樊欣迎
- 作品数：10 被引量：26H指数：2
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：天津市科技发展战略研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 滇重楼活性物质的分离鉴定与体外药理作用的研究被引量：15
- 2008年
- 研究滇重楼中甾体皂苷类化合物的体外抗肿瘤作用。采用硅胶柱层析、凝胶色谱、制备高效液相色谱(P-HPLC)及高效液相色谱(HPLC)等分离手段,对滇重楼各溶剂萃取部分进行了分离纯化,得到了7个甾体化合物。本实验在前期实验证明滇重楼乙酸乙酯和正丁醇提取物具有一定的抗肿瘤作用的基础上,以LA795小鼠肺腺癌细胞为研究对象,进一步考察了分离鉴定的单体化合物的抗肿瘤作用。结果表明,单体化合物1～7均表现出对LA795细胞生长的抑制作用;化合物1、2对LA795细胞具有明确的抑制作用,化合物3～7对LA795细胞具有较强的细胞毒活性。讨论了细胞毒活性与化合物结构之间的构效关系,即皂苷元C-3位连接糖链时,糖的数目及种类、连接方式及组成类型对其生物活性都起着至关重要的作用。
- 刘翊杜连祥高文远王旭高伟樊欣迎
- 关键词：滇重楼甾体皂苷细胞毒活性
- 诱导蜂房哈夫尼菌产L-赖氨酸脱羧酶条件的研究被引量：1
- 2009年
- 用响应面法对蜂房哈夫尼茵(Hafina alvei)L-赖氨酸脱羧酶产酶诱导条件进行优化。首先通过单因素实验对产酶体系的pH、震荡培养时间、静置培养时间、诱导物添加量和VB6添加量进行优化。在此基础上,用部分因子重复试验筛选出对酶活影响显著的3个因素(静置培养时间,诱导物添加量,VB6添加量),再通过Box-behnken实验对这三个因素进行优化,得出最优值。最终得到产酶最佳诱导条件为:震荡培养阶段培养基pH6.5,静置培养阶段pH5.5;摇床震荡培养11h后静置培养7.5h,诱导物L-赖氨酸加入量为5.18g/L,维生素B6加入量为1.38g/L时酶活最高,达到71.2U/mL,为优化前(1.74U/mL)的41.8倍,在单因素的基础上提高了19%。
- 朱婧杜连祥路福平樊欣迎武薇
- 融合基因EGFRi-IL-24真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2010年
- 人工合成表皮生长因子受体干扰序列(epithelial growth factor receptor interference,EGFRi),应用重叠延伸PCR(Overlapping PCR)技术将其与白细胞介素-24(IL-24)连接,并在其间引入一段柔软短肽(Gly4Ser3)。进行序列分析后,将融合基因EGFRi-IL-24重组到表达质粒pPIC9k中,Sal I酶切线性化重组质粒EGFRi-IL-24/pPIC9k,电击转化毕赤酵母GS115,经G418抗性和PCR筛选得到阳性重组菌株。重组菌株用甲醇进行诱导表达后,通过SDS-PAGE和MTT法分析鉴定蛋白表达产物。结果证实EGFRi-IL-24在毕赤酵母中获得了分泌性表达的活性蛋白,为进一步研究其生物学功能及临床应用奠定了基础。
- 王建玲樊欣迎包乐媛杜连祥
- 关键词：毕赤酵母蛋白表达
- 表皮生长因子受体干扰序列与白细胞介素24融合蛋白的原核表达被引量：1
- 2009年
- 目的:在大肠杆菌中表达表皮生长因子受体干扰序列(EGFRi)与白细胞介素24(IL-24)的融合蛋白。方法:人工合成肿瘤细胞表面受体特异性结合位点EGFRi核苷酸序列,应用重叠延伸PCR技术将其与IL-24基因连接,其间引入一段柔软短肽编码基因;将融合基因克隆入pET-22b原核表达载体,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达条件进行优化;用His.Bind纯化试剂盒对表达产物进行纯化,SDS-PAGE进行鉴定。结果:酶切和测序结果证实EGFRi-IL-24融合基因的原核表达载体构建正确;在IPTG浓度为0.8mol/L、28℃诱导10h的条件下,可溶性融合蛋白表达量最高;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为22000;经纯化得到了均一的融合蛋白。结论:获得大肠杆菌表达的融合蛋白EGFRi-IL-2,可用于活性分析。
- 樊欣迎包乐媛朱婧刘翊杜连祥
- 关键词：白细胞介素24融合蛋白原核表达
- 融合蛋白EGFRi-IL-24的纯化及活性鉴定被引量：2
- 2009年
- 本研究的目的在于制备表皮生长因子受体干扰序列-白细胞介素24的融合蛋白(EGFRi-IL-24),并鉴定其抗肿瘤活性。利用pET-22b表达系统在大肠杆菌中表达重组融合蛋白EGFRi-IL-24,Ni-NTA亲和层析柱纯化表达产物。经检测表达的融合蛋白经纯化后纯度超过了90%,该融合蛋白对MCF-7细胞的体外抑制率最高达到72.1%。为进一步研究融合蛋白EGFRi-IL-24的生物学功能及临床应用奠定了基础。
- 樊欣迎包乐媛窦苓杜连祥路福平
- 关键词：肿瘤靶向治疗
- IL－24与EGF的融合基因原核载体的构建及其应用
- 本发明涉及一种IL－24与EGF的融合基因原核载体的构建及其应用，其中IL－24与EGF融合基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；IL－24与EGF融合基因原核表达载体，其中该融合基因具有如SEQ ID No.1...
