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宋剑
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上海市江湾医院
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相关领域:
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合作作者
赵文霞
上海市江湾医院
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上海市江湾医院
钱琤
第二军医大学长征医院
张育瑆
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2016
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缺氧环境下基因CRY1表达与大鼠肝细胞BRL-3A凋亡的关系
2016年
目的观察模拟缺氧条件下大鼠BRL-3A细胞中基因CRY1与细胞凋亡及NF-Kappa B凋亡信号通路的关系。方法通过氯化钴体外模拟缺氧环境,观察大鼠肝BRL-3A细胞CRY1蛋白表达;筛选、构建CRY1mRNA慢病毒干扰载体,对BRL-3A细胞CRY1mRNA表达进行敲减,利用Western Blot法对BRL-3A细胞中CRY1干扰效能进行观察,并观察缺氧条件下转录因子CRY1敲减后BRL-3A细胞凋亡、NF-Kappa B、Caspase3蛋白表达。结果梯度浓度氯化钴模拟缺氧条件下BRL-3A细胞中CRY1表达随氯化钴浓度增加,表达逐渐下调;成功构建CRY1mRNA干扰载体pLenti6.3-EGFP-rCRY1-miR,有效敲减BRL-3A细胞中CRY1mRNA和蛋白表达,在100μM氯化钴模拟缺氧条件下YY1敲减后NF-Kappa B、Caspase3蛋白表达增加,凋亡持续增加。结论缺氧致大鼠BRL-3A细胞中转录因子CRY1表达下调,并通过NF-KB凋亡信号通过激活诱导细胞凋亡。
钱琤
钱琤
张育瑆
王勇
包小平
赵文霞
关键词:
缺氧
CRY1
肝细胞
RNA干扰
凋亡
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