孙海波
- 作品数:9 被引量:2H指数:1
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- 蛋白酶体β亚单位6作为蚊对溴氰菊酯抗性检测的靶标的应用
- 本发明公开了蛋白酶体β亚单位6(PSMB6)作为蚊对溴氰菊酯抗性检测的靶标的应用,当待测品系的蛋白酶体β亚单位6基因的表达量达到敏感品系的1.60倍时,可认为待测品系对溴氰菊酯具有抗性。本发明发现了一个蚊对溴氰菊酯抗性检...
- 沈波孙海波张东辉贺骥孙林春于婧张利马磊孙艳朱昌亮
- 文献传递
- 3种转染试剂介导siRNA转染蚊细胞的比较研究被引量:1
- 2011年
- 目的比较3种不同转染试剂介导siRNA转染蚊细胞的优缺点,选择最优方法用于转染后细胞存活率检测试验。方法分别用FuGENE HD,X-tremeGENE和siPORT Amine 3种转染试剂介导特定siRNA转染蚊细胞,转染48 h后采用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达。比较3种方法的干涉效率,转染试剂对细胞的毒性和不同方法的操作步骤对实验结果的影响。结果 FuGENE HD、X-tremeGENE和siPORT Amine转染后的干涉效率分别为70%、85%和29%;FuGENE HD和siPORT Amine对蚊C6/36抗性细胞毒性较小,X-tremeGENE对蚊细胞毒性较大;FuGENE HD的转染过程需要更换一次细胞培养液,X-tremeGENE的转染过程需要更换2次细胞培养液,siPORT A-mine的转染过程不需要更换培养液。结论转染试剂的转染效果对于实验结果有显著影响。在蚊细胞转染siRNA的实验中,FuGENE HD转染效率尚可,对细胞毒性小,转染过程只需1次换液操作;X-tremeGENE转染效率较高,对蚊细胞毒性较大,有2次换液操作;siPORT Amine毒性小且不需换液操作,但转染效率较低。综合评价:FuGENE HD更适用于转染siRNA后细胞存活率实验。
- 孙林春孙海波沈波张利于婧朱昌亮
- 关键词:转染RNA干涉GENEAMINE
- 蚊核糖体蛋白S29的功能研究
- 杀虫剂抗性是当前媒介昆虫防制工作中的重点与难点课题。本实验室早期运用抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片技术发现,核糖体蛋白S29(RPS29)基因在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性与敏感品系中差异表达。进一步通过实时荧光定量...
- 孙海波贺骥张东辉马磊孙艳朱昌亮
- 关键词:细胞周期细胞增殖凋亡抗性信号通路溴氰菊酯
- 文献传递
- 蛋白酶体抑制剂MG132作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用
- 本发明涉及蛋白酶体抑制剂MG132的一种新功能,具体是蛋白酶体抑制剂MG132作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用。本发明提供了蛋白酶体抑制剂MG132的一种新用途,为研制新型高效的有机杀虫剂,提供了新途径。
- 孙艳孙林春焦健华贺骥孙海波于婧马磊沈波朱昌亮
- 淡色库蚊视蛋白主要抗原域的原核表达及多克隆抗体制备
- 2012年
- 目的为进一步研究蚊视蛋白参与杀虫剂抗性的相关分子机制和将其作为现场抗性检测靶标提供多克隆抗体。方法以前期制备的重组质粒pGEM-T Easy/opsin为模板,通过基因工程手段克隆视蛋白基因胞外区片段,构建原核载体,IPTG诱导表达蛋白,并利用His亲和层析以及肠激酶酶切片段获得纯度较高的蛋白,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,Western blot鉴定抗体特异性。结果成功构建淡色库蚊视蛋白主要抗原域的原核表达载体,经IPTG 1mmol/L诱导3h后高效表达可溶性重组蛋白,经His亲和层析及肠激酶酶切后获得纯度较高的蛋白,制备的多克隆抗体经Western blot证实能特异性地识别蚊视蛋白而不与非特异性蛋白结合。结论成功构建了淡色库蚊视蛋白主要抗原域的原核表达载体,制备的抗重组蛋白多克隆抗体特异性好,效价较高,为进一步研究视蛋白参与杀虫剂抗性的分子机制和将其作为现场抗性检测靶标提供了基础。
- 邹萍孙艳孙海波朱昌亮
- 关键词:淡色库蚊抗药性原核表达多克隆抗体
- 杀虫剂抗性相关核糖体蛋白L39的相互作用蛋白的研究
- 目前,虫媒病在全球范围内严重危害人类健康。化学防制一直是控制虫媒病的重要手段,但随着化学杀虫剂的大量使用,媒介昆虫的杀虫剂抗性也随之发生和发展。杀虫剂抗性已成为虫媒病防制工作中的一大障碍。本实验室1999年应用抑制性差减...
- 贺骥孙海波张东辉孙艳马磊朱昌亮
- 关键词:串联亲和纯化蛋白质相互作用溴氰菊酯抗性
- 文献传递
- 淡色库蚊抗药性相关基因酚氧化酶基因cDNA克隆与分析被引量:1
- 2009年
- 熊春蓉陈琳孙海波孙艳张东辉马磊朱昌亮
- 关键词:CDNA克隆淡色库蚊CDNA芯片媒介生物
- 蛋白酶体β亚单位6作为蚊对溴氰菊酯抗性检测的靶标的应用
- 本发明公开了蛋白酶体β亚单位6(PSMB6)作为蚊对溴氰菊酯抗性检测的靶标的应用,当待测品系的蛋白酶体β亚单位6基因的表达量达到敏感品系的1.60倍时,可认为待测品系对溴氰菊酯具有抗性。本发明发现了一个蚊对溴氰菊酯抗性检...
- 沈波孙海波张东辉贺骥孙林春于婧张利马磊孙艳朱昌亮
- 蛋白酶体抑制剂MG132作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用
- 本发明涉及蛋白酶体抑制剂MG132的一种新功能,具体是蛋白酶体抑制剂MG132作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用。本发明提供了蛋白酶体抑制剂MG132的一种新用途,为研制新型高效的有机杀虫剂,提供了新途径。
- 孙艳孙林春焦健华孙立新杨庆贵贺骥孙海波于婧马磊沈波朱昌亮
- 文献传递