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张训海: 作品数：89 被引量：332H指数：8; 供职机构：安徽科技学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省重点科研计划项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>

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Ⅰ群禽腺病毒通用型二温式PCR和VPCR方法的建立及初步应用: 2021年; 为建立快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-I)血清型通用PCR方法,根据FAdV-Ⅰ12个血清型基因保守区设计引物,建立了二温式PCR和VPCR方法。结果显示:本研究建立的FAdV-Ⅰ二温式PCR方法,在90℃~94℃变性3 s、70℃~74℃退火兼延伸8 s,循环35~40次时,最快可在15 min内完成扩增;对分属5个种的5个血清型毒株检测都呈阳性,对EDSV、NDV、沙门菌等12种禽常见病原核酸检测呈阴性;最低检测质粒拷贝数为13.9 copies/μL,最低检测病毒滴度为100.3 EID50/0.1 mL;对源于FAdV-4感染致死SPF鸡的心脏、肝脏、脾脏等14种样品核酸提取物检测均为阳性。建立的VPCR,在92℃变性0 s、70℃退火延伸0 s,40次循环时,可23 min完成,其最低检测质粒拷贝数亦为13.9 copies/μL;对150份采集自安徽省部分地区样品及送检病料的检测与分析显示,所建立的二温式PCR和VPCR总阳性检出均率为30.7%,其符合率为100%。本研究表明,所建立的通用型二温式PCR和VPCR方法,均可用于Ⅰ群FAdV的快速检测与鉴定。; 赵磊刘畅刘欣超王旋黄佳佳阮来田张训海; 关键词：通用型二温式PCR

抗NDVWF_(00)C株单克隆抗体的制备及其异同性与识别表位分析被引量：1: 2011年; 为分析不同禽源NDV毒株间囊膜蛋白抗原性的差异,作者以超滤纯化的鸡源NDV强毒WF00C株全病毒为免疫原制备NDV特异性单抗,并在其一般生物学特性研究和差异性比较的基础上,通过对其抗体可变区同源性比较及其基因家族中的归属性分析,进一步分析各株单抗的异同性;通过差异性作用位点区域氨基酸序列的分析与融合表达短肽反应性的验证,确定其差异表位关键性氨基酸位点。本研究中共鉴定筛选出了6株单抗:1B6、4B4、4E6、4E11、5H4和5H9,除4B4和5H4外,其余均具有血凝抑制(HI)活性和对WF00C株NDV的中和活性,但能够识别线性表位的1B6和4E11却对2株鸽源NDV无HI活性;单抗的异同性分析显示,1B6与4E11、4B4与5H4的抗体轻重链可变区基因家族来源均相同,1B6与4E11轻重链互补决定区氨基酸分别仅5个和1个氨基酸不同,而4B4与5H4则完全相同,4E6和5H9的基因来源和互补决定区氨基酸序列均差异较大;在NDV HN 14线性中和表位上的aa347位有6种氨基酸变化,鸽源毒株在此位点主要为甘氨酸(26/27),而aa349位有3种变化,其中谷氨酸是鸽源毒株的特有指征;1B6和4E11所识别的差异性氨基酸E347和D349同为该表位关键性氨基酸。本研究所获得的3组生物学特性不同的6株抗NDV单抗,可归属为不同质的4种单抗;NDV HN aa349为E是鸽源毒株的特有指征,同时该位点也是线性中和表位上又一新的关键性氨基酸位点。; 赵磊张训海王旋孙涛龚争鲍春晖; 关键词：新城疫病毒单克隆抗体表位

鸭源粪肠球菌与变形杆菌致病性混合感染的诊断与防控: 安徽淮南某樱桃谷肉种鸭场的鸭群，发生了脚垫肿胀、产蛋下降并有部分死亡、剖检以肝脾肿大等败血性病变为特征的久治不愈的疫病。通过病原分离与检测(分离细菌的形态特征、生化反应以及细菌16S rDNA序列的调取、测序与分析)、应...; 王旋张训海张亚静赵磊龚争仇珍珍张鹏; 关键词：粪肠球菌变形杆菌

鸡马立克氏病监测技术的研究及应用: 通过对商用CVI988疫苗细胞培养上清液浓缩与检测,鉴别出了其分泌性抗原成分,且琼扩滴度可达到1:4,而用该疫苗分别免疫SPF鸡和罗曼鸡后,在免疫后第3~8周内均未检测到特异性羽囊病毒沉淀抗原,但该羽囊浸提液经15~20...; 张训海; 关键词：马立克氏病 CVI988 HVT 琼脂扩散试验

