李秀星
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：天津科技大学更多>>
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- 谷氨酰胺转胺酶基因在大肠杆菌中的表达条件优化
- 以提高重组菌E.coli BL21/pET-tg谷氨酰胺转胺酶表达量为目的，对诱导温度、诱导起始OD值、诱导时间、IPTG浓度和Amp浓度进行优化。结果表明低温诱导和较高起始OD值有助于目的蛋白表达，Amp浓度为50ug...
- 戚薇李秀星铁瑛
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶基因表达大肠杆菌
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2008年
- 以枯草芽孢杆菌DB104染色体DNA为模板,利用PCR技术扩增得到谷氨酰胺转胺酶基因tg,将其克隆至大肠杆菌质粒pET-22b(+)中,构建表达载体pET-tg,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌经IPTG(异丙基β-D-硫代半乳糖苷)诱导,SDS-PAGE电泳分析,结果表明谷氨酰胺转胺酶得到了表达,表达量占菌体总蛋白的12%。诱导菌体经裂解后的上清与酪蛋白反应,显示其具有交联蛋白质的活性。经荧光法测定,诱导5 h的菌体酶活为1 590 U/g(DCW,cell weight,细胞干重),是出发菌株30 U/g(DCW)的52倍。
- 李秀星戚薇王建玲
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶枯草芽孢杆菌大肠杆菌克隆
- 青霉素酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达被引量：3
- 2007年
- 以获得大量胞外青霉素酶为目的,将青霉素酶基因克隆至表达载体pWB980中,并转化到双蛋白酶缺陷的Bacillus subtilis DB104。重组菌在LB培养基中培养24h后,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量为28kDa,酶活力为339U/ml;通过筛选7种不同的发酵培养基发现4#培养基更利于青霉素酶的表达,最大酶活力为1580U/ml,较优化前提高了3.66倍,并对该重组菌进行了7L罐放大实验,结果显示在培养24h产酶达到高峰,酶活力为1255.8U/ml。
- 赵洪坤刘兴旺邱强李秀星杜连祥
- 关键词：青霉素酶异源表达枯草芽孢杆菌
- 枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及表达
- 本论文主要研究了谷氨酰胺转胺酶基因在大肠杆菌中的表达,并将该基因转入枯草芽孢杆菌中,实现了该酶的分泌表达。对大肠杆菌BL21／pET-tg的诱导表达条件进行了优化,对纯化后的重组蛋白的酶学性质作了初步研究,
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- 李秀星
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶克隆酶学性质
- 文献传递
