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多策略叠加提高甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌表达量的方法: 本发明公开了一种多策略叠加提高甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌表达量的方法，属于提高酶蛋白在毕赤酵母中分泌表达量的领域。本发明通过单因素实验发现分别在其N端融合蛋白质标签、内质网驻留信号突变或酸稳定性突变均可在一定程度上...; 田健伍宁丰初晓宇黄璐王平江湖刘晓青

热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用: 本发明公开了一种热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用。本发明选择野生型酸性普鲁兰酶的6个位点进行定点突变，从中筛选出3个热稳定性提高的单点突变体。本发明进一步在单点突变的基础上进行组合突变，获得热稳定性和催...; 初晓宇伍宁丰田健吕金芝常美会刘晓青

漆酶突变体及其应用: 本发明公开了漆酶突变体及其应用。本发明将氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的野生型漆酶13B22分别进行D511E、V435I、I88L、H436E、G430S、V378I、I424F、N367D、I129L、W50...; 关菲菲田健黄火清宝雅茹罗会颖姚斌伍宁丰刘晓青张若晗

嗜热几丁质酶Chi304突变体及其在降解几丁质中的应用: 本发明公开了嗜热几丁质酶Chi304突变体及其在降解几丁质中的应用。本发明通过基因共识设计氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的几丁质酶Chi304的系列单点突变体，最终成功筛选得到酶活和热稳定性提高的单点突变体Y16...; 关菲菲伍宁丰田健刘晓青张岩田晓倩

牛瘤胃来源的溶菌酶及其应用: 本发明公开了牛瘤胃来源的溶菌酶及其应用。本发明通过对牛瘤胃中原虫的基因组进行分析，挖掘得到具有较高酶活的溶菌酶，其氨基酸序列选自SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示的任何一种氨基酸序...; 关菲菲田健黄火清罗会颖姚斌伍宁丰刘晓青王辉

促进水稻生长和提高幼苗耐寒能力的砖红色微杆菌及其应用: 本发明公开了具有促进水稻生长和提高幼苗耐寒能力的砖红色微杆菌及其应用。本发明公开了具有促进作物生长或提高作物耐寒能力的砖红色微杆菌(<I>Microbacterium testaceum</I>)JG117‑15，其微生...; 刘晓青赵金彤关菲菲伍宁丰田健许国顺宝雅茹; 文献传递

嗜热几丁质酶Chi304突变体及其制备方法和应用: 本发明公开了嗜热几丁质酶Chi304突变体及其制备方法和应用。本发明通过基因共识设计氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的几丁质酶Chi304的系列单点突变体，最终成功筛选得到酶活和热稳定性提高的单点突变体Y166F以...; 关菲菲伍宁丰田健刘晓青张岩田晓倩; 文献传递

来源于枯草芽孢杆菌的漆酶cotA基因克隆与表达及其酶学性质研究被引量：6: 2015年; 漆酶作为一种含铜离子的多酚氧化酶,在环境保护、生物能源、食品工业和纸浆漂白等工业中有重要的应用价值。从枯草芽孢杆菌168菌株中克隆漆酶cot A基因,全长1 542 bp,编码513个氨基酸,外加一个终止密码子。将该基因在大肠杆菌Transetta(DE3)菌株中通过微好氧发酵法进行异源表达和纯化,获得的重组酶蛋白Cot A的最适反应温度为60℃,最适p H为4.5。该酶在60℃具有较好的热稳定性,保温90 min后仍有71.70%的剩余酶活。最适反应条件下,重组酶对ABTS的Km为63.9±5μmol/L,kcat为39.1±1/s,最大反应速率为0.005μmol/L·min·mg,且在最适反应条件下,微好氧发酵法获得的重组酶蛋白Cot A的比活(557.8 U/mg)是低温诱导法(0.2 U/mg)的2 655.4倍。因此,通过微好氧发酵法可以显著提高重组漆酶Cot A的比活力。; 余小霞刘晓青田健伍宁丰; 关键词：漆酶基因克隆

Pseudomonas stutzer S12过氧化氢酶基因的表达及酶学特性研究被引量：2: 2021年; 商品过氧化氢酶目前大部分来源于动物肝脏和黑曲霉发酵,但是这些酶通常热稳定性不好、酶活力低且售价高。为了解决这一问题,从垃圾渗滤液中筛选出来一株高产过氧化氢酶的菌株Pseudomonas stutzeri S12,通过全基因组测序和基因鉴定发现了该菌株中编码过氧化氢酶的基因katE,将其在E.coli BL21(DE3)中异源表达和纯化。KatE的最适温度为35℃,最适pH为8.0,酶比活可达到1349 U·mg^(-1),该酶在10~40℃范围内的酶活力较高,具有较为广泛的温度适应性。KatE具有较好的热稳定性,50℃处理5 h还剩余70%的酶活,60℃孵育2 h后剩余酶活仍有50%。其动力学性质V_(max)为16666μmol·L^(-1)·min^(-1),K_(m)为100.5 mmol·L^(-1)。该酶在中低温条件下酶活较好,热稳定性较好,且酶活力较高,为开发新型商品过氧化氢酶提供了新的材料。; 赵书雪刘晓青伍宁丰田健; 关键词：过氧化氢酶酶学特性异源表达

低温过氧化氢酶及其制备方法和应用: 本发明公开了低温过氧化氢酶及其制备方法和应用。本发明从天山土壤宏基因中分离得到过氧化氢酶基因，其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，编码502个氨基酸和一个终止密码子。本发明过氧化氢酶的最适温度是10‑20℃，并且...; 刘晓青伍宁丰关菲菲田健许国顺; 文献传递

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刘晓青