朱婧
- 作品数:7 被引量:20H指数:2
- 供职机构:天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 表皮生长因子受体干扰序列与白细胞介素24融合蛋白的原核表达被引量:1
- 2009年
- 目的:在大肠杆菌中表达表皮生长因子受体干扰序列(EGFRi)与白细胞介素24(IL-24)的融合蛋白。方法:人工合成肿瘤细胞表面受体特异性结合位点EGFRi核苷酸序列,应用重叠延伸PCR技术将其与IL-24基因连接,其间引入一段柔软短肽编码基因;将融合基因克隆入pET-22b原核表达载体,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达条件进行优化;用His.Bind纯化试剂盒对表达产物进行纯化,SDS-PAGE进行鉴定。结果:酶切和测序结果证实EGFRi-IL-24融合基因的原核表达载体构建正确;在IPTG浓度为0.8mol/L、28℃诱导10h的条件下,可溶性融合蛋白表达量最高;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为22000;经纯化得到了均一的融合蛋白。结论:获得大肠杆菌表达的融合蛋白EGFRi-IL-2,可用于活性分析。
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- 关键词:白细胞介素24融合蛋白原核表达
- 蜂房哈夫尼菌产L-赖氨酸脱羧酶培养基优化
- 对蜂房哈夫尼茼(Hafnia alvei AS 1.1009)产L-赖氨酸脱羧酶培养基进行优化。分析了各种营养成分对酶活的影响,试验结果表明最适培养基成分为:葡萄糖2%,酵母膏2%,玉米浆4%,MgsO40.03%,KH...
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- 关键词:培养基优化
- 透明质酸补糖分批发酵工艺研究被引量:4
- 2008年
- 采用马链球菌(Streptococcus equi)在7L自动发酵罐中进行分批补加葡萄糖发酵生产透明质酸(HA)。结果表明:采用葡萄糖初始浓度为35g/L,分批补加葡萄糖,使其浓度控制在20g/L~25g/L,通气量固定1.5L/min,通过调节搅拌转速(170r/min~300r/min)使发酵中后期溶氧控制在10%,可使HA的产量达到5.6g/L,平均分子量达到1.78×106u,较分批发酵时HA产量提高90%,分子量提高46%。
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- 关键词:透明质酸分批补料发酵
- 微生物转化L-赖氨酸为尸胺的研究
- 尸胺(1,5-戊二胺)是赖氨酸脱羧的产物,已有技术可以将尸胺精炼后和己二酸共聚合成为具有实用性的尼龙-56,尼龙-56是一种耐高温的生物塑料。本课题以赖氨酸这种微生物代谢产物为原料,利用蜂房哈夫尼菌(Hafnia.alv...
- 朱婧
- 关键词:赖氨酸发酵条件微生物转化
- 文献传递
- 诱导蜂房哈夫尼菌产L-赖氨酸脱羧酶条件的研究被引量:1
- 2009年
- 用响应面法对蜂房哈夫尼茵(Hafina alvei)L-赖氨酸脱羧酶产酶诱导条件进行优化。首先通过单因素实验对产酶体系的pH、震荡培养时间、静置培养时间、诱导物添加量和VB6添加量进行优化。在此基础上,用部分因子重复试验筛选出对酶活影响显著的3个因素(静置培养时间,诱导物添加量,VB6添加量),再通过Box-behnken实验对这三个因素进行优化,得出最优值。最终得到产酶最佳诱导条件为:震荡培养阶段培养基pH6.5,静置培养阶段pH5.5;摇床震荡培养11h后静置培养7.5h,诱导物L-赖氨酸加入量为5.18g/L,维生素B6加入量为1.38g/L时酶活最高,达到71.2U/mL,为优化前(1.74U/mL)的41.8倍,在单因素的基础上提高了19%。
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- 新月弯孢霉对重楼皂苷发酵条件的优化被引量:1
- 2010年
- 目的:利用新月弯孢霉对重楼皂苷的转化条件进行优化。方法:采用新月弯孢霉(Curvularia lunata)ATCC3.4381,利用单因素实验对其发酵条件进行优化。采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对转化率有重要影响的4个因素(蔗糖、酵母膏、(NH4)2SO4和玉米浆的添加量),并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化。结果:最适的培养基条件为:即蔗糖浓度为7.847g/L;酵母膏的浓度为1.969g/L;硫酸铵的浓度为4.824g/L;玉米浆的浓度为11.81g/L。结论:优化后其转化能力得到了明显的提高,转化率为76.80%,并且与拟合值77.18%接近。
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- 关键词:响应面法新月弯孢霉
- 响应面法优化赖氨酸脱羧酶产酶培养基被引量:2
- 2009年
- 目的:对蜂房哈夫尼菌产L-赖氨酸脱羧酶培养基进行优化。方法:采用响应面优化的方法。首先单因素实验得到最适培养基成分为:葡萄糖2%,酵母膏2%,MgSO40.03%,KH2PO40.01%,NaCl 0.3%,L-赖氨酸0.5%,维生素B60.1%,玉米浆4%,酶活达到180.85U/mL。在此基础上,用PB试验筛选出对酶活影响显著的3个因素(葡萄糖、酵母膏、玉米浆),再通过Box-behnken实验对这三个因素进行优化。结果:得到产酶最佳培养基为葡萄糖1.84%,酵母膏2.20%,玉米浆3.66%,MgSO40.03%,K2HPO40.01%,NaCl 0.3%,L-赖氨酸0.5%,维生素B60.1%。结论:响应面优化的方法使酶活达到203.14U/mL,比优化前的比酶活(7.03U/mL)提高28.9倍,在单因素的基础上提高了11.3%。
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