王海萍
- 作品数：23 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 使ACC-α基因启动子PⅢ失活的物质及其应用
- 本发明公开了使ACC-α基因启动子PⅢ失活的物质在生产产低脂奶的奶牛中的应用。本发明首先保护一种蛋白组，由TALE蛋白甲-Ⅰ和TALE蛋白甲-Ⅱ组成；所述TALE蛋白甲-Ⅰ包括序列表的序列14自N末端第180-791位氨...
- 戴蕴平丁方荣王本利郑敏李松王海萍李京李玲王美丽
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- 一种定点整合外源基因的方法
- 本发明公开了一种定点整合外源基因的方法。本发明公开了一种定点整合外源基因到牛β‑酪蛋白基因的第二外显子的方法，包括如下步骤：使TALE蛋白‑Ⅰ和TALE蛋白‑Ⅱ在离体的牛细胞中表达，得到第二外显子靶序列发生突变的细胞；同...
- 戴蕴平王本利丁方荣李松王海萍郑敏李京李玲
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- 一种Y染色体标记方法及其应用
- 本发明公开了一种Y染色体标记方法及其应用。本发明公开一种动物Y染色体标记方法，是利用TALEN方法对离体的动物体细胞的Y染色体进行特异性标记。采用本发明公开的方法，可以实现对动物性别的方便、简单、高效、安全、准确的早期鉴...
- 戴蕴平孙照霖王明丁方荣王海萍李玲
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- 高效表达人乳铁蛋白等药用保健蛋白的奶牛乳腺生物反应器
- 李宁戴蕴平汤波龚国春张磊连正兴王莉莉王海萍刘颖孙秀柱樊宝良赵志辉郑敏李荣谢媛王美丽刘兆良赵春江于政权于舒洋许宏涛杨鹏华王建武赵永辉丁方荣李燕李京胡晓湘孟庆勇费菁朱化彬雷臣
- 动物乳腺生物反应器是一种利用动物转基因技术在乳腺细胞中特异高效表达多肽药物、疫苗、抗体和营养等蛋白的技术，具有效率高，成本低，表达的重组蛋白具有天然生物活性等特点，已经成为目前研究和应用最为广泛的一类生物反应器。人乳铁蛋...
- 关键词：
- 关键词：人乳铁蛋白
- 一种Y染色体修饰方法及其应用
- 本发明公开了一种Y染色体修饰方法及其应用。本发明公开一种动物Y染色体修饰方法，是利用TALEN方法对离体的动物体细胞的Y染色体进行特异性的自杀元件修饰。本发明为选择性培育特定性别的动物、提高育种效率奠定基础。
- 戴蕴平孙照霖丁方荣王海萍李京李玲
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- 低氧对牛体细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 本研究通过比较常氧(20%)和低氧(5%)环境下培养牛体细胞的生长效果,进而探讨低氧对牛体细胞体外增殖的影响。选用牛的3种常用核移植供体细胞(胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞、卵丘颗粒细胞)分别在常氧和低氧2种培养环境下进行连续传代培养和细胞克隆培养,并对其倍增水平和细胞克隆形成效率作比较分析。结果显示,5%的低氧环境对这3种细胞的体外增殖均有促进效果,而且各细胞的增殖水平(50.61±2.47、16.35±0.43、43.38±0.84)均显著高于常氧组(27.42±0.23、12.14±0.83、32.76±1.53,P<0.01)。以500个·皿-1(直径100mm)的细胞浓度接种培养的情况下,低氧培养的胎儿输卵管上皮细胞的克隆形成效率((53.05±4.62)%)显著高于常氧组((36.68±5.68)%)(P<0.01),而低氧组胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞获得的细胞克隆数只是略多于常氧组,差异并不显著(P>0.05)。当以1个.孔-1的细胞浓度接种于96孔板培养时,低氧组各类细胞的单细胞克隆形成效率((21.60±2.37)%、(22.29±5.42)%、(27.92±3.69)%)显著高于常氧组((12.01±1.42)%、(7.92±2.86)%、(10.49±3.07)%)(P<0.01或P<0.05)。将体外培养条件的常氧含量(20%)调减至更接近体内生理状况的低氧含量(5%)可以延长牛体细胞增殖寿命和提高单细胞克隆形成效率,对细胞生长有很好的促进作用。
- 李松丁方荣王海萍王莉莉李京郑敏王美利王超戴蕴平朱士恩
- 关键词：低氧牛体细胞体外增殖
- 一种培育生产低致敏性牛奶的牛的方法及其应用
- 本发明公开了一种培育生产低致敏性牛奶的牛的方法及其应用。该方法包括如下步骤：向牛成纤维细胞导入锌指核酸酶载体pZFN，得到基因型为双等位基因突变型的供体细胞；双等位基因突变型为牛的两条同源染色体上的β‑LG基因的核苷酸分...
- 戴蕴平孙照霖王明丁方荣王海萍李玲
- 无血清培养基IVD101和G1/G2在牛体细胞核移植中的应用研究被引量：3
- 2008年
- 通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基(IVD101、G1/G2)条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1/G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa+5%FBS作为对照组。无血清培养基IVD101和G1/G2的囊胚发育率与对照组无显著性差异(41.2%±9.1%、42.2%±10.8%,48.0%±9.2%,P>0.05)。通过囊胚差异染色和冷冻/解冻胚胎存活率分析胚胎质量,发现无血清培养基ICM/Total略低于对照组(31.8%±10.5%、29.5%±11.9%vs.33.0%±14.8%),但无显著性差异(P>0.05);3个组别的囊胚经程序化冷冻/解冻后无血清培养基的存活率(IVD101、G1/G2)略高于对照组,但差异不显著(84.8%、80.4%vs.77.3%,P>0.05)。结果证明无血清培养基(IVD101、G1/G2)可以支持体细胞核移植重构胚的体外发育,且其对程序化冷冻的耐受性与添加血清组(CR1aa+5%FBS)相似。
- 李荣刘颖赵兴波王莉莉王海萍丁方荣李京李松高凤磊戴蕴平
- 关键词：无血清培养基体细胞核移植胚胎冷冻
- 一种利用第三代碱基编辑器制备精准BLG基因敲除牛的方法
- 本发明公开了一种利用第三代碱基编辑器制备精准BLG基因敲除牛的方法。本发明保护基因敲除奶牛的制备方法，包括如下步骤：将出发奶牛基因组中BLG基因自5’端第277位碱基由C突变为T；所述BLG基因为SEQ ID No.1所...
- 戴蕴平王明孙照霖丁方荣王海萍李玲
- 文献传递
- 一种人α-乳清蛋白基因定点整合转基因奶牛的制备方法
- 本发明公开了一种人α‑乳清蛋白基因定点整合转基因奶牛的制备方法。本发明的发明人利用牛α‑酪蛋白高表达的优点，将人乳清蛋白基因替换到此基因，实现外源基因安全、持续、特异高表达，同时解决牛奶中牛α‑酪蛋白的致敏问题。本发明首...
- 王明戴蕴平孙照霖丁方荣王海萍李玲
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