- 路福平杜连祥樊欣迎包乐媛王春霞王建玲王贺
- 文献传递
- 响应面法优化赖氨酸脱羧酶产酶培养基被引量：2
- 2009年
- 目的:对蜂房哈夫尼菌产L-赖氨酸脱羧酶培养基进行优化。方法:采用响应面优化的方法。首先单因素实验得到最适培养基成分为:葡萄糖2%,酵母膏2%,MgSO40.03%,KH2PO40.01%,NaCl 0.3%,L-赖氨酸0.5%,维生素B60.1%,玉米浆4%,酶活达到180.85U/mL。在此基础上,用PB试验筛选出对酶活影响显著的3个因素(葡萄糖、酵母膏、玉米浆),再通过Box-behnken实验对这三个因素进行优化。结果:得到产酶最佳培养基为葡萄糖1.84%,酵母膏2.20%,玉米浆3.66%,MgSO40.03%,K2HPO40.01%,NaCl 0.3%,L-赖氨酸0.5%,维生素B60.1%。结论:响应面优化的方法使酶活达到203.14U/mL,比优化前的比酶活(7.03U/mL)提高28.9倍,在单因素的基础上提高了11.3%。
- 王建玲张建昌朱婧樊欣迎刘翊杜连祥
- 以β-半乳糖苷酶为报告基因的原核启动子检测体系构建被引量：3
- 2008年
- 目的:以β-半乳糖苷酶为报告基因构建原核启动子检测体系。方法:以由质粒pDL扩增获得的bgaB基因为报告基因,将其克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pBE2,构建成一个具有启动子活性检测功能的重组质粒pBEB。将组成型启动子P43和诱导型启动子Pspac克隆入pBEB,得到重组表达载体pBEBP43和pBEBPspac,转化至大肠杆菌和枯草芽孢杆菌。结果:两种不同类型的启动子均能在大肠杆菌BL21和枯草芽孢杆菌1A751中启动bgaB基因的表达。结论:成功构建具有较为广泛适用性的原核启动子检测体系。
- 陈坤黎明樊欣迎路福平
- 关键词：Β-半乳糖苷酶
- 新月弯孢霉对重楼皂苷发酵条件的优化被引量：1
- 2010年
- 目的:利用新月弯孢霉对重楼皂苷的转化条件进行优化。方法:采用新月弯孢霉(Curvularia lunata)ATCC3.4381,利用单因素实验对其发酵条件进行优化。采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对转化率有重要影响的4个因素(蔗糖、酵母膏、(NH4)2SO4和玉米浆的添加量),并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化。结果:最适的培养基条件为:即蔗糖浓度为7.847g/L;酵母膏的浓度为1.969g/L;硫酸铵的浓度为4.824g/L;玉米浆的浓度为11.81g/L。结论:优化后其转化能力得到了明显的提高,转化率为76.80%,并且与拟合值77.18%接近。
- 王建玲刘翊邹菁樊欣迎朱婧杜连祥
- 关键词：响应面法新月弯孢霉
- IL-24和EGF受体干扰序列融合基因的克隆、表达及活性研究
- IL-24(白细胞介素24)具有抑制肿瘤血管生成活性、刺激免疫系统应答和诱导肿瘤细胞凋亡的方式联合发挥抗肿瘤效应。大多数肿瘤细胞尤其是实体瘤细胞表面有大量EGFR(Epithelial Growth Factor Rec...
- 樊欣迎
- 关键词：白细胞介素24融合基因基因克隆PCR技术EGF受体
