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基于生物质谱的蛋白质定量技术及其在药代动力学研究中的应用被引量：3: 2015年; 蛋白质定量技术是指对细胞、组织以至整体生物体内的蛋白质表达水平进行全谱定量分析的手段,其在生物过程机制的探索、生物标志物和药物作用靶标的发现及验证等过程中发挥着重要作用。新兴生物质谱技术和数据采集方法的发展为蛋白质定量提供了先进的技术平台,促使了蛋白质研究逐渐从简单定性转变为精确定量。本文综述了基于生物质谱的蛋白分子定量策略及方法,评述了不同方法的特点和适用范围,并阐述了其在药物代谢动力学研究领域,如药物转运体、药物代谢酶的定量和多肽及蛋白类药物的药代动力学研究等方面的应用,为传统的药代动力学研究提供了新的思路与方法。; 吴梦秋陆高远邵畅王单单孙迪郝海平王广基叶慧; 关键词：生物质谱药物转运体代谢酶

基因编码非天然氨基酸技术及其在生物医学领域的应用被引量：1: 2022年; 人体内蛋白质通常由20种天然氨基酸组成。氨基酸的不同排列组合及立体构象是构建丰富多样性的蛋白质的基础。近年来开发的突破性基因密码子拓展技术通过向目标蛋白质中定向引入非天然氨基酸,能够赋予原有的靶蛋白以共价结合邻近蛋白质、携带荧光基团、模拟蛋白质的翻译后修饰等新的生物学特性。本文从非天然氨基酸的结构和功能出发,介绍了不同类型的非天然氨基酸分别在调节蛋白质稳定性、研究蛋白质构象、表达水平、定位以及识别和增强蛋白质间亲和作用等方面的用途。此外,基因编码非天然氨基酸技术在生物医学领域的应用前景,将为生物药物的设计及优化提供全新的思路和方法。; 朱银雪王德祥孔影陆文捷叶慧郝海平; 关键词：非天然氨基酸荧光基团翻译后修饰生物药物

基于高分辨质谱和代谢组学技术对不同银杏叶制剂差异成分的快速分析被引量：4: 2018年; 采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法(HPLC-Q/TOF-MS),利用代谢组学技术,比较银杏叶制剂组成成分的差异,包括银杏叶滴丸、银杏酮酯滴丸、银杏叶提取物片。采用XSELECT HSS T3色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,柱温为40℃进行色谱分离,采用ESI-Q/TOF检测,负离子模式扫描。采用偏最小二乘判别分析方法(PLS-DA)进行数据统计,比较不同银杏叶制剂中的差异成分。结果表明,采用高分辨质谱鉴定了21种银杏叶提取物片与银杏叶滴丸的差异成分,其中滴丸中含量大于银杏叶提取物片的有7种,主要是黄烷醇类化合物,银杏叶提取物片中含量大于滴丸的有14种,多数是有机酸类化合物。鉴定了银杏叶滴丸与银杏酮酯滴丸的12种差异成分,其中银杏叶滴丸中含量大于酮酯滴丸的有7种,主要是黄烷醇类化合物,酮酯滴丸中含量大于银杏叶滴丸的有5种,主要是金松双黄酮和有机酸。结果阐明了不同厂家的银杏叶制剂之间的差异物质,为建立更完善的银杏制剂质控标准提供了科学指导。; 曹国秀陆文捷叶慧田扬郝海平; 关键词：银杏不同制剂高分辨质谱代谢组学有机酸类

遗传密码子拓展技术在赖氨酸酰化修饰研究中的应用: 2023年; 赖氨酸酰化修饰在细胞中普遍存在,控制着蛋白质的多种功能;然而,在活细胞中进行特定位点酰化修饰的生物学功能研究还存在困难。近年来发展的遗传密码子拓展(genetic code expansion,GCE)技术通过正交的氨酰基-tRNA合成酶/tRNA能够在活细胞内定向插入与天然酰化修饰结构一致的非天然氨基酸(unnatural amino acids,UAAs),实现在精准引入酰化修饰的基础上研究目的蛋白的理化性质和生物学行为的改变。此外,GCE技术还能定点引入无法被去酰化酶识别的模拟酰化修饰的UAAs,从而提高目的蛋白赖氨酸酰化修饰产物的稳定性。在目的蛋白特定位点插入“光交联”型UAA则被用于阐明酰化修饰蛋白的互作蛋白质组。根据不同结构和功能的酰化修饰分类,分别阐述了GCE技术结合上述3类UAAs的新颖设计,及其在研究蛋白酰化修饰对目的蛋白的活性、稳定性、细胞定位、蛋白质-DNA相互作用和蛋白质-蛋白质相互作用等功能影响中的应用。最后,展望了GCE技术在蛋白质酰化修饰研究中的局限和应用前景。; 孔影叶慧邵畅郝海平; 关键词：非天然氨基酸蛋白组学技术

基于MALDI-MS技术的新基质大黄酸在代谢组学研究中的应用被引量：2: 2016年; 基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-MS)是一项快速、高通量检测未知物质的新兴技术。然而,该技术对代谢物的检测分析往往被复杂的基质峰所干扰,限制了其在代谢组学领域的应用。研究发现,大黄酸能作为一种MALDI新基质用于阳离子模式下代谢物的检测。首先运用大黄酸分析了生理学浓度下多种强、弱碱性代谢物的标准品,结果表明与传统基质比较,大黄酸能获得基本无基质峰干扰的质谱图。进一步将大黄酸运用于生物样本的分析,选取小鼠内容物作为模型样本,显示该基质可用于复杂生物样本的代谢组分析。最后考察大黄酸的MALDI质谱成像能力,表明该基质可成功运用于小鼠肠段切片的代谢组原位成像。研究表明,大黄酸作为一种新型MALDI基质,能可靠、高效地完成基于MALDI-MS的代谢物检测及原位成像分析,对MALDI-MS技术广泛运用于代谢组学研究具有推动作用。; 叶慧王赟王琳徐小为吴梦秋曹国秀梁艳王广基; 关键词：MALDI-MS 基质大黄酸代谢组学

代谢物衍生的非酶促翻译后修饰研究进展: 2023年; 代谢物在细胞生命周期中具有重要作用,包括为细胞生命活动提供能量及合成原料、参与生物信号转导等。已有研究表明,活性代谢物可通过体内自发化学反应共价修饰蛋白,调控蛋白质结构和功能,进而影响细胞生命活动的各个环节。近年来,发展迅速的蛋白质组学技术能够捕获这类非酶促修饰的靶蛋白,继而阐明代谢物对靶蛋白功能的调控机制。由活性代谢物产生的非酶促共价修饰,分为可逆和不可逆两种类型。详细介绍代谢物衍生的非酶促翻译后修饰的形成机理,并列举蛋白质组学技术如何鉴定这类修饰进而揭示代谢调控机制的经典研究案例。; 董媛媛鲍秋雨王德祥温宏涛杨行超皖宁叶慧; 关键词：活性代谢物蛋白组学技术

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叶慧