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SAT-TB联合FQ-PCR检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的效能: 2024年; 目的:分析RNA恒温扩增实时检测技术(SAT-TB)联合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测在痰涂片阴性肺结核患者诊断中的效能。方法:选取2020年7月至2022年7月该院收治的75例疑似痰涂片阴性肺结核患者进行前瞻性研究。采集所有患者肺泡灌洗液标本,采用SAT-TB、FQ-PCR法进行检测,以结核分枝杆菌痰培养结果为“金标准”,比较SAT-TB、FQ-PCR单项及联合检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的效能。结果:金标准结果显示,75例疑似痰涂片阴性肺结核患者中,阳性48例,阴性27例;SAT-TB检测结果显示,阳性36例,阴性39例;FQ-PCR检测结果显示,阳性37例,阴性38例;SAT-TB联合FQ-PCR检测结果显示,阳性47例,阴性28例;SAT-TB联合FQ-PCR检测诊断痰涂片阴性肺结核的灵敏度、准确度均高于SAT-TB、FQ-PCR单项检测诊断,漏诊率低于SAT-TB、FQ-PCR单项检测诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SAT-TB联合FQ-PCR检测诊断痰涂片阴性肺结核的效能高于二者单项检测诊断效能。; 刘延华; 关键词：荧光定量PCR 痰涂片阴性肺结核

鉴别猪圆环病毒2型和3型双重TaqMan MGB探针FQ-PCR检测方法研究: 2024年; 建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验,建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示:该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸,与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应,特异性较强;对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL,敏感性较高;PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下,表明方法稳定性、重复性较好;干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点,可用于临床PCV2/PCV3感染的快速鉴别检测。; 赵雪丽闫若潜王华俊王淑娟马震原谢彩华柴茂杨海波王翠刘影王东方; 关键词：猪圆环病毒2型

非洲猪瘟病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用: 2024年; 建立一种特异、敏感、快速的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,用于非洲猪瘟病毒(ASFV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的鉴别诊断。针对ASFV的B646L基因和HP-PRRSV的NSP2基因分别设计特异性引物/探针对,经优化反应体系、反应程序等反应条件,建立一种基于探针技术的FQ-PCR方法,验证方法的敏感性、特异性和重复性,对130份临床样品进行检测,并与OIE检测方法(ASFV)及国标方法(HP-PRRSV)进行比较分析。本研究成功建立的ASFV和HP-PRRSV二重FQ-PCR检测方法在10^(-1)~10^(5) copies/μL模板范围内有良好的线性关系;对ASFV和HP-PRRSV基因出现阳性扩增,但对猪日本乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典株(VR2332株)、健康猪脾脏等7种病原核酸样品对照未出现扩增;批内、批间试验变异系数在0.53%~3.14%,重复性良好;对ASFV和HP-PRRSV的最低检测模板浓度均为10 copies/μL;利用建立的二重FQ-PCR方法对130份临床样品进行检测,检测结果与OIE检测方法(ASFV)及国标方法(HP-PRRSV)完全一致。本研究成功建立了鉴别ASFV和HPPRRSV二重FQ-PCR检测方法,为ASFV和HP-PRRSV的鉴别诊断提供了快速、敏感、特异且能满足临床检测需求的检测方法。; 刘影闫若潜王东方杨海波赵美雪宋丹赵雪丽谢彩华王淑娟马震原柴茂王翠刘梅芬; 关键词：非洲猪瘟病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒

FQ-PCR检测乙型肝炎病毒DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项在乙肝诊断中的应用价值: 2024年; 目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)-DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项在乙肝诊断中的应用价值。方法选择2021年1月至2023年10月本院接收的82例疑似乙肝患者作为研究对象,均通过FQ-PCR实施HBV-DNA检测,同时予以时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项[乙肝病毒核心抗体(HBcAb)、乙肝病毒e抗体(HBeAb)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)],并分析检测结果。结果82例患者中,HBV-DNA阳性率为70.73%(58/82)。82例患者中,组合A(HBcAb+HBeAg+HBsAg阳性)占比91.46%(75/82),组合B(HBeAb+HBsAg阳性)占比63.41%(52/82),组合C(HBcAb+HBeAb+HBsAg阳性)占比37.80%(31/82),组合D(HBcAb+HBeAb+HBsAb阳性)占比6.10%(5/82),组合E(HBeAg+HBsAg阳性)占比64.63%(53/82)。组合A、组合B、组合C、组合D、组合E中HBV-DNA阳性率分别为53.33%(40/75)、7.69%(4/52)、29.03%(9/31)、40.00%(2/5)、5.66%(3/53),组合A中HBV-DNA阳性率均高于其他各项组合,差异具有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR检测HBV-DNA联合时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项诊断乙肝的准确度、灵敏度高于单独FQ-PCR检测HBV-DNA及时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在乙肝诊断中,FQ-PCR检测HBV-DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项各具优势,积极联合应用有助于进一步提升诊断效能。; 柯秋莉梁晓芳户丹; 关键词：荧光定量聚合酶链反应乙型肝炎病毒DNA 时间分辨免疫荧光法乙肝五项

