张扬 作品数:33 被引量:104 H指数:4 供职机构: 天津医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市卫生局科技基金 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 一般工业技术 更多>>
不同微应变环境对组织工程化周围神经移植体性能的影响 被引量:1 2015年 目的 探讨不同的微应变环境对组织工程化周围神经移植体性能的影响. 方法 自2013年3月-2014年5月,将用低渗联合冻干技术改良法制成的兔脱细胞神经支架与PKH26标记的兔原代SCs复合,给予0%、5%、10%和15%形变量的微应变刺激后,修复兔坐骨神经缺损模型(缺损长度1 cm),另设自体神经移植组和正常对照组.8周时取出支架行苏木精-伊红(HE)及甲苯胺蓝染色,观察支架内细胞分布及髓鞘计数;S-100、GFAP及NF-200免疫荧光染色并测A值.病理切片后观察远端吻合口PKH26荧光示踪情况. 结果 改良法制成的支架内部髓鞘及SCs均被完全去除,细胞外基质成分保留完整.植入体内的支架8周时除15%形变量组结构崩解外,0%、5%、10%组支架内部基底层和神经纤维结构完整,呈波浪状分布.通过IPP软件计数髓鞘数目,发现10%形变量组高于0%、5%组,低于自体神经移植组,差异有统计学意义(P<0.05).10%形变量组S-100及GFAP免疫荧光染色A值(分别为2208.45±72.07和2666.93±102.49)明显高于0%、5%和自体神经移植组,低于空白对照组(2788.09±85.55和3609.65±107.41);NF-200免疫荧光染色A值10%形变量组(1947.57±61.24)高于0%(912.52±44.96)和5%组(1644.55±58.53),低于自体神经移植组(2329.35±86.81)和对照组(4545.66±103.12),差异均有统计学意义(P<0.05).0%、5%及10%形变量组8周时远端吻合口均可见PKH26红色荧光,15%组呈阴性. 结论 适度的(10%形变量)牵张应力微应变环境可以有效促进SCs的增殖及组织工程化周围神经的功能恢复。 李艳军 孙晓雷 马剑雄 张扬 赵斌 李爽 吕建伟 马信龙关键词:周围神经 许旺细胞 兔坐骨神经损伤后内源性生长因子含量的变化及意义 被引量:4 2014年 目的探讨兔坐骨神经损伤后内源性bFGF、NGF及脑源性神经营养因子(brain—derivedneurotrophicfactor,BDNF)的变化规律及干细胞移植治疗周围神经损伤的最佳时机。方法新西兰大白兔16只,采用钳夹法制作坐骨神经损伤模型,按随机数字表法分为正常对照组、损伤3,7,14d组,每组4只。病理切片HE染色观察钳夹损伤后神经组织的结构变化,采用ELISA方法检测各组坐骨神经匀浆上清液中bFGF、NGF及BDNF的含量。结果损伤坐骨神经组织中bFGF的含量伤后缓慢上升,至伤后7d达到峰值(P〈0.05),之后下降并于14d降至正常水平(P〉0.05);BDNF的含量伤后迅速上升,至伤后7d达到峰值(P〈0.05),之后逐渐下降并于14d降至正常神经水平(P〉0.05);NGF的含量伤后迅速上升,至伤后3d达到峰值(P〈0.05),之后迅速下降并于7d降至正常水平(P〉0.05)。结论在周围神经损伤后的早期修复过程中,神经组织能够迅速调节NGF、bFGF及BDNF的分泌,各因子的分泌调节与损伤时间有关,呈峰值效应;伤后早期(3~7d)是进行神经吻合修复、神经移植及干细胞移植治疗的最佳时间。 孙晓雷 赵斌 马信龙 李秀兰 徐康 张扬 郭悦关键词:坐骨神经 干细胞移植 切开复位PPHP钢板内固定治疗肱骨近端骨折 目的 PPHP钢板为今年AO Synthes新推出的一款产品,其新的设计带来了肱骨近端骨折治疗的新的理念,本研究探讨采PPHP钢板内固定治疗肱骨近端骨折的临床疗效。 