泌乳期二花脸猪和大白猪部分激素和生长因子的比较被引量：2: 2003年; 动物泌乳受多种激素和因子的调节 ,除催乳激素 (PRL)外 ,还有生长激素 (GH)、胰岛素 (Insulin)、甲状腺素 (T3、T4)及胰岛素样生长因子 (IGF Ⅰ )等。通过对泌乳期二花脸猪和大白猪血浆GH、Insulin、T3、T4和IGF Ⅰ含量的比较 ,结果是大白猪 (LWS)血浆GH总体水平、基线水平、峰强度均高于二花脸猪 (EHS) ,分别高 1 9.84%、2 0 .5 4 %和 69.88% ,血浆Insulin、IGF Ⅰ均显著高于二花脸猪 (P <0 .0 5 ) ,分别高 5 0 .46%和 5 5 .45 % ,而二花脸猪血浆T3、T4显著高于大白猪 (P <0 .0 5 ) ,分别高 1 9.42 %和 1 7.89%。; 何孔泉周玉刚张训海; 关键词：泌乳期二花脸猪大白猪激素

鸡源NDV WF00C株F基因的测序与蛋白特性分析: 2009年; 用鸡源新城疫病毒凤阳分离株WF00C对9-10日龄SPF鸡胚的尿囊腔接种,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF00C病毒的F基因,获得了1条1.7kb的特异性条带。用PCR产物直接测序。测序结果表明,扩增片段大小为1782bp,含有1个1662bp的开放性阅读框,编码554个氨基酸。核苷酸同源性分析表明：WF00C株与国内外其他NDV F基因的同源性为84.8%-97.5%,其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为87.1%,说明WF00C与国内外的传统毒株有较大变异。与Taiwan95株和J株的同源性为94.1%和97.5%,说明WF00C与Taiwan95株和J株亲缘关系较近,具有较高的相似性。F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112Arg-Arg-Gln-Lys-Arg-Phe117,表明为NDV的强毒株。蛋白疏水性和抗原性分析表明与标准强毒株相比没有太大的变异。; 胡元庆路振香张训海金光明陈会良; 关键词：F基因病毒毒力同源性分析

蛋鸡群发生马立克氏病继发H9亚型禽流感的诊治被引量：13: 2008年; 马立克氏病是一种重要的免疫抑制病,严重影响养鸡业的健康发展。通过对一例发生马立克氏病继发H9亚型禽流感的蛋鸡群的症状进行分析、剖检变化及实验室诊断,提出了治疗和预防措施,为马立克氏病和H9亚型禽流感的防治提供参考。; 钟登科魏建超张训海路振香; 关键词：马立克氏病 H9亚型禽流感继发感染

鸡鸭鹅新城疫病毒毒力及生物学特性的研究被引量：2: 2016年; 为了测定鸡、鸭、鹅新城疫病毒的毒力强弱。测定其血凝价、血凝素热稳定性试验、血凝解脱试验、氯仿敏感性试验、耐酸性试验,并对3株病毒进行理化特性测定;测定其1日龄雏鸭脑内接种致病指数、6周龄鸭静脉接种致病指数和对13日龄非免疫鸭胚的半数感染量(EID_(50))。结果鸡、鸭、鹅新城疫病毒的血凝价依次为2~9、2~8、2~8;血凝素热稳定性指数分别为5、15、15 min;血凝均为快速解脱型;对氯仿敏感;对p H值3.0、p H值5.0均敏感;1日龄雏鸭脑内致病指数分别为0.59、0.84、1.04;6周龄静脉接种致病指数均为0;对13日龄鸭胚的半数感染量(EID_(50))分别为:10^(-5.31)/0.1 m L、10^(-6.5)/0.1 m L,10^(-7.79)/0.1 m L。表明鸡新城疫为中等偏弱毒力毒株,而鸭、鹅新城疫病毒均为中等毒力毒株。; 路振香张训海郭伟娜杨平徐义巧刘畅; 关键词：新城疫病毒生物学特性毒力测定

鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量：8: 2008年; 从安徽省某养鸭场送检疑似鸭传染性浆膜炎的发病鸭中分离到3株细菌,通过细菌形态、培养特怔、生化试验和血清学试验鉴定为1型鸭疫里氏杆菌,给健康鸭注射该分离株可复制出心包炎、肝周炎、气囊炎等典型病理变化并引起死亡。药敏试验结果表明,3株分离细菌对头孢曲松、复方新诺明高度敏感,对红霉素、四环素、氯霉素中度敏感,对庆大霉素、丁胺卡那、卡那霉素、新霉素、氨苄青霉素、青霉素、环丙沙星不敏感。本研究为该场鸭传染性浆膜炎的防治提供了参考。; 钟登科魏建超张训海路振香金光明王立克; 关键词：鸭疫里氏杆菌药敏试验

抗鸡NDV囊膜糖蛋白单抗的制备与抗原表位鉴定: 将鸡新城疫病毒(NDV)WFC株活毒以点眼途径首免BALB/c小鼠,采用超滤技术提纯其完整病毒粒子作为加强免疫原,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合,筛选鉴定出了2株单抗,分别命名为1B6和4E11...; 赵磊王旋龚争孙涛丁维民张训海; 文献传递

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