传染性法氏囊病病毒和禽致病性大肠杆菌的二重探针实时荧光定量PCR方法的建立与应用: 2023年; 为建立用于传染性法氏囊病病毒(IBDV)和禽致病性大肠杆菌混合感染快速鉴别检测的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,研究分别根据IBDV VP2基因和大肠杆菌UidA基因设计合成特异性引物和探针,通过普通PCR方法扩增目的基因片段并克隆至pGM-T载体,构建重组质粒pGM-T/VP2和pGM-T/UidA作为标准品,通过正交试验确定引物和探针的最佳浓度,分别建立基于VP2和UidA基因的标准扩增曲线,并进一步验证其特异性、灵敏性、重复性,建立的方法应用于人工感染样本和临床样本的检测,并与常规PCR方法进行比较。结果显示:VP2和UidA基因的最佳上、下游引物浓度均为0.30μmol/L,VP2和UidA基因的探针浓度分别为0.35μmol/L和0.25μmol/L;VP2和UidA基因扩增的线性范围均为10^(3)~10^(7)拷贝/μL,相关系数R2≥0.99,灵敏度均为100拷贝/μL;两者组间及组内变异系数均小于2%;人工感染样品与临床样品的检测结果与普通PCR方法一致。研究表明,建立的二重探针FQ-PCR方法为同时检测IBDV和禽致病性大肠杆菌提供了快速、敏感、特异且能满足临床样本需求的检测方法。; 陈金南陈睿李尚泉李静玲陈容慧农芳婷王威威李宜海王林果韦平何秀苗; 关键词：IBDV 禽致病性大肠杆菌

猪急性腹泻综合征冠状病毒FQ-PCR检测方法: 本发明公开了猪急性腹泻综合征冠状病毒FQ‑PCR检测方法，属于猪综合冠状病毒检测技术领域，FQ‑PCR检测方法为病毒RNA提取、标准品的制备、荧光定量PCR反应条件优化、获得最佳qPCR反应条件，荧光定量标准曲线建立、敏...; 蔡杰许芳方桂军刘明如张吉张金超

猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒和猪急性腹泻综合征冠状病毒三重FQ-PCR检测方法: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒和猪急性腹泻综合征冠状病毒三重FQ‑PCR检测方法。本发明提供用于猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒、猪急性腹泻综合征冠状病毒检测的特异性引物和探针，并建立...; 闫若潜班付国刘影王东方谢彩华杨海波郭育培王淑娟马震原赵雪丽王华俊王翠柴茂刘梅芬朱前磊申水莹唐攀雷从从杨鹏霞刘先敏

分析FQ-PCR技术应用于检测结核杆菌的具体价值分析: 2022年; 研究实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR技术)在结核杆菌检测中的应用价值。方法选取本院2021年3月~2021年12月管理的46名疑似结核病患者作为研究对象,对46名患者均采取痰液检查、FQ-PCR检测两种方式,检测患者痰液内是否有结核杆菌;并比较两种检测方式的检测出率。结果采用FQ-PCR技术检测结核杆菌,检出率明显高于痰液检查;采用FQ-PCR技术检测结核杆菌,敏感性、特异性、准确性亦高于痰液检查,而误诊率、漏诊率则低于痰液检测。结论采用FQ-PCR技术进行结核杆菌检测,可以有效提升检出率,并且提高检测质量。因此,在结核杆菌检测中,FQ-PCR技术值得推广应用。; 王振霞; 关键词：FQ-PCR技术结核杆菌检测

FQ-PCR联合ELISA在乙型肝炎检测中的应用价值被引量：1: 2022年; 目的探析实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)联合酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙型肝炎检测中的临床价值。方法180例乙型肝炎患者,根据检测方法不同分为对照1组(59例)、对照2组(59例)及观察组(62例)。对照1组行FQ-PCR检测,对照2组行ELISA检测,观察组行FQ-PCR+ELISA检测。对比三组检测结果。结果观察组诊断乙型肝炎的准确率为96.77%,对照1组诊断乙型肝炎的准确率为84.75%,对照2组诊断乙型肝炎的准确率为81.36%。观察组诊断乙型肝炎的准确率明显高于对照1组与对照2组,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照1组与对照2组诊断乙型肝炎的准确率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论相对于单一检测手段,FQ-PCR联合ELISA在乙型肝炎检测时诊断准确率更高,可为临床治疗提供准确依据,具有临床应用价值。; 林爽; 关键词：酶联免疫吸附试验乙型肝炎

FQ-PCR检测HBV-DNA与ELISA检测乙肝五项指标在诊断乙型肝炎中的应用价值被引量：1: 2022年; 目的:分析在对乙型肝炎进行诊断时,分别应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝五项指标与荧光定量聚合酶联反应(FQ-PCR)检测乙肝病毒基因(HBV-DNA)的应用价值。方法:选取本医院2019年3月至2020年9月送检的乙型肝炎患者标本70例。全部患者分别采用ELISA检测乙肝五项指标、采用FQ-PCR检测HBVDNA,观察分析检测结果。结果:HBV-DNA检测结果发现,全部70例患者标本中,23例患者标本为HBVDNA阴性,47例为HBV-DNA阳性。乙肝五项指标检测结果显示,全部70例乙型肝炎患者标本中,3例患者为HBeAb、HBeAg、HBsAb、HBsAg阴性,2例患者为HBeAb、HBsAg阳性,3例患者为HBeAg、HBsAg阳性,3例患者为HBcAb、HBeAb、HBsAb阳性,23例患者为HBcAb、HBeAb、HBsAg阳性,36例患者为HBcAb、HBeAg、HBsAg阳性。结论:在对乙型肝炎患者进行诊断时,应用ELISA检测乙肝五项指标、应用FQ-PCR检测HBV-DNA均具有自身的特点。前者能对患者有无乙肝病毒感染进行准确判断,后者则能对病毒复制和病毒感染进行准确判断,从而来对病情进行确定。; 任淑增任淑桃牟彪; 关键词：乙型肝炎乙肝五项指标乙肝病毒基因

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