吕建伟 马信龙 孙晓雷 马剑雄 张扬 李风波 赵志虎关键词:肱骨 钢板 骨折 循环牵张应力对人退变纤维环细胞增殖的影响 被引量:2 2011年 目的探讨不同水平循环牵张应力对人退变椎间盘细胞增殖的影响。方法取1例29岁手术切除的腰椎间盘突出患者的椎间盘,通过病理学方法评价其退变程度,酶消化法分离椎间盘纤维环细胞。选取P3代细胞,利用ElectroForce3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱系统,以3h为固定时间点对其进行不同水平的频率为0.25Hz的周期性牵张应力刺激,设置形变量分别为0、5%、10%、15%和20%,应用流式细胞术检测不同应力刺激下纤维环细胞的增殖率变化情况,观察并探讨不同循环牵张应力对体外培养的人体退变椎间盘细胞的影响。结果随着牵张应力的增加,纤维环细胞s期细胞比例和增殖指数(PI)呈缓慢上升趋势,15%时达到峰值,之后开始下降。结论体外培养的人退变椎间盘纤维环细胞的增殖活性与受力大小有关且存在细胞增殖的最适应力条件;超过此应力范围,其增殖活性将会降低。 李爽 马信龙 孙晓雷 李秀兰 马剑雄 张扬 郭悦 宁尚龙关键词:椎间盘退变 纤维环细胞 增殖指数 毛囊干细胞的研究进展 被引量:4 2012年 【摘要】毛囊干细胞是毛囊组织维持自我更新的基础,它具有干细胞的一般特征,普遍认为定位于毛囊隆突部。毛囊干细胞的标记物是分离和鉴定细胞的重要依据,在多种信号通路调控下可以分化为毛囊、皮脂腺和表皮。至此,毛囊干细胞在组织工程皮肤中的作用引起人们的关注,就毛囊干细胞的研究进展作一阐述。 杨青 李秀兰 张扬 郭悦关键词:毛囊干细胞 分化 标志物 组织工程皮肤 低渗联合冻干改良制备组织工程神经支架及其性能研究 被引量:1 2014年 目的探讨低渗联合冻干技术改良制备脱细胞周围神经支架的可行性。方法将剥离神经周嗣结缔组织的坐骨神经分为3组(n=12):未处理组:正常新鲜神经未做任何处理;传统组:传统Hudson法制备脱细胞神经支架;改良组:低渗联合冻干技术制备改良脱细胞神经支架。对以上3组行组织学、扫描电镜、孔隙率及孔隙直径测定、生物力学评估;噻唑蓝法(MTT)分析改良支架浸提液毒性;分离兔脂肪干细胞(ADSCs)种植到改良支架七,用苏术精-伊红(HE)染色、Live/Dead染色观察细胞在支架上生长、存活情况。结果与未处理组和传统组比较,改良组神经蓝染细胞核消失,仅见呈波浪状排列的雪旺细胞基底膜,结构较疏松。各组层黏连蛋白免疫荧光染色均为阳性。与末处理组比较,传统组与改良组脱细胞神经支架髓鞘、轴突及细胞等结构均消失,纵切面上均可见平行排列的基底膜管,但改良组相对传统组而言组织结构较为疏松。改良组脱细胞神经支架的孔隙率(49.34%4-9.76%)及孔隙直径(17.6l±3.69)μm较传统组[34.50%4-7.26%、(11.964-3.10)μm]明显增大,差异均有统计学意义(P〈0.05)。3组神经间生物力学性能(极限载荷、韧度、极限应力、极限应变、弹性模量及断裂功耗)比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。MTT法显示不同浓度支架浸提液与对照培养液对细胞增殖影响差异均无统计学意义(P〉0.05)。HE染色及Live/Dead染色显示细胞在改良支架上存活及生长情况良好。结论低渗联合冻干技术改良制备的脱细胞神经支架具有良好的孔隙率、孔隙商径及牛物力学特性,无毒,细胞相容性良好,可作为一种更有利于细胞复合的神经支架材料。 