戴金风
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局“百人计划”更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 组织因子膜外区融合蛋白基因的表达及产物的分离纯化与活性分析被引量：7
- 2001年
- 为构建表达组织因子 (TF)膜外区的融合载体 ,制备组织因子膜外区 ,抽提人胎盘组织的总RNA,通过 RT- PCR法扩增出 TF的 c DNA克隆至 p UC1 8并测定全序列 .然后以此为模板 ,再次PCR扩增出 TF膜外区 (soluble TF,s TF) c DNA,并将其插入到谷胱甘肽巯基转移酶融合表达载体 p GEX4T- 1 ,构建了 tac启动子控制下的 GST- s TF融合蛋白的表达载体 .表达的融合蛋白经亲和层析、凝血酶切得到纯化的 s TF.表达产物经 ELISA验证 ,能特异性地与 TF抗体结合 .重新脂化后 ,该产物具有较大凝血活性 .以上说明采用融合蛋白表达系统可以大量制备组织因子膜外区 ,为研制国产重组凝血活酶试剂和研究 s TF的结构和功能创造条件 .
- 关明吕元倪赞明王云贵戴金风陈常庆
- 关键词：融合蛋白基因表达分离纯化活性跨膜糖蛋白
