赵晓民
- 作品数：43 被引量：75H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金西藏自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生生物学更多>>
- 一例感染奇异变形杆菌病死犊牛的诊断被引量：3
- 2020年
- 2019年3月陕西省某奶牛场产房舍犊牛相继发生腹泻和气喘,有零星死亡。为了解病因,对1例送检的病死犊牛剖检。肉眼可见全身多个脏器出血,肺脏弥漫性分布脓肿灶,并与心包膜、胸膜及膈肌粘连,心包腔、胸腔和腹腔积有多量血色液体;镜检主要病变有化脓性肺炎、坏死性小肠炎、浆液性淋巴结炎、急性肾小球肾炎、心肌炎及大脑神经元变性坏死。采集肺、心包液、脾、肝组织经细菌分离培养、革兰染色镜检及16SrRNA基因扩增及序列比对,鉴定为奇异变形杆菌。此病死犊牛初步诊断为奇异变形杆菌感染,死因是奇异变形杆菌引起的化脓性肺炎和败血症。
- 芮聪杞艳萍郭建雄米咪陈松彪赵晓民常玲玲
- 关键词：犊牛奇异变形杆菌败血症诊断
- TGEV N蛋白诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡
- [研究目的]猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus ofSwine,TGEV)属于尼多病毒目、冠状病毒科、冠状病毒亚科、冠状病毒属家族成员,由其引起的猪传染性胃肠炎是一...
- 张樑丁利黄勇赵晓民童德文
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白细胞周期阻滞细胞凋亡
- 口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒双重RPA检测试剂盒
- 本发明公开了一种口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒双重RPA检测试剂盒，包括由SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.6所示核苷酸序列组成的口蹄疫病毒RPA检测引物组，以及由SEQ.ID.NO.8和SEQ.ID.NO.11所...
- 赵晓民童德文王凯丽郭建雄
- 文献传递
- GHSR-1a在奶山羊胃肠道的分布与表达被引量：2
- 2014年
- 试验采用免疫组织化学、Real-time PCR和Western blotting方法测定ghrelin的功能性受体GHSR-1a(Growth hormone secretagogue receptor-1a,GHSR-1a)在奶山羊胃肠道的分布和表达。免疫组织化学结果显示,GHSR-1a免疫阳性细胞广泛分布于奶山羊胃肠道。在皱胃主要定位于黏膜层和肌层;瘤胃、网胃和瓣胃黏膜层及肌层中也可见GHSR-1a免疫阳性细胞;在小肠主要位于十二指肠、空肠和回肠的黏膜层、黏膜下层和肌层;在结肠、盲肠和直肠GHSR-1a免疫阳性细胞也有广泛分布;GHSR-1a主要表达于内在神经丛神经细胞、胃底腺上皮细胞、肠腺上皮细胞、复层鳞状上皮细胞、平滑肌细胞中。real-time PCR和Western blotting结果显示,皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠GHSR-1a的表达水平相对较高,显著高于瘤胃、网胃和瓣胃的表达(P<0.05)。结果表明,ghrelin可能通过GHSR-1a对奶山羊胃肠功能具有重要的调节作用。
- 于高水张文龙黄勇赵晓民李伟童德文
- 关键词：胃肠道PCR奶山羊
- 胸腺肽β4基因的克隆、表达及活性检测被引量：1
- 2008年
- 【目的】在大肠杆菌中克隆和表达胸腺肽β4(thymosinβ4,Tβ4)基因,并进行分离纯化及免疫活性测定。【方法】将基因序列拆分成10个互补的小片段,互为模板,采用PCR两步法扩增得到Tβ4基因。将Tβ4基因片段克隆至pTXB1载体的NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,将重组质粒转化至E.coliBL21 codon plus,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达、几丁质(Chitin beads)亲和层析柱纯化Tβ4。然后用MTT法测定Tβ4的免疫活性。【结果】经测序表明获得了序列正确的人胸腺肽β4基因,构建重组质粒pTXB1-Tβ4,经SDS-PAGE电泳分析表明,重组质粒pTXB1-Tβ4在E.coliBL21 codon plus中高效表达,表达量为30%。将表达产物用几丁质亲和层析柱纯化,获得较纯的Tβ4。MTT检测表明,Tβ4有促进淋巴细胞增殖的活性,最适刺激质量浓度为1.6μg/mL。【结论】获得高效表达的、高纯度的、有生物活性的重组Tβ4,它可促进淋巴细胞的分化、增殖,具有免疫活性,最适刺激质量浓度为1.6μg/mL。
- 赵晓民张晓光吴淑华童德文
- 关键词：基因表达MTT活性检测
- 一种猪CD40L/GMCSF/PCV2Cap重组腺病毒的构建、扩增及纯化方法
- 本发明涉及一种猪CD40L/GMCSF/PCV2 Cap重组腺病毒的构建、扩增及纯化方法，步骤如下：S1依次将CD40L、GM‑CSF和Cap连接到载体pUC57，命名为pUC‑CD40L‑Cap‑GMCSF；S2将CD...
