到具有哺乳动物糖型结构且无...
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- 文献传递
- 一种流感血凝素糖蛋白多聚物纳米颗粒的制备方法
- 本发明公开了一种流感病毒血凝素糖蛋白聚合物纳米颗粒的制备方法,利用该方法可以制备出空间结构完整的流感病毒血凝素糖蛋白聚合物。本发明公开一种制备流感病毒血凝素糖蛋白聚合物纳米颗粒的方法,包括如下步骤:使N端上游含有信号肽序...
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