何雪梅
- 作品数：6 被引量：25H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- H9与HepG-2体外共培养上清对HepG-2增殖迁移及凋亡的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:研究胚胎干细胞H9与肝癌细胞株Hep G-2共培养上清对肝癌细胞Hep G-2增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:体外共培养H9与Hep G-2,于不同时间即12、24、36、48 h取得上清,并把不同浓度上清即20%、40%、60%、80%作用于Hep G-2细胞,于倒置荧光显微镜下观察细胞的生长情况和形态变化;用MTS法检测不同浓度上清分别作用Hep G-2细胞24、48 h后细胞的增殖情况;应用流式细胞术检测细胞的凋亡情况;用Hochest33258染色检测细胞的凋亡情况;Transwell小室法检测上清对细胞侵袭迁移的影响。结果:不同浓度的共培养上清液均对Hep G-2细胞的增殖有一定的抑制作用,并且40%浓度及以上的浓度能明显促进肝癌细胞的凋亡,主要是早期和晚期凋亡,小室法也看出,上清对肝癌细胞的侵袭和迁移也具有明显的抑制作用,同时,上清对正常的肝细胞L02无明显的作用。结论:胚胎干细胞与肝癌细胞Hep G-2共培养上清能够在体外明显抑制肝癌细胞Hep G-2的增殖、迁移和侵袭,并且促进其凋亡,并且具有浓度依赖性,共培养时间越长,抑制效果越好。说明此上清具有一定的抗肿瘤效应。
- 何雪梅郑良栋张婷刘梦楠冯涛
- 关键词：肝癌细胞HEPG-2细胞增殖
- 人胚胎干细胞对肝癌HepG2细胞体外抑制作用的研究
- 2017年
- 目的:研究体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌HepG2细胞的抑制作用。方法:建立人胚胎干细胞(H9)与肝癌HepG2细胞共培养体系,显微镜下观察胚胎干细胞对肿瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞仪检测H9细胞对肿瘤细胞的凋亡与周期的影响,Transwell小室法检测H9细胞对HepG2细胞侵袭和迁移的影响,基因芯片分析共培养后HepG2细胞全基因组的表达谱变化。结果:结果发现共培养过程中,肝癌HepG2细胞生长受到抑制,随共培养时间延长,细胞数量逐渐减少,出现老化或凋亡迹象;流式细胞术检测发现HepG2细胞凋亡率显著增加,细胞周期被阻滞于G0/G1期;Transwell实验发现HepG2细胞侵袭、迁移力均降低;基因芯片结果发现HepG2细胞全基因组表达谱发生了显著变化,差异基因涉及多条信号通路。结论:人胚胎干细胞H9体外对人肝癌细胞HepG2有一定程度的抑制作用。
- 郑良栋何雪梅张婷刘洁霍本念刘梦楠王薛冯涛
- 关键词：胚胎干细胞肝癌共培养
- 虫草素对A549细胞增殖、凋亡及核转录因子NF-κB活性的影响被引量：5
- 2015年
- 目的:研究虫草素对A549细胞增殖、凋亡及核转录因子NF-κB的影响,并探讨其诱导凋亡的机制。方法:采用MTS法检测不同浓度虫草素对A549细胞的增殖抑制作用,并计算24 h的IC50;用Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测24 h不同浓度虫草素诱导A549细胞凋亡的情况;Western blot法检测虫草素对A549细胞核内NF-κB p65及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、cleaved Caspase-3表达的影响。结果:虫草素能明显抑制A549细胞增殖,促进其凋亡;随着虫草素浓度的升高,BAX和cleaved Caspase-3的表达上调,而BCL-2表达下调;Western blot检测结果显示,虫草素能抑制A549细胞质中的NF-κB p65向核内转位。以上作用均呈现量效关系。结论:虫草素能抑制A549细胞增殖并促进其凋亡,机制可能与抑制NF-κB通路相关。
- 张超钟沁张锡峰胡代曦何雪梅李权伦冯涛
- 关键词：虫草素A549细胞NF-ΚB
- 乳腺癌细胞-干细胞共培养上清液对乳腺癌细胞的体外抗肿瘤作用研究被引量：5
- 2016年
