陈丹
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性被引量：8
- 2012年
- 米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及大豆和花生蛋白的水解试验.结果显示:在10 L发酵罐中诱导表达时,发酵液中重组碱性蛋白酶的酶活达4100U/mL;该蛋白酶最适反应pH值和温度分别为8.5～9.5和50℃,在pH值为6.0～10.0和温度低于40℃时具有较好的稳定性;该酶具有广泛的肽键选择性;该酶对大豆和花生蛋白显示出了强于部分商品化蛋白酶的水解能力.以上结果表明:该重组蛋白酶具有较大的开发利用潜力.
- 柯野陈丹李家洲谢明权罗晓春
- 关键词：米曲霉毕赤酵母克隆水解特性
- 重组米曲霉丝氨酸羧肽酶O的性质鉴定及脱苦应用研究被引量：3
- 2015年
- 为了研究羧肽酶在蛋白水解及对蛋白水解物脱苦中的重要作用,利用毕赤酵母表达系统对米曲霉（Asperigillus oryzae）羧肽酶O（carboxypeptidase O,Ocp O）进行表达。重组米曲霉羧肽酶O（r Ocp O）经过分子筛和离子柱纯化,对其进行脱糖基化及酶学性质的检测研究。结果表明,该蛋白酶是以糖蛋白的形式进行表达,分子量约为74 ku,脱糖基化后的相对分子质量约为56 ku,产量约为20.4 n Kat/m L。该蛋白酶是一种酸性蛋白酶,最适p H值为4.0,且在p H 3.0～6.0时保持稳定;最适温度约为40℃,具有良好的热稳定性,在60℃孵育1 h后仍能保持63%的酶活;PMSF能够显著抑制该酶酶活,证明其为丝氨酸羧肽酶。通过r Ocp O对大豆蛋白和酪蛋白的Alcalase蛋白酶水解物的进一步水解研究发现,r Ocp O水解对两种水解液的苦味均有明显减轻,并且水解度有明显升高。
- 陈丹游子娟黄伟谦马纳纳罗晓春
- 关键词：米曲霉酶学性质脱苦
