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马晓骊: 作品数：22 被引量：34H指数：3; 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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在毕赤酵母中表达的重组人血管内皮生长因子(rhVEGF_(121))为氨基端4个氨基酸缺失的异构体被引量：1: 2004年; 为获得重组人血管内皮生长因子 ,采用重叠PCR扩增出含Kozak顺序、α因子前导肽和hVEGF12 1的融合基因 ,经DNA测序无误后 ,插入Pichiapastoris酵母载体 ,并体外构建 4拷贝表达单元质粒pAO81 5 4KαVEGF12 1。表达载体转化酵母宿主菌GS1 1 5 ,筛选出高效表达hVEGF的转化子。摇瓶培养并 1 %甲醇诱导 80h的VEGF分泌性表达量可达 30mg L。表达产物经S Sepharose离子交换层析纯化后测活表明表达产物二聚体具有良好生物活性。SDS PAGE分析、Western印迹表明表达产物具有适宜的分子量和抗原性。VEGF蛋白经氨基端氨基酸测序证实纯化后的不同糖化程度产物为同一蛋白质 ,但均为氨基端缺失了 4个氨基酸的全长为 1 1 7个氨基酸的VEGF。; 陈工马晓骊陈虹王欣黄秉仁; 关键词：毕赤酵母氨基酸

重组人EGF对培养的角膜缘上皮细胞增殖的影响被引量：4: 1999年; 本实验采用重组人ＥＧＦ作用于体外培养原代生长的角膜织上皮细胞，观察重组人ＥＧＦ对细胞生长的影响，记录细胞生长曲线、集落形成率，并用ＭＴＴ法测定细胞增殖状况。结果表明：在合适的ＥＧＦ浓度作用下，细胞有丝分裂增强，细胞生长明显加快。在各浓度以１０ｎｇ／ｍＬ组对细胞作用最为明显。; 郭武黄秉仁张移马晓骊宋宗禄; 关键词：表皮生长因子角膜缘上皮细胞 RHEGF 角膜移植

一种低糖化突变体干扰素-λ1、其表达、纯化方法及其应用: 本发明公开了一种低糖化突变体干扰素-λ1(IFN-λ1-Nm)及其表达、纯化方法。该低糖化突变体干扰素-λ1是将IFN-λ1成熟肽序列中N46位的Asn置换为Gln后得到的蛋白质。本发明实现了阻断毕赤酵母对IFN-λ1的...; 陈虹黄秉仁惠希武谢云飞陈等马晓骊王欣; 文献传递

胰岛素样生长因子结合蛋白-3与甲状腺激素受体α1的相互作用及其对甲状腺激素应答性基因转录的调节被引量：1: 2011年; 目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)与甲状腺激素受体α1(TRα1)之间的相互作用,及其对甲状腺激素应答性基因转录作用的调节。方法采用谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验检测IGFBP-3与TRα1之间的相互作用;激光共聚焦显微镜观察两种蛋白在细胞中的分布;采用双萤光素酶实验检测过表达IGFBP-3对甲状腺素T3激活的生长激素启动子的影响。结果谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验结果证明IGFBP-3与TRα1在体内和体外都可以相互作用,激光共聚焦显微镜观察IGFBP-3和TRα1可以共定位于HEK-293细胞的细胞核。通过双萤光素酶实验检测到过表达IGFBP-3可以抑制甲状腺激素对生长激素启动子的激活作用(P<0.01)。结论 IGFBP-3通过与TRα1相互作用抑制甲状腺激素应答性基因的转录,为IG-FBP-3在核内发挥胰岛素样生长因子非依赖的作用提供了新的实验依据。; 裘佳马晓骊王欣陈虹黄秉仁; 关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白-3 三碘甲状腺原氨酸

IFN-λ1的特异受体IFN-λR1与TRAF6相互作用的探究: 目的:干扰素-λ1(interferon-lambdal,IFN-λ1)是2003年发现的Ⅲ型干扰素的成员,其具有抗肿瘤增殖、抗病毒感染和免疫调节的功能。IFN-λ1通过IFN-λR1与IL-10R2激活与Ⅰ型干扰素相同...; 杨霞赵乔佳杰张俊文田硕马晓骊陈虹黄秉仁; 关键词：TRAF6 蛋白相互作用; 文献传递