- 研究人胚胎干细胞H9与肿瘤细胞MDA-MB-231共培养上清液对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用。建立人胚胎干细胞H9与乳腺癌MDA-MB-231细胞接触式共培养体系,收集共培养上清液。以单独培养的H9细胞上清为对照,显微镜下观察共培养上清液对肿瘤细胞生物行为学的影响,用MTT法检测上清液对MDAMB-231细胞增殖能力的影响,Hoechst染色及流式细胞术检测上清液对肿瘤细胞的凋亡影响;transwell小室法检测上清液对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响。结果显示,共培养上清液能抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其凋亡,抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移,而单独培养的H9细胞上清液对MDA-MB-231细胞几乎没有影响。因此得出结论,人胚胎干细胞H9与人乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养的上清液对MDA-MB-231有一定的体外抑癌效应。
- 郑良栋冯涛何雪梅张婷刘梦楠廖红
- 关键词：胚胎干细胞共培养乳腺癌
- 表达HBx的肝前体细胞的小鼠肝内移植模型的构建被引量：5
- 2014年
- 目的构建表达乙肝病毒X基因(HBx)的肝前体细胞,并经小鼠门静脉注射建立肝内移植模型,为进一步研究HBx对肝前体细胞的作用和影响及其在原发性肝癌发病机制中的作用奠定了基础。方法分别将表达HBx基因的重组腺病毒Ad-HBx-GFP和空载体Ad-GFP转染小鼠肝前体细胞,再经小鼠门静脉注射后3、7、14 d取血清和肝组织,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)变化情况,观察绿色荧光蛋白表达情况,免疫组织化学法观察HBx阳性染色,并取表达高峰在第7天的肝组织,进行Western blot法和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法分别检测HBx的蛋白及mRNA表达。结果成功构建了表达HBx并靶向针对肝前体细胞的小鼠模型,绿色荧光蛋白表达量、免疫组化阳性细胞数量及血清ALT均在注射后第7天达到高峰,RT-PCR及Western blot均检测到第7天14-19/Ad-HBx-GFP组小鼠肝组织目的基因及蛋白的特异性表达,与14-19/Ad-GFP组及生理盐水注射组相比结果具有统计学差异。结论成功构建了表达HBx并靶向针对肝前体细胞的小鼠模型,操作可靠,重复性好,效果稳定,不仅对探讨原发性肝癌的发生机制奠定了基础,也为肿瘤动物模型的构建提供了新的思路。
- 钟沁张超何雪梅胡代曦张锡峰黄佳祎冯涛
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝前体细胞绿色荧光蛋白门静脉
- 虫草素通过抑制NF-κB途径增强A549细胞对顺铂的敏感性被引量：9
- 2015年
- 目的通过研究虫草素和顺铂单用或联用对肺癌细胞A549的抗肿瘤效应,探讨其可能的作用机制,为临床肿瘤治疗提供新思路。方法四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的虫草素与顺铂单用或虫草素与顺铂(3μg·m L-1)联用对A549的增殖抑制作用,并计算IC50;采用Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测虫草素与顺铂单用或联用诱导A549细胞凋亡情况;Western blot法检测不同处理组的细胞核内NF-κBp65及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果虫草素与顺铂联用对A549细胞的抑制作用显著增加,增强了顺铂对A549的敏感性;Hoechst 33258染色及流式细胞术显示,与虫草素和顺铂单独用药相比,联合用药能够明显增加顺铂诱导的细胞凋亡;Western blot结果显示,与对照组相比顺铂能够增加细胞核内NF-κBp65的活性,然而虫草素却能抑制NF-κBp65的活性,联合用药后NF-κBp65的活性明显下调;与顺铂单独用药相比,联合用药组能够使促凋亡蛋白Bax表达显著增高,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达则降低。结论虫草素能够增强顺铂对肺癌细胞A549的敏感性,其作用机制是通过抑制NF-κB途径,调节下游信号分子Bax和Bcl-2的表达而实现。
- 张超钟沁张锡峰胡代曦何雪梅冯涛
- 关键词：虫草素顺铂A549NF-ΚB