- 童德文黄勇李德龙赵晓民
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒D250R蛋白生物信息学分析及多克隆抗体制备被引量：1
- 2022年
- 【目的】分析非洲猪瘟病毒(Africa swine fever virus, ASFV)D250R蛋白潜在的生物学功能,制备其多克隆抗体,为ASFV D250R蛋白功能研究及相关诊断试剂的研发提供材料。【方法】应用生物信息学软件分析D250R蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、磷酸化位点、生物功能及蛋白结构等。通过大肠杆菌表达系统表达重组D250R蛋白,采用镍亲和层析柱和分子筛纯化重组D250R蛋白,Western blotting检测纯化蛋白的反应原性,将纯化的D250R蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,用间接ELISA方法测定多克隆抗体效价,用间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体特异性。【结果】生物信息学分析结果显示,D250R蛋白共由250个氨基酸组成,理论分子质量为29 822.54 u,理论等电点为8.96,为亲水性蛋白,无信号肽及跨膜区。修饰位点预测结果显示,D250R蛋白可能存在15个磷酸化修饰位点,其中丝氨酸(Ser)6个、酪氨酸(Tyr)6个、苏氨酸(Thr)3个;2个N-糖基化修饰位点,分别位于第61和197位氨基酸处。生物学功能预测结果显示,D250R蛋白含有Nudix序列,具有解水解酶活性。蛋白结构预测结果显示,D250R蛋白二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链、无规则卷曲占比分别为49.20%、7.60%、15.20%和28.00%,三维空间结构存在较多α-螺旋,与二级结构预测结果基本一致。将ASFV D250R基因克隆至pET-32a(+)获得pET-32a-D250R重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,在16℃、1 mmol/L IPTG诱导下,D250R蛋白以可溶性和包涵体2种形式表达,蛋白大小约44 ku,蛋白上清经镍亲和层析柱和分子筛层析纯化得到纯度较高的蛋白;Western blotting检测结果显示,重组蛋白具有良好的反应原性;间接ELISA检测结果显示,D250R蛋白抗体效价达到1∶256 000,成功制备多克隆抗体;IFA检测结果表明该多克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本研究在分子层面分析了D250R蛋白的理化性质及
- 许春梅邵明珠王心悦林佳迪郭建雄张祥胤童德文梁瑞英赵晓民
- 关键词：生物信息学分析多克隆抗体
- 雌激素受体及其作用机制被引量：35
- 2004年
- 目前对雌激素受体结构和功能的研究比较深入,雌激素受体与肿瘤发生机制、雌激素受体在体内的表达调控及其分子作用机理已引起人们的广泛关注。针对这一现状,对雌激素受体的结构和功能,雌激素受体在体内的分布及其作用机制、应用前景等方面的研究进展进行了综述。
- 赵晓民徐小明
- 关键词：雌激素受体甾体激素
- 胸腺肽β4基因的克隆表达及活性测定
- 胸腺肽β4(thymosin β4，Tβ4)是存在于多种动物的多种组织中的一种酸性肽，分子量为4982，PI为5.1，N端丝氨酸被乙酰化，它的cDNA序列和氨基酸序列已明确，含有2个a螺旋结构，分别位于第4-16和第30...
- 赵晓民
- 关键词：小鼠脾淋巴细胞酶切鉴定原核表达载体脾淋巴细胞增殖感受态
- 文献传递
- microRNA对TGEV诱导的IPEC-J2线粒体损伤的调控作用及机制
- 目的：猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)引起的一种猪的急性、高度...
- 马雪连赵晓民童德文
