左威
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)多克隆抗体的制备及应用被引量：1
- 2015年
- 目的制备抗Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)兔多克隆抗体并进行初步应用。方法以人宫颈癌细胞系He La细胞c DNA为模板,构建重组表达质粒p ET-32a-Rac1。His-Rac1融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,将纯化后的融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备兔多克隆抗体。分别采用ELISA、Western blot法和免疫组织化学技术对抗Rac1抗血清的效价及特异性进行鉴定。结果 His-Rac1融合蛋白成功构建并高效表达。制备的抗Rac1兔多克隆抗体可以检测到He La细胞、MCF-7细胞的Rac1蛋白,并能识别人肾组织中的Rac1蛋白。结论成功制备了兔抗人Rac1多克隆抗体,该抗体可以识别多种天然样本中的Rac1蛋白。
- 张莉莉郝露左威马维佳刘莹
- 关键词：RAC1原核表达多克隆抗体
- ENO1多克隆抗体的制备与初步鉴定
- 2014年
- 目的制备抗Enolase 1的兔多克隆抗体(pAb)并进行特异性鉴定。方法以人宫颈癌细胞系HeLa细胞cDNA为模板,构建重组表达质粒pET-32a-ENO1。His-ENO1融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,纯化后作为免疫原制备兔多克隆抗体。采用ELISA、Western blot和免疫组化法鉴定抗ENO1兔多克隆抗体针对重组蛋白和天然蛋白的特异性。结果 His-ENO1融合蛋白在相对分子质量约29 000处呈现明显表达条带。Western blot鉴定表明,制备的抗ENO1兔多克隆抗体可特异性地识别ENO1重组蛋白和不同肿瘤细胞系HeLa、MCF7、HepG2和K562中的ENO1蛋白。免疫组化结果表明该多抗可特异性识别肾组织中的ENO1蛋白。结论成功制备出兔抗人ENO1抗血清,为进一步研究ENO1的功能奠定了基础。
- 张莉莉郝露左威马维佳刘洋洋刘莹
- 关键词：ENOLASE原核表达
- S100A9蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的制备S100A9重组蛋白及其单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特异性鉴定。方法以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-S100A9和pET-32a-S100A9。融合蛋白在大肠杆菌中表达,纯化后以His-S100A9作为免疫原制备鼠mAb。采用ELISA和Western blot法鉴定筛选抗体。挑取杂交瘤细胞株制备腹水并纯化,采用Western blot法和间接免疫荧光染色鉴定mAb的特异性。结果 GST-S100A9和His-S100A9融合蛋白均成功构建表达。共筛选到抗S100A9杂交瘤细胞18株,其中15株在Western blot检测中与重组蛋白呈强阳性反应,3株呈弱阳性反应。2株可识别肝癌组织间隙液中的S100A9天然蛋白。结论成功地制备出多株抗S100A9的mAb。
- 刘洋洋李晓玲左威迟健柳刚孙龙钦姜俊义刘莹
- 关键词：S100A9单克隆抗体杂交瘤细胞融合
