黄远帅
- 作品数：38 被引量：123H指数：7
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省卫生厅科研基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- HtrA基因缺陷对肺炎链球菌毒力影响的研究被引量：5
- 2006年
- 目的HtrA基因可编码肺炎链球菌的一种重要蛋白酶,本文目的是探索HtrA基因缺陷对细菌毒力的影响.方法用插入复制失活的方式使HtrA基因缺失,通过RT-PCR分析毒力因子表达,并通过动物试验观察HtrA基因缺陷株毒力改变情况.结果RT-PCR显示HtrA缺陷株毒力因子表达低于野毒株,两组比较P<0.05;转化试验发现缺陷菌株转化力下降;小鼠毒力试验表明野毒株半数致死时间22h,而缺陷株半数致死时间8d,P<0.01,有显著性差异;缺陷菌在小鼠体内被清除速度也显著快于野毒株.结论HtrA基因缺陷使肺炎链球菌多种毒力因子表达减弱,自然转化能力下降,毒力降低.
- 黄远帅许颂霄朱旦阳强刘明芳陈淑惠张雪梅尹一兵
- 关键词：肺炎链球菌毒力因子密度感应系统
- 肺炎链球菌comX基因可影响细菌毒力基因表达被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨肺炎链球菌的转化相关基因comX与其毒力表达的关系.方法:采用插入失活的方法制备肺炎链球菌的相关基因缺陷菌株,通过小鼠毒力实验观察它们毒力的变化,并应用RT-PCR测定肺炎链球菌的主要毒力因子透明质酸酶(phd),分泌型IgA结合蛋白(sIgA),肺炎链球菌自溶酶(lytA),肺炎链球菌神经氨酸酶A(nanA)和肺炎链球菌溶血素(ply)在细菌感受态发生过程中的表达,并比较其在野生和缺陷菌株中的表达的异同.结果:野生菌株的毒力基因受感受态刺激因子(CSP)诱导表达增加;虽comX基因缺陷菌株与野生菌株感染小鼠的能力无显著差异,但其ply基因的表达与comE基因缺陷菌株一样显著低于野生菌株的表达.结论:comX可通过细菌转化的通路影响细菌毒力基因的表达.
- 张雪梅尹一兵孟江萍许颂霄王虹黄远帅
- 关键词：毒力基因
- LAMP与FQ-PCR技术检测HBV DNA的特异性和灵敏度比较被引量：2
- 2013年
- 目的采用环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术与实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)技术检测HBV DNA,并对LAMP方法的反应条件进行优化,比较两种方法检测HBV DNA的灵敏度及特异性。方法选取经医院确诊的乙肝患者的血清,提取血清中的HBV DNA作为扩增模板,同时对LAMP方法的各种条件进行优化,并分别采用LAMP和FQ-PCR两种方法对同一HBV DNA模板做10倍梯度稀释的标本进行HBV DNA的检测,比较其灵敏度;分别用两种方法对乳头瘤病毒(HPV)、EB病毒、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌以及正常人血清基因组DNA在相同条件下进行实验,观察两种方法在检测中是否出现假阳性结果,以确定两种方法的特异性。结果对同一HBV DNA模板进行10倍梯度稀释后,FQ-PCR技术在待测血清标本(2.38×107 copy/mL)被稀释到10-5,就难以进行准确检测,而LAMP方法在待测血清标本被稀释到10-7时,仍能获得较好的扩增结果;对HPV、EB病毒、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌以及正常人血清基因组DNA进行LAMP和FQ-PCR检测,结果均为阴性。结论采用LAMP方法可以成功、快速、高效、特异地扩增HBV DNA,与FQ-PCR方法比较,都能特异地检测HBV DNA,但LAMP方法具有更高的灵敏性,操作更为简单、方便,且不需要昂贵的仪器,更适合基层检测机构推广使用。
- 邓正华晏丽黄远帅彭瑛温先勇
- 关键词：LAMPFQ-PCRHBVDNA特异性
- 粘膜免疫ClpX蛋白对小鼠肺炎链球菌感染的保护效果及机制的实验研究
- 钟文董杰张雪梅尹一兵胥文春王虹黄远帅曹炬龚艺徐绣宇闵迅张彦青
- 前交通动脉瘤与A1段优势血流相关性研究被引量：7
- 2004年
- 目的 探讨前交通动脉瘤与大脑前动脉水平段 (A1段 )优势血流的关系。方法 回顾性分析 186例数字减影全脑血管造影表现和临床资料。结果 5 5例前交通动脉瘤患者有 34例呈A1优势 ;34例呈A1优势者中 33例前交通动脉瘤发生在A1优势侧 ,有 1例发生在A1优势对侧。结论 前交通动脉瘤多发生在A1优势侧。因此 ,前交通动脉瘤的形成与Willis前环的血流动力学变化有直接的关系。
- 黄永火欧阳祖彬黄远帅欧阳羽冯新民李信友
- 关键词：血流动力学前交通动脉瘤脑血管造影
- 宫颈癌相关HPV基因型DNA芯片与基因诊断系列研究
- 戴勇眭维国吕晓萍欧明林黄远帅唐敏陈洁晶
- 课题的来源与背景：该课题来源于深圳市科技局立项课题(项目编号：200304017)和卫生部医药卫生科技发展研究中心科研课题(项目编号：WKJ2007-3-001)。宫颈癌是最为常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内，每年大约新...
