龚琳
- 作品数:5 被引量:12H指数:2
- 供职机构:湖南师范大学更多>>
- 发文基金:湖南省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学文化科学更多>>
- 果蝇nulp1特异性多克隆抗体制备及检测被引量:6
- 2011年
- 为了利用果蝇模型研究nulp1蛋白在早期心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增出果蝇nulp1基因的部分编码区并插入到pET28a表达载体中.之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3);通过IPTG诱导表达His-nulp1融合蛋白,该融合蛋白采用Ni2+金属螯合层析纯化后,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,利用west-ern blot对抗体进行分析.结果表明获得了高效价的特异性兔抗f-nulp1多克隆抗体.这为进一步研究果蝇心脏发育的分子机制创造了条件.
- 龚琳王跃群袁婺洲莫小阳万永奇江志钢吴秀山李永青
- 关键词:果蝇原核表达多克隆抗体
- 果蝇心脏发育候选基因Nulp1的相互作用蛋白研究
- 正常的心脏发育过程受到多种基因的精确调控,发育过程中任一基因的改变都可能导致先天性心脏病的发生。本实验室前期筛选出一个新的人类心脏发育候选基因Nulp1,利用果蝇模型初步证明该基因的同源基因CG7927与心脏发育有关。本...
- 龚琳
- 关键词:FHL2果蝇相互作用免疫共沉淀
- 文献传递
- 人类新基因WDR24的研究初报
- 2009年
- WD40家族是一类结构保守、功能复杂的蛋白。目前很多研究显示该家族成员通过参与MAPK信号途径调控细胞内信号转导而影响细胞的基本生命活动。为了鉴定参与细胞生命活动的新基因,运用同源基因克隆法,通过PCR技术扩增获得一个新的人类基因WDR24,其cDNA全长3 302 bp,2 373 bp长的开放阅读框编码由790个氨基酸残基组成的蛋白质。生物信息学分析表明,WDR24蛋白在进化上高度保守,与其他脊椎动物中的同源蛋白组成了一个功能未知的亚家族。蛋白序列分析显示其中有6个WD40重复序列和1个ERK的停泊位点D-domain。RT-PCR分析表明,该基因在所有被检测的人类胚胎组织中表达。
- 周云雷满贤龚琳吴秀山李永青
- 关键词:基因克隆RT-PCR
- 一种基于氧化物纳米酶的试纸条检测铬(Ⅵ)离子的方法
- 本发明提供了一种基于氧化物纳米酶(Cu‑CeO<Sub>2 </Sub>NPs)的试纸条检测铬(Ⅵ)离子的方法。本发明属于重金属离子检测技术领域,涉及一种基于Cu‑CeO<Sub>2 </Sub>NPs的试纸条的制备及其...
- 刘美玲龚琳李睿媌张佳男朱雨樊优赵文应张友玉
- 斑马鱼Lefty1特异性多克隆抗体的制备被引量:7
- 2010年
- Lefty蛋白是TGFβ大家族的配体,通过与Nodal以及Nodal的受体结合而抑制Nodal信号转导。本文采用PCR技术扩增出斑马鱼lefty1基因(z-lefty1)的部分编码区,将其插入到pGEX-4T-1原核表达载体中。所构建的重组质粒(pGEX/z-Lefty1)转化入BL21大肠杆菌,通过IPTG诱导表达GST-z-Lefty1融合蛋白。蛋白经尿素洗涤分离后用于免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体。Western blotting检测结果表明获得了高效价的特异性兔抗z-Lefty1多克隆抗体。这为进一步研究斑马鱼心脏发育的分子机制创造了条件。
- 满贤龚琳王跃群李帆刘华友莫小阳邓云万永奇吴秀山李永青
- 关键词:原核表达多克隆抗体