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温州地区鸭疫里默氏杆菌的分离、鉴定及药敏试验被引量：9: 2005年; 从浙江省温州地区2004年鸭场送检病死鸭的脑、心包液、脾及肝中分离到WZ1和WZ2两株细菌,将这两株细菌进行菌落形态观察、染色镜检、生化、血清鉴定及动物回归试验,证实该两株菌为鸭疫里默氏杆菌。两株细菌均对新霉素、头孢孟多、氟嗪酸及壮观霉素等抗生素敏感,对氟哌酸、氨卡青霉素、链霉素、庆大霉素、环丙沙星、氯霉素等不敏感。血清学试验表明,WZ1和WZ2两待检菌株血清型一致,但均不属于1型和2型。; 王连胜李龙林日春项延润于涟; 关键词：鸭疫里默氏杆菌动物回归试验染色镜检壮观霉素氟嗪酸鸭场

传染性法氏囊病毒HZ2株VP5基因缺失株的构建被引量：1: 2006年; 通过PCR方法，删除传染性法氏囊病毒HZ2株ORF A1和ORF A2非重叠区的33bp（96—129bp）的同时，引入Nhe Ⅰ酶切位点（GcTaGc）作为分子标记，构建含有A节段突变体的真核表达载体pCI-Nhe3，与HZ2株B节段真核表达载体pCI—mB在脂质体介导下共转染鸡胚成纤维（CEF）细胞．用转染细胞的培养液上清不断地接种新鲜细胞，模拟病毒“传代”．结果表明，细胞的形态学特征发生变化，产生了类似野生IBDV感染细胞时出现的细胞病变效应（CPE）．电子显微镜观察显示，在细胞超薄切片中有IBDV病毒粒子．间接免疫荧光分析结果表明，拯救的ANhe3株病毒的结构蛋白在CEF细胞得到了表达，而非结构蛋白（VP5）则不能表达．针对A节段的RT—PCR，酶切鉴定及进一步的序列测定结果验证了相应核苷酸片段的缺失和分子标记的引入．ANhe3株病毒接种不能导致11日龄SPF鸡胚的死亡，相对HZ2株致死率（20％）明显下降．本研究利用基于cDNA转染和RNA聚合酶Ⅱ系统的IBDV反向遗传系统，构建了IBDV VP5基因大片段缺失的毒株ANhe3株，为IBDV基因组学的研究提供了新方向，为进一步探索病毒复制和致病机制以及开发基因缺失疫苗奠定基础．; 李龙魏永伟黄耀伟于涟; 关键词：传染性法氏囊病毒基因缺失

中华鳖温和气单胞菌口服缓释微球疫苗的研究:疫苗用菌液培养条件的优化被引量：4: 2002年; 以中华鳖温和气单胞菌 (Aeromonas sobria,As)口服缓释微球疫苗生产菌株 Z- 1株培养菌液含菌量和胞外产物溶血性为指标 ,考察了培养温度、培养时间、振荡与否、培养基 p H等因素对 As Z- 1株繁殖和产毒的影响 ,并采用正交试验方法 ,对培养基配方进行了优化试验。结果表明 :不同的培养温度、培养时间、振荡与否、培养基 p H等均会影响As Z- 1株的菌体产量和溶血性 ,其中 2 8℃振荡 (2 0 0 r/ min)培养 36 h菌液的含菌量和溶血价均较高 ;在营养肉汤中添加适量的硫酸铜、磷酸二氢钾、硫酸锰和硫酸铵 ,可显著提高菌液的含菌量和溶血价。; 孙红祥李龙; 关键词：中华鳖温和气单胞菌

用于实验室诊断的猪病料的采集、保存和运输方法介绍(2)——疑似细菌性疾病病料的采集、保存和运输被引量：5: 2007年; 上文我们介绍了在疑似病毒性疾病病例中，如何采集用于实验室诊断的猪病料方法，及其保存和运输要点。本文我们将着重介绍疑似细菌性病例的相关内容。; 章叶恩李龙; 关键词：细菌性疾病运输方法病料病毒性疾病

用于实验室诊断的猪病料的采集、保存和运输方法介绍(1)——疑似病毒性疾病病料的采集、保存和运输被引量：8: 2007年; 多病原的混合感染已经成为当前猪传染性疾病流行的最主要特征之一，导致发病率和死亡率的显著上升，带来巨大的经济损失，同时造成了临床症状的不典型，为诊断带来了很大的难度，临床上，我们已经很难简单地将几个症状组合起来就判定是什么疾病。在2006年的所谓“无名高热病’讽暴中，大多数是由于误诊或诊断不及时，没有确诊是什么病就滥用苗滥用药，而造成大量死猪的惨重损失。; 李龙章叶恩; 关键词：病毒性疾病运输方法死猪病料临床症状

传染性法氏囊病病毒VP5缺失减毒株的构建: 传染性法氏囊病/(IBD/)是由传染性法氏囊病病毒/(IBDV/)引起的急性接触性传染病,是危害世界养禽业的主要传染病之一。IBDV主要侵害3-8周龄雏鸡的中枢免疫器官法氏囊,破坏带有sIgM的B淋巴细胞,引起脾脏、胸腺...; 李龙; 关键词：传染性法氏囊病病毒基因缺失免疫原性; 文献传递

鸡传染性法氏囊病病毒非结构蛋白基因的克隆、表达及多克隆抗体制备被引量：5: 2005年; 利用RT-PCR技术从传染性法氏囊病病毒(IBDV)TL2004株感染鸡胚尿囊液中扩增到VP5基因,进而构建了T7启动子控制下的N端GST-Tag融合表达质粒pGEX-VP5。序列测定表明VP5基因全长438bp,编码一个由145个氨基酸组成的VP5蛋白。将pGEX-VP5转化大肠杆菌BL21,在IPTG的诱导下高效表达了GST-VP5融合蛋白(44kD)。通过包涵体纯化的方法,获得的较高纯度的融合蛋白,免疫新西兰兔,Western blot和ELISA分析表明,制备的融合蛋白抗血清效价在1∶12800以上,并具有良好的免疫反应特异性,为进一步研究VP5在IBDV复制与致病中的作用,以及研制IBDVVP5基因缺失疫苗打下了良好的基础。; 于涟李龙刘岩郑江涛魏永伟; 关键词：VP5基因多克隆抗体

鸡白细胞介素2在毕赤酵母细胞中的表达被引量：14: 2004年; 目的　利用Pichia酵母真核细胞表达系统表达重组鸡白细胞介素 2 (IL 2 ) ,为大量制备鸡IL 2奠定基础。方法　将ConA激活的鸡脾脏T淋巴细胞中扩增得到的我国地方品种萧山鸡IL 2基因 ,克隆入pPIC9载体中构建重组质粒。将重组质粒电转化毕赤酵母GS115感受态细胞 ,甲醇诱导蛋白质表达。结果　SDS PAGE和Westernblot均在 30ku处检测到特异条带。结论　表明重组鸡IL; 许健樊拥军李龙万旺军李建荣于涟; 关键词：鸡IL-2 毕赤酵母免疫增强剂

人类及动物RNA病毒反向遗传系统: RNA病毒的反向遗传(reverse genetics)系统,是采用病毒的遗传材料,在培养细胞或易感宿主中重新拯救(rescue)出活病毒或类似病毒物质。能够拯救病毒的遗传材料称为感染性克隆,一般是在细菌质粒中含有整个病...; 黄耀伟李龙于涟; 文献传递

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李龙