欧树安
- 作品数：18 被引量：82H指数：5
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- P53和Bcl-2家族蛋白在胰腺癌中的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,Bcl-xS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n=18)和P53阳性表达组(第2组,n=17);Western blot检测两组PC中P53,Bcl-2,Bax,Bcl-xL和Bcl-xS蛋白表达,TUNEL法检测第1组中凋亡指数(AI).结果:Bcl-2蛋白在P53阳性PC表达上调,而在P53阴性PC表达下调(P=0.047);Bax和Bcl-xL蛋白在两组PC中表达都明显上调(P=0.274,0.334);Bcl-xS在P53阳性表达PC明显下调,在P53阴性表达组明显上调(P=0.01);在P53阴性和阳性表达PC,AI分别为12.1±2.47和9.1±1.48(P=0.023);Bcl-2家族各成员表达与AI无相关性,而Bcl-2/Bax比率与AI有明显的相关性(P<0.01).结论:Bcl-2是依赖P53调节的抗凋亡蛋白,Bcl-xS是依赖P53调节的促凋亡蛋白,而P53主要通过调节Bcl-2/Bax比率发挥凋亡调节作用.
- 吴幸崔海宁明松林王正文欧树安陈兴超余壮明
- 关键词：P53BCL-XL蛋白免疫印迹法原位缺口末端标记法
- 腹腔不同器官异胚源恶性肿瘤并存一例报告
- 1997年
- 欧树安
- 关键词：腹腔
- PUMA在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡过程中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC-1细胞生长的作用机制。方法用脂质体转染法将p53正向凋亡调控因子(PUMA)反义核酸(反义PUMA cDNA)的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1-导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度1、5、10和15μmol/ml的吉西他滨中作用72 h。RT-PCR和Western blotting检测不同组细胞经吉西他滨作用72 h后的PUMA表达;MTT检测细胞生长抑制,流式细胞仪(FCM)、Hoechst 33258荧光染色法和TUNEL法检测细胞凋亡。结果吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后,受吉西他滨作用的细胞出现PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖。结论吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制其生长,其诱导凋亡与上调PUMA有关。
- 欧树安张俊
- 关键词：胰腺肿瘤吉西他滨细胞凋亡
- 靶向Slug基因腺相关病毒载体的构建及其抑制视网膜母细胞瘤细胞生长的体外研究被引量：3
- 2010年
- 目的构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体。方法首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRI和SalI双酶切后回收PCR产物。酶切pSNAV2.0-LacZ-α载体质粒,并与上述产物进行连接。转化感受态大肠杆菌DH5α,得到重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测序对其进行鉴定。建立载体细胞株BHK/Slug-siRNA,大规模制备rAAV2-EGFP-Slug-siRNA并对其纯化、鉴定和滴度测定。将体外培养的视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)细胞转染rAAV-EGFP-Slug-siRNA和pSNAV2.0-EGFP空载体。鸡胚绒毛尿囊膜实验检测血管生成,MTT比色法检测细胞存活率,建立鸡胚绒毛尿囊移植瘤。结果携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确。将构建成功的载体质粒与重组Ⅰ型单纯疱疹病毒HSV1-rc/UL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出重组腺相关病毒rAAV2-EGFP-Slug-siRNA,经检测目的片段插入成功,滴度为90.21×109puf。Slug-siRNA有效抑制RB细胞内Slug表达后,肿瘤血管密度明显降低,血管生成被抑制,细胞存活率明显降低。实体瘤血管生成和生长受到抑制。结论成功制备出高滴度的携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体。干扰Slug可抑制肿瘤血管生成,抑制RB细胞的生长增殖。
- 王鲜王旭欧树安
- 关键词：SLUG基因腺相关病毒视网膜母细胞瘤
- 小儿急性肠套叠的治疗进展被引量：4
- 2002年
- 小儿急性肠套叠是小儿外科急腹症中最常见的病因之一,国内外开展了多种治疗方法,本文通过文献回顾,将有关治疗方法进展综述如下.