YAF2靶向cyclinD1表达促进肿瘤细胞增殖被引量：2: 2018年; 目的研究YY1相关因子2(YAF2)在肿瘤细胞中上调细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达的分子机制以及对肿瘤细胞增殖的影响。方法在肿瘤细胞中过表达和敲低YAF2,用Western blot和实时荧光定量PCR实验检测YAF2和cyclin D1的表达;利用双荧光素酶报告基因实验探究YAF2对cyclin D1启动子活性的影响;流式细胞计量术分析YAF2对细胞周期的影响与cyclin D1表达的关系;平板克隆形成实验检测YAF2和cyclin D1不同表达水平对细胞增殖的影响。结果 YAF2上调cyclin D1的mRNA(P<0.05)和蛋白水平;YAF2激活cyclin D1的启动子(P<0.05);敲低YAF2通过调节cyclin D1使G_0/G_1期细胞比例增加(P<0.0001),S期细胞比例减少(P<0.002);YAF2通过靶向cyclin D1促进细胞克隆形成(P<0.05)。结论在肿瘤细胞中,YAF2激活cyclin D1表达,促进肿瘤细胞周期进展和增殖。; 侯丛丛马晓骊陈虹黄秉仁陈等; 关键词：细胞周期蛋白D1 肿瘤细胞增殖

含腺病毒E4orf4蛋白的靶向性抗肿瘤融合蛋白: 本发明包括重组人表皮生长因子-腺病毒E4orf4融合蛋白、编码这种融合蛋白的融合基因、含有该融合基因的表达载体、利用甲基营养型酵母进行分泌性表达这种重组融合蛋白的方法及含有该蛋白的药物组合物及其治疗用途。; 陈虹黄秉仁王欣马晓骊; 文献传递

甲基营养型酵母系统表达的重组人表皮生长因子的纯化及其性质被引量：18: 2001年; 目的获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow（ high sub）柱、 Q-sepharose High Performance柱、 Superdex 30柱纯化后进行生物学性质检测。结果纯化后的蛋白产物纯度达 98％，是无热源、无内毒素、无甲基营养型酵母染色体 DNA污染的，有正确的分子量、等电点、氨基末端氨基酸顺序、肽图、紫外光谱、及生物活性性质的重组蛋白。结论纯化蛋白符合动物试验和临床试验的要求，为制备多种人表皮生长因子制剂进行动物实验和临床试验打下了基础。; 黄秉仁蔡良婉王欣马雪梅马晓骊李旌军李红卓韦忠明梁青郑华军唐琪浩唐申秀廖洪涛向绪传; 关键词：重组人表皮生长因子纯化生物活性

PEG化重组人IFN-λ1、其制备方法和用途: 本发明提供了一种PEG化重组人IFN‑λ1、其制备方法和用途。具体来说，本发明实现了对重组人IFN‑λ1的PEG定点修饰，本发明还提供了由此获得的PEG化重组人IFN‑λ1在制备治疗慢性乙型肝炎或肝癌的药物中的用途。根据...; 陈虹黄秉仁田硕惠希武陈等马晓骊王欣; 文献传递

HRSP12慢病毒表达载体的构建及对宫颈癌HeLa细胞凋亡及增殖的影响: 2014年; 目的构建热反应蛋白12(heat-responsive protein 12,HRSP12)慢病毒表达载体pWPI-HRSP12,包装慢病毒颗粒并感染宫颈癌细胞HeLa,分析过表达的HRSP12对HeLa细胞凋亡和增殖的影响。方法用反转录PCR扩增HRSP12全长编码顺序,构建慢病毒表达载体,利用人胚肾细胞HEK293T包装重组的慢病毒颗粒,感染HeLa细胞,用蛋白免疫印迹法检测剪切的半胱氨酸/天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)并用MTS比色法检测HeLa细胞增殖的情况。结果编码全长HRSP12的cDNA片段为414bp,克隆至pWPI-linker载体成功构建了慢病毒表达载体pWPI-HRSP12,包装的慢病毒颗粒能够高效感染HeLa细胞,在细胞内表达Flag-HRSP12融合蛋白。HRSP12的过表达能够引起HeLa细胞caspase-3的剪切体增多,能够抑制HeLa细胞的增殖。结论成功构建了慢病毒表达载体pWPI-HRSP12,初步结果表明,HRSP12可能具有诱导HeLa细胞凋亡、抑制细胞增殖的活性,为进一步研究HRSP12的生物学功能奠定了基础。; 谭宽张璇马晓骊黄秉仁陈虹陈等; 关键词：慢病毒载体细胞凋亡

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