蔺诗佳
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脂质体包裹水泡口炎病毒基质蛋白治疗淋巴瘤的实验研究
- ＜正＞背景与目的:水泡口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus,VSV）是弹状病毒科的原型病毒,是具有溶瘤作用的RNA病毒。一些研究小组在动物模型实验中证明了VSV病毒的溶瘤作用。研究表明VSV可以...
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- 文献传递
- 小鼠干扰素-γ基因克隆及其腺病毒载体的构建被引量：4
- 2010年
- 目的构建含有小鼠干扰素-γ(mIFN-γ)基因的腺病毒载体,为探索IFN-γ在肝纤维化治疗中的作用研究奠定基础。方法从含有mIFN-γ基因的质粒载体pORF5-mIFN-γ中PCR扩增出mIFN-γ基因片段,双酶切将该基因克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV中,限制性内切酶PmeⅠ线性化pAdTrack-CMV-mIFN-γ,转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌株BJ5183细胞,同源重组。卡那霉素及酶切筛选出重组子pAd-mIFN-γ,内切酶PacⅠ线性化重组子,用磷酸钙法转染细胞株AD-293进行包装,收集病毒进行鉴定。结果 PCR后测序获得mIFN-γ基因,全长468 bp,与GenBank中发表的mIFN-γ基因核苷酸序列完全一致。经酶切和PCR证实各中间过程载体均含有目的基因。包装的病毒Ad-mIFN-γ在转染的4～6 d观察到荧光产生,8～11 d荧光逐渐增加,12 d收集病毒液。蛋白酶K裂解重组腺病毒,经PCR和Western blot方法鉴定,证实携带有目的基因mIFN-γ。结论大肠杆菌内同源重组法能有效和较为方便地构建出含有目的基因的腺病毒载体pAd-mIFN-γ,重组子能够在AD-293细胞中进行包装和扩增,病毒包装的成功为进一步研究mIFN-γ基因治疗小鼠肝纤维化提供了一个良好的转导载体。
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- 关键词：腺病毒载体
- 小鼠干扰素-γ（mIFN-γ）基因克隆及其腺病毒载体的构建
- ＜正＞目的:构建含有mIFN-γ基因的腺病毒载体,为探索IFN-γ在肝纤维化治疗中的作用研究奠定基础。方法:从含有mIFN-γ基因的质粒载体pORF5-mIFN-γ中PCR扩增出mIFN-γ基因片段,双酶切将该基因克隆入...
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- 文献传递
- 通光藤提取物对血液肿瘤细胞株增殖和凋亡的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨通光藤提取物抑制人血液肿瘤细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法采用MTT法检测通光藤提取物,包括不同乙醇洗脱组分及C21甾体皂苷单体化合物,作用不同浓度和时间,对人血液肿瘤Raji、NB4和K562细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测通光藤C21甾体皂苷单体化合物诱导上述细胞凋亡的作用。结果通光藤70%乙醇洗脱物,在较高浓度(100μg/mL和200μg/mL)下对3种人血液肿瘤细胞株Raji、NB4、K562细胞增殖有显著的抑制作用,优于50%和30%乙醇洗脱物(P<0.05)。4个C21甾体皂苷单体化合物tenacissosides B、C、I和marsdenoside K在体外实验中均表现出对Raji、NB4和K562细胞增殖的抑制作用;其中tenacissoside C的作用最强,和其他3种单体化合物相比差异具有统计学意义(P<0.05),其对Raji、NB4、K562细胞的半数抑制浓度分别为64.1μmol/L、70.4μmol/L和105.8μmol/L。98.4μmol/L tenacissoside C对Raji、NB4和K562细胞分别作用24h和48h,均可促进各肿瘤细胞的早期凋亡和晚期凋亡,与对照组比较凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论通光藤提取物,包括不同乙醇洗脱组分及C21甾体皂苷单体化合物,对多种人血液肿瘤细胞株体外有抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用,其中以C21甾体皂苷单体化合物tenacissoside C的抑制作用最明显,对人Burkitt’s淋巴瘤细胞株Raji增殖的抑制作用最强。
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- 关键词：通光藤血液肿瘤增殖凋亡
- 脂质体包裹水泡口炎病毒基质蛋白对小鼠淋巴瘤的治疗作用及机制研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨采用阳离子脂质体包裹水泡口炎病毒(VSV)基质蛋白(M蛋白)基因重组质粒制备的脂质体质粒DNA复合物(Lip-MP)在实验动物体内的抗淋巴瘤效应及其机制。方法建立C57BL/6小鼠EL4淋巴瘤模型,将60只荷瘤小鼠随机分为5组:脂质体-pcDNA3.1-MP复合物(Lip-MP)组、脂质体-pcDNA3.1空质粒复合物(Lip-pVAX)组、单纯脂质体(Lip)组、阿霉素(ADM)组和生理盐水(NS)组,经尾静脉给药,观察各组小鼠的一般情况、肿瘤生长体积、小鼠生存期,采用CD31染色检测肿瘤组织的微血管密度(MVD)、TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,Ki-67染色检测细胞增殖。结果 Lip-MP组小鼠与Lip-pVAX组、Lip组、NS组相比,中位生存期延长(P<0.05),与ADM组相比中位生存期差异无统计学意义。从治疗的第6 d开始到观察结束时,Lip-MP组小鼠肿瘤生长更缓慢,体积更小,与Lip-pVAX组、Lip组、NS组相比差异有统计学意义(P<0.05),与ADM组相比差异无统计学意义。肿瘤组织TUNEL、CD31和Ki67染色结果显示,Lip-MP组肿瘤组织凋亡细胞增多,微血管数减少,增殖活性降低,与Lip-pVAX组、Lip组、NS组3个组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论体内研究显示脂质体包裹的水泡口炎病毒M蛋白对小鼠EL4淋巴瘤产生明显抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成和抑制肿瘤细胞增殖有关。
- 蔺诗佳喻琴梅孟文彤文艳君陈俐娟牛挺
- 关键词：基质蛋白阳离子脂质体淋巴瘤基因治疗