- 欧树安
- 关键词：急性肠套叠冲洗法结肠镜检查腹腔镜检查外科手术
- 生精胶囊治疗男性不育症45例临床观察被引量：4
- 2008年
- 目的探讨生精胶囊治疗男性不育的临床疗效,为临床采用中医中药治疗男性不育症提供一种有效方法。方法将符合纳入病例标准的45例患者用生精胶囊进行治疗,每次1.6g,1日3次,90d为1疗程。观察治疗前后临床症状、精液质量指标(活力、活动率、密度、畸形等)的变化。结果通过治疗,临床治愈率及总有效率明显提高,疗效满意。结论生精胶囊治疗男性不育症疗效明显,无不良反应;值得临床推广应用。
- 谢送红欧树安
- 关键词：生精胶囊男性不育
- 靶向Slug基因的腺相关腺病毒载体的构建与鉴定
- 2011年
- 目的:构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体.方法:首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切回收的PCR产物;酶切pSNAV2.0-lacz-α载体质粒,并与上述产物进行连接;转化感受态大肠杆菌DH5α,得到重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测序对其进行鉴定.建立载体细胞株BHK/Slug-siRNA,大规模制备rAAV2-EGFP-Slug-siRAN并对其纯化、鉴定和滴度测定.结果:携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确.将构建成功的载体质粒与重组Ⅰ型单纯疱疹病毒HSV1-rc/?UL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出重组腺相关病毒rAAV2-EGFP-Slug-siRNA,经检测目的片段插入成功,滴度为9.23×1010puf.结论:成功制备出高滴度的携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体.
- 严明总张克君王齐全欧树安
- 关键词：SLUG基因小干扰RNA
- Slug-siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌的抑制作用被引量：4
- 2009年
- 目的:研究携带Slug-siRNA的rAAV对裸鼠体内胰腺癌的作用.方法:建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,2wk后随机将建模成功的裸鼠分为3组,每组6只.构建携带Slug-siRNA的rAAV载体,采用瘤体内多点注射的方法,阴性对照组裸鼠按1×109puf(50μL)标准注射rAAV-EGFP,空白对照组裸鼠注射等量生理盐水,实验组裸鼠按1×109puf(50μL)标准注射rAAV2-EGFP-slug-siRNA,只注射1次.观察裸鼠的一般情况,摄食,活动能力,每周用电子天平秤体质量,绘制裸鼠生长曲线.治疗6wk后二氧化碳吸入法处死裸鼠,切取肿瘤称质量;免疫组织化学SP法检测slug蛋白的表达,TUNEL检测皮下移植瘤细胞凋亡,透射电镜检测细胞超微结构.结果:3组裸鼠分别接受不同的处理后,在开始的2wk皮下移植瘤的生长无明显差别,2wk以后,实验组裸鼠皮下移植瘤的体积增长明显滞后于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗6wk后,实验组裸鼠皮下移植瘤的质量明显轻于阴性对照组和空白对照组差异有统计学意义(3.26±0.48gvs7.56±1.25g,7.50±1.23g,均P<0.05).实验组裸鼠皮下移植瘤的AI值明显高于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(0.27±0.06vs0.024±0.01,0.025±0.01,均P<0.05);实验组的抑瘤率明显高于阴性对照组,差异有统计学差异(71.4%vs0.04%,P<0.01).透射电镜下,实验组肿瘤细胞可见细胞器结构模糊,核固缩,染色质边集等现象.免疫组织化学检测示实验组Slug表达明显减少.结论:Slug基因被有效沉默,Slug基因沉默后促进细胞凋亡,抑制胰腺癌实体瘤增殖和生长.
- 欧树安张克君严明总王齐全
- 关键词：胰腺癌基因治疗免疫组织化学
- 山苦茶的镇痛作用被引量：36
- 2003年
- 华运群欧树安
- 关键词：山苦茶镇痛作用中药药理
- 靶向抑制Slug基因表达对BxPC-3细胞凋亡和对5-FU化疗敏感性影响的实验研究
- 2010年
- 目的:探讨siRNA干扰Slug基因表达对BxPC-3细胞增殖、凋亡和对5-FU化疗敏感性的影响。方法:用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGen-esil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入胰腺癌BxPC-3细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的BxPC-3阳性克隆细胞和未转染载体的BxPC-3细胞分别暴露于系列浓度(0.01～100μmol/L)的5-FU72h。RT-PCR和蛋白质印迹法检测不同组细胞经5-FU作用72h后的Slug表达;MTT法测定各组细胞生存率并计算IC50,Hoechst33258和PI双染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡。结果:实验组细胞内Slug基因被有效沉默;BxPC-3、Bx-PC-3/pSlug-siRNA和BxPC-3/pNeg-siRNA细胞的5-FUIC50分别为(11.0±2.1)、(1.5±0.4)和(9.7±1.3)μmol/L(P<0.05).BxPC-3/pSlug-siRNA细胞对5-FU作用的敏感性增加了7.33倍。5-FU以剂量依赖方式诱导BxPC-3细胞凋亡,但对BxPC-3/pSlug-siRNA细胞所诱导的凋亡比BxPC-3和BxPC-3/pNeg-siRNA更明显。结论:靶向抑制Slug基因表达促进胰腺癌BxPC-3细胞凋亡,并增强BxPC-3对5-FU的化疗敏感性。
- 张克君曹红诗欧树安王齐全魏小斌
- 关键词：氟尿嘧啶
