伍宁丰
- 作品数：156 被引量：825H指数：17
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国际科技合作重点项目计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>
- 低温过氧化氢酶及其制备方法和应用
- 本发明公开了低温过氧化氢酶及其制备方法和应用。本发明从天山土壤宏基因中分离得到过氧化氢酶基因，其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，编码502个氨基酸和一个终止密码子。本发明过氧化氢酶的最适温度是10‑20℃，并且...
- 刘晓青伍宁丰关菲菲田健许国顺
- 文献传递
- 来源于青霉XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达与性质测定
- 低温脂肪酶在低温条件下仍具有较高活性，在食品添加剂、洗涤添加剂及有机合成等产业具有非常独特的应用前景。从低温菌株中分离低温脂肪酶基因是开发新的低温脂肪酶的有效手段．首先利用油脂同化平板与三丁酸甘油酯-维多利亚蓝平板从冰川...
- 郑小梅伍宁丰范云六
- 关键词：脂肪酶青霉菌基因克隆包涵体
- 文献传递
- 来源于芽孢杆菌（Bacillus circulans）的乳糖酶在毕赤酵母中的高效表达被引量：8
- 2006年
- 根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子选择偏好对来源于芽孢杆菌（Bacillus circulans）的乳糖酶基因lacO进行了分子改造。改造后的基因lacM按正确的阅读框架插入到毕赤酵母表达载体pPIC9上，构建得到重组毕赤酵母表达质粒。PCR检测、SDS—PAGE电泳分析和酶活力测定的结果表明，lacM基因已重组到酵母染色体上，并能正常分泌表达。与来改造的基因lacO的毕赤酵母重组子相比，酶蛋白表达量明显增加，约为改造前的3倍以上。
- 梁果义伍宁丰张伟杨娇艳姚斌范云六
- 关键词：乳糖酶基因改造毕赤酵母芽孢杆菌
- 新疆一号冰川土壤细菌多样性的研究被引量：10
- 2006年
- 应用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分离PCR扩增的16S rDNA来研究土壤微生物的多样性。直接从新疆一号冰川不同海拔高度的土壤样品中提取总DNA。用两套细菌通用引物分别扩增16S rDNA的V3和V6/V9高变区的特异性片段,PCR产物进行DGGE分析。PCR-DGGE图谱表明,PCR产物经DGGE检测到的条带清晰且分离效果好。结果表明,PCR-DGGE是一种快速研究微生物群落结构的有效方法。
- 石鹏君孟昆伍宁丰付建红姚斌李江邵娜
- 关键词：DGGE细菌多样性
- 多策略叠加提高甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌表达量的方法
- 本发明公开了一种多策略叠加提高甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌表达量的方法，属于提高酶蛋白在毕赤酵母中分泌表达量的领域。本发明通过单因素实验发现分别在其N端融合蛋白质标签、内质网驻留信号突变或酸稳定性突变均可在一定程度上...
- 田健伍宁丰初晓宇黄璐王平江湖刘晓青
- 重组有机磷降解酶基因、其表达载体及重组有机磷降解酶的制备方法
- 本发明公开了一种人工合成的适合在真核细胞中表达的有机磷降解酶基因，该人工基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明基因通过对原有机磷降解酶基因进行分子改造和修饰，再经人工合成制备得到，改造后的重组基因与原始基...
- 伍宁丰姚斌范云六初晓宇邓敏捷柏映国
- 文献传递
- 热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用。本发明选择野生型酸性普鲁兰酶的6个位点进行定点突变，从中筛选出3个热稳定性提高的单点突变体。本发明进一步在单点突变的基础上进行组合突变，获得热稳定性和催...
- 初晓宇伍宁丰田健吕金芝常美会刘晓青
- 一种新的有机磷农药降解酶及其编码基因
- 本发明提供了一株对有机磷农药具有高效广谱降解能力的细菌菌株，此菌株属于假产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)，我们将其命名为C2－1，还提供了该菌株的分离过程、培养条件和降解特性，它...
- 伍宁丰姚斌史秀云范云六邓敏捷
- 文献传递
- 漆酶突变体及其应用
- 本发明公开了漆酶突变体及其应用。本发明将氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的野生型漆酶13B22分别进行D511E、V435I、I88L、H436E、G430S、V378I、I424F、N367D、I129L、W50...
- 关菲菲田健黄火清宝雅茹罗会颖姚斌伍宁丰刘晓青张若晗
- 来源于青霉XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达与性质测定被引量：1
- 2012年
- 低温脂肪酶在低温条件下仍具有较高活性,在食品添加剂、洗涤添加剂及有机合成等产业具有非常独特的应用前景。从低温菌株中分离低温脂肪酶基因是开发新的低温脂肪酶的有效手段。首先利用油脂同化平板与三丁酸甘油酯-维多利亚蓝平板从冰川土样中筛选分离获得一株具有较高脂肪酶活性的真菌,18S rDNA鉴定其属于青霉属,命名为Penicillium sp.XMZ-9。根据真菌脂肪酶多序列比对获得的保守区,设计简并引物,利用降落PCR与染色体步移的方法从Penicillium sp.XMZ-9中克隆到2个完整的脂肪酶基因,分别记为LipA与LipB。LipA全长1 014 bp,无内含子,编码337个氨基酸。而LipB全长1 232 bp,cDNA长1 122 bp,含有2个内含子,编码373个氨基酸。将两基因的cDNA序列克隆到pET30a(+)载体上,转化大肠杆菌Escherichiacoli BL21(DE3)。经低温诱导表达后,LipA大部分表达为包涵体,包涵体经复性后具有脂肪酶活性,并表现出低温适应性;LipB则大部分表达为可溶性蛋白,Ni-亲和层析柱纯化后,其亦具有低温脂肪酶活性。青霉菌株XMZ-9的获得与低温脂肪酶的克隆表达研究,为研究低温菌株与低温酶的适冷机制提供了宝贵的资源,也为进一步开发利用低温脂肪酶奠定了基础。
- 郑小梅伍宁丰范云六
- 关键词：青霉菌脂肪酶基因克隆包涵体体外复性