赵斌 马信龙 李秀兰 马剑雄 张扬 杨召 李爽 杨强关键词:生物力学 冷冻干燥 低渗 改良脱细胞神经支架复合脂肪干细胞裸鼠皮下异位构建组织工程化周围神经的研究 被引量:1 2016年 目的 探讨改良脱细胞神经支架复合脂肪干细胞(ADSCs)在裸鼠体内异位构建组织工程化周围神经的可行性,并采用PKH26荧光染料标记及小动物活体荧光成像系统无创性地评估组织工程化周围神经在裸鼠体内的生长.方法 将标记PKH26荧光染料的ADSCs接种于课题组改良制备的脱细胞神经支架中,体外培养1周后植入裸鼠背部皮下,4周后利用小动物活体荧光成像系统对其进行观察;之后处死裸鼠,取材并进行冰冻切片荧光显微镜下观察及组织学检测;分析制备的组织工程化周围神经在裸鼠体内的生长情况.结果 植入物在裸鼠体内培养4周后,小动物活体荧光成像系统观察显示裸鼠背部植入部位可见条状强荧光,表明组织工程化周围神经在裸鼠体内生长情况良好.处死裸鼠后冰冻切片,荧光显微镜下观察可见组织工程化周围神经中细胞均呈红色荧光,表明细胞存活情况良好;组织学苏木素-伊红(HE)染色可见神经样组织形成,且其周围有血管包绕.结论 改良脱细胞神经支架复合脂肪干细胞能够在裸鼠皮下异位构建组织工程化周围神经;PKH26荧光染料标记及小动物活体荧光成像系统能够无创性地评估组织工程化周围神经在体内的生长. 赵斌 马信龙 孙晓雷 李艳军 郭悦 张扬 杨强关键词:周围神经 裸鼠 PKH26 明胶/硫酸钙复合生物材料 被引量:14 2006年 将具有传骨性的生物可吸收无机材料硫酸钙与具有诱骨性的明胶组合起来,构制新型可吸收复合生物材料。该材料可避免硫酸钙颗粒的脱落,可以作为骨填充物或支架材料。明胶的加入减缓了半水硫酸钙向二水硫酸钙的转化,形成了CSH/CSD/CLG e l复合材料。在该复合材料表面培养了人成骨细胞,细胞在支架表面粘附良好,可见该支架和细胞有较好的生物相容性。硫酸钙吸收后形成一可供细胞生长的多孔支架,所以明胶/硫酸钙(CLG e l/CS)复合材料实为原位成孔支架材料,解决了多孔支架材料初期强度低的致命弱点。 张永莉 霍书娟 高建平 李秀兰 张扬关键词:明胶 硫酸钙 复合生物材料 多孔支架材料 柚皮苷环境下微应变对成骨细胞增殖与分化的影响 被引量:5 2014年 目的:探讨柚皮苷环境下,微应变对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法:体外培养大鼠成骨细胞,在柚皮苷环境下,采用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应仓及自行研制的硅橡胶膜,对细胞进行循环牵张微应变加载。流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR检测骨钙素(OCN)、I型胶原(ColⅠ)及成骨特异性转录因子(Runx2)基因表达。结果:单纯力学刺激及柚皮苷联合力学刺激均能促进细胞增殖(P<0.05)。柚皮苷及单纯力学刺激均抑制细胞OCN基因表达(P<0.05)。但柚皮苷联合10%的微应变环境明显增强OCN基因表达(P<0.05)。单纯5%微应变刺激能增强Runx2基因表达(P<0.05);而柚皮苷联合力学刺激对Runx2基因表达没有影响;单纯10%微应变刺激与柚皮苷联合10%微应变刺激均增强ColⅠ基因表达。结论:微应变环境能促进成骨细胞增殖;柚皮苷环境下微应变加载能促进成骨细胞的分化功能。 孙晓雷 马信龙 张晨 马剑雄 赵斌 张扬 郭悦 李秀兰关键词:骨碎补 柚皮苷 成骨细胞 分化 骨髓间充质干细胞用于软骨组织工程的研究进展(综述) 软骨损伤是骨科临床十分常见的疾病。软骨组织工程的发展,为临床治疗软骨损伤提供了新的方法。软骨组织工程成为近年来生物医学研究的热点,正日益受到科研工作者和临床医生的广泛关注。来源于骨髓的间充质干细胞完全具备这些特点。因此,... 崔丽 张扬 李秀兰 郭悦关键词:软骨损伤 软骨组织工程 骨髓间充质干细胞 诱导分化