黄伟谦
- 作品数：20 被引量：14H指数：3
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 一种哈茨木霉酸性蛋白酶P6281的异源表达及纯化方法
- 本发明公开了一种哈茨木霉酸性蛋白酶P6281的异源表达及纯化方法。通过提取哈茨木霉的RNA反转录获得cDNA，通过PCR获得酸性蛋白酶基因并插入到表达载体中，重组质粒电转化导入毕赤酵母GS115进行诱导表达，再利用镍柱亲...
- 罗晓春邓俊劲黄伟谦李志伟
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- T1脂肪酶突变体和应用
- 本发明公开了T1脂肪酶突变体和应用，所述突变体是对序列SEQ ID NO：1中氨基酸取代位置至少发生如下任意一种突变：(1)采用“原始氨基酸‑位置‑替换的氨基酸”表示脂肪酶突变体中单点突变的氨基酸L359S、I362E或...
- 王方华王永华张慧黄伟谦蓝东明杨博
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- 重组米曲霉中性蛋白酶(rNpI)水解大豆蛋白苦味及其抗氧化性研究被引量：1
- 2015年
- 为探讨重组中性蛋白酶rNpI对大豆蛋白的水解、水解产物的苦味及产物抗氧化性的影响,进行水解度测定、水解产物苦味值感官评定,以及水解产物清除DPPH自由基能力、还原能力、和氧自由基清除能力测定。结果表明,重组米曲霉rNpI对大豆蛋白有较高的水解度,当酶与底物比（E/S）为1000、4000、8000U/g时,水解度分别为7.8%、11.5%和16.0%。对其水解产物进行苦味评价,结果发现,r Np1大豆蛋白水解产物苦味值明显比Alcalase的水解产物低。不同的抗氧化方法测定水解产物的抗氧化活性表明,r Np1对大豆蛋白的水解产物具有较高的清除DPPH自由基能力、还原能力和氧自由基清除能力。通过超滤的方法对E/S为4000U/g的水解产物进行分离,得到分子量〉10ku、3-10ku和〈3ku的组分,分别测定其抗氧化性,发现抗氧化性能力与肽的分子量大小有关。重组米曲霉rNpI对植物蛋白有很高的水解效率,其水解产物苦味值低且具有较高的抗氧化性,在食品、饲料等行业有很好的应用前景。
- 游子娟钟丽芬黄伟谦马纳纳罗晓春
- 关键词：水解度苦味值抗氧化性
- 一种脂肪酶重组大肠杆菌表达菌株、重组脂肪酶和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶重组大肠杆菌表达菌株、重组脂肪酶和应用，方法如下：(1)将脂肪酶GZEL基因克隆到pFL‑B62cl表达载体上，构建得到重组质粒；所述脂肪酶GZEL基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示；(2)...
- 王方华王永华张慧黄伟谦张天宇蓝东明杨博
- 重组米曲霉丝氨酸羧肽酶O的性质鉴定及脱苦应用研究被引量：3
- 2015年
- 为了研究羧肽酶在蛋白水解及对蛋白水解物脱苦中的重要作用,利用毕赤酵母表达系统对米曲霉（Asperigillus oryzae）羧肽酶O（carboxypeptidase O,Ocp O）进行表达。重组米曲霉羧肽酶O（r Ocp O）经过分子筛和离子柱纯化,对其进行脱糖基化及酶学性质的检测研究。结果表明,该蛋白酶是以糖蛋白的形式进行表达,分子量约为74 ku,脱糖基化后的相对分子质量约为56 ku,产量约为20.4 n Kat/m L。该蛋白酶是一种酸性蛋白酶,最适p H值为4.0,且在p H 3.0～6.0时保持稳定;最适温度约为40℃,具有良好的热稳定性,在60℃孵育1 h后仍能保持63%的酶活;PMSF能够显著抑制该酶酶活,证明其为丝氨酸羧肽酶。通过r Ocp O对大豆蛋白和酪蛋白的Alcalase蛋白酶水解物的进一步水解研究发现,r Ocp O水解对两种水解液的苦味均有明显减轻,并且水解度有明显升高。
- 陈丹游子娟黄伟谦马纳纳罗晓春
- 关键词：米曲霉酶学性质脱苦
- 雅致放射毛霉蛋白酶SP1基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 雅致放射毛霉蛋白酶具有较好的脱苦味和水解豆类蛋白的能力.为了揭示其结构和功能的关系,促进其开发应用,文中通过RACE和PCR技术克隆获得丝氨酸蛋白酶SP1基因.根据生物信息学中的理论和方法,对SP1进行了较全面的预测和分析.结果表明:SP1基因由4个外显子和3个内含子组成,编码454个氨基酸残基.SP1属于蛋白酶K家族,与Rhizopus microsporus var.chinensis的丝氨酸蛋白酶同源性最高,亲缘关系最近.以蛋白酶K晶体结构(PDB code:1IC6)作为模板进行同源建模,通过对模拟结构的分析可知:SP1分子内无二硫键,具有1个Ca2+结合位点;SP1与蛋白酶K在底物结合区域、氢键、盐键和二硫键等方面均存在差异,这些差异可能就是SP1具有独特的水解作用和脱苦能力的原因.
- 柯野黄伟谦李家洲谢明权罗晓春
- 关键词：雅致放射毛霉丝氨酸蛋白酶基因克隆
- 一种耐过氧化氢脂肪酶AflB晶体及其制备方法
- 本发明公开了一种耐过氧化氢脂肪酶AflB晶体及其制备方法，该晶体为短棱柱状形貌，其空间结构为精细三维结构，结构中含有440个氨基酸，在每个不对称单元中含有3个分子，每个分子含有21个α螺旋结构和6个β折叠结构；结构中具有...
- 王永华袁红蓝东明黄伟谦杨博
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- 酱油曲霉亮氨酸氨肽酶sLAP1在毕赤酵母中表达及其酶学性质研究
- 蛋白质是一种重要的营养物质，近些年来，蛋白质的功能与开发研究逐渐受到重视。蛋白质水解是现代食品加工的重要方式。但其水解液通常产生呈苦味的苦味肽，从而限制了蛋白质水解物的应用。这种苦味是由水解产物中含有末端疏水性氨基酸多肽...
- 黄伟谦
- 关键词：酱油曲霉酶学特性蛋白水解脱苦
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- 一种酸性蛋白酶在食品和/或饲料领域中的应用
- 本发明公开了一种酸性蛋白酶在食品和/或饲料领域中的应用。本发明的发明人在首次成功表达纯化了哈茨木霉的酸性蛋白酶P6281的基础上，首次将其应用于食品和/或饲料领域中。解决了现有技术中的起凝乳作用的蛋白酶会给后续乳酪熟化带...
- 罗晓春邓俊劲李志伟黄伟谦
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- 一种表达R构型选择性的脂肪酶的重组菌及其应用
- 本发明公开了一种表达R构型选择性的脂肪酶的重组菌及其应用，将R构型选择性的脂肪酶基因插入pET28a质粒的多克隆位点得到的重组质粒；再将所述重组质粒转化大肠杆菌SHuffle T7，得到重组菌；所述R构型选择性的脂肪酶基...
- 王永华蓝东明袁红黄伟谦杨博
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