- 关键词：
- 关键词：宫颈癌基因诊断分子流行病学
- 肺炎链球菌SpxB蛋白的细胞表达定位、保守性分析及其生物学功能初探被引量：3
- 2014年
- 目的鉴定肺炎链球菌中spxB基因编码蛋白的丙酮酸氧化酶活性、细胞表达定位和保守性表达,并初步研究该基因对细菌毒力影响的部分机制。方法利用PCR方法扩增肺炎链球菌D39菌株的spxB基因全长序列,并将其整合至表达载体pET-28a(+),经测序鉴定后,将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达含有His标签的rSpxB蛋白,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,使用SDS-PAGE鉴定蛋白纯度,采用一种商品丙酮酸氧化酶活性质控方法鉴定其酶活性。以rSpxB蛋白免疫昆明小鼠获得其多克隆抗体。采用ELISA检测多克隆抗体效价,采用Western blot鉴定抗体的特异性和蛋白的保守性表达。采用流式细胞术鉴定spxB的细胞表达定位。构建spxB缺陷菌,通过与流感嗜血杆菌进行共同培养初步探索其毒力机制。结果实现了具有丙酮酸氧化酶活性SpxB蛋白的可溶性表达,该蛋白免疫小鼠后获得高效价特异的抗SpxB蛋白抗血清,Western blot鉴定显示SpxB蛋白在1、2、4、6B、14、19F和23F等血清型肺炎链球菌均有表达,流式细胞术检测显示SpxB蛋白的荧光信号较阴性对照有右移,但较阳性对照的荧光信号弱很多。野生菌株D39产生的过氧化氢显著高于spxB缺陷菌,D39菌株对流感嗜血杆菌的生长抑制作用显著强于spxB缺陷菌。结论肺炎链球菌spxB基因编码的蛋白具有丙酮酸氧化酶活性,在肺炎链球菌中有保守表达,且主要表达于细胞内。该蛋白有助于肺炎链球菌与流感嗜血杆菌共同生长时的优势生长。
- 王哲王建敏马峰张帅黄远帅张雪梅
- 关键词：肺炎链球菌丙酮酸氧化酶保守性
- 精神分裂症患者血清非编码小分子RNA-320a及RNA-320b表达的研究
- 2015年
- 目的:探讨精神分裂症患者血清非编码小分子RNA(miR)-320a、320b的表达。方法:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测30例首次发病的精神分裂症患者(发病组)、30例治疗后临床缓解的精神分裂症者(缓解组)和30名正常对照者(健康对照组)血清miR-320a及miR-320b表达水平。结果:发病组和缓解组血清miR-320a和miR-320b表达明显低于健康对照组(P均<0.001),且发病组明显低于临床治愈组(P均<0.05)。结论:精神分裂症患者血清miR-320b和miR-320a表达低,并与病情有关。
- 彭瑛黄远帅邓正华程松王开正
- 关键词：精神分裂症
- 微小RNA与精神分裂症及其治疗的研究进展
- 2015年
- 对微小RNA与精神分裂症及其治疗的研究进展综述如下。
- 王雨涵黄远帅
- 关键词：精神分裂症微小RNA
- 肺炎链球菌转化模型的建立与优化被引量：4
- 2006年
- 建立肺炎链球菌转化模型，优化转化体系，提高转化率，以便于进一步研究其致病的分子机制。制备肺炎链球菌感受态。首先在不同菌密度下转化外源DNA，计数抗生素筛选平板上的转化菌落，比较其转化率，确定转化的最适菌密度；然后在此菌密度下比较CSP诱导不同时相的转化率，同时用RT-PCR检测感受态调控基因comE的表这。对所用血清3型菌株而言转化的最适菌密度在OD550=0．09～0．10之间；CSP-2诱导10min后转化率最高，可达（15．6±3）％；comE的表达也在CSP-2诱导10min后达到最高。在实验室条件下。肺炎链球菌转化受多种因素的影响，必需控制好各种因素。选择最优条件才能获得稳定、高效的转化。
- 孟江萍尹一兵张雪梅蓝锴黄远帅涂植光
- 关键词：肺炎链球菌感受态
