孙林春
- 作品数：23 被引量：49H指数：4
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- Caspase依赖的氧化应激对脓毒症肾小管上皮细胞损伤的作用及机制被引量：4
- 2022年
- 目的:观察不同活性氧(reactive oxygen species,ROS)及氧化应激水平对脓毒症肾小管上皮细胞增殖、凋亡、周期等生物学效应的影响,探索氧化应激水平和线粒体-Caspase途径能否作为脓毒症肾小管上皮损伤的治疗靶点。方法:用终浓度为10μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理人肾小管上皮HK-2细胞12 h建立脓毒症细胞模型,将细胞模型随机分为H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2),300μmol/L)、Caspase抑制剂组(Ac-DEVD-CHO,15μmol/L)、Caspase抑制剂+H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2),300μmol/L+Ac-DEVDCHO,15μmol/L)和阴性对照组(不处理);另以正常培养的HK-2细胞为空白对照组。Western blot检测Cleaved-Caspase 3和Cleaved-多聚ADP核糖多聚酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞ROS水平、细胞凋亡和细胞周期。结果:阴性对照组细胞ROS水平、凋亡率、凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较空白对照组升高(P均<0.05),增殖率较空白对照组降低(P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞ROS水平、凋亡率、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较阴性对照组升高(P均<0.05),而增殖率较阴性对照组降低(P<0.05)。Caspase抑制剂+H_(2)O_(2)组细胞ROS水平、凋亡率、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较H_(2)O_(2)组降低(P均<0.05),但均高于阴性对照组(P均<0.05));增殖率较H_(2)O_(2)组升高(P<0.05),但仍低于阴性对照组(P<0.05)。结论:脓毒症细胞模型中存在异常升高的氧化应激反应。ROS能通过线粒体-Caspase凋亡途径抑制脓毒症肾小管上皮细胞增殖,促进细胞凋亡和引起细胞周期G1期阻滞。抑制Caspase对ROS引起的脓毒症肾小管上皮细胞损伤有一定保护作用。
- 孙林春刘建璟刘建璟
- 关键词：脓毒症肾损伤氧化应激线粒体凋亡
- 核糖体蛋白S29与人肝癌细胞Bel-7402耐5-氟尿嘧啶的关系
- 2016年
- 目的探讨核糖体蛋白S29(RPS29)与人肝癌细胞Bel-7402耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的关系。方法采用大剂量冲击法和逐渐增加剂量法构建人肝癌Bel-7402/5-FU耐药细胞系;用荧光定量PCR和Western blot检测RPS29基因和蛋白在敏感和耐药细胞中的表达;用siRNA干涉耐药细胞的RPS29,CCK-8法检测细胞存活率变化。用肝癌Hep G2/5-FU耐药细胞株验证阻断RPS29表达与5-FU耐药的关系。结果 Bel-7402/5-FU耐药细胞对5-FU的IC50为62μmol/L,耐药指数为22.7。RPS29基因和蛋白在耐药细胞中高表达,分别为敏感细胞的(2.21±0.19)倍和(1.79±0.28)倍(P<0.01)。干涉RPS29后,耐药细胞在一系列浓度梯度的5-FU作用下存活率分别比对照组下降(15.1±6.5)%、(24.3±4.2)%、(19.2±5.1)%、(16.3±6.8)%(P<0.05)。干涉RPS29表达后,肝癌Hep G2/5-FU耐药细胞株在一系列浓度梯度的5-FU作用下存活率分别比对照组下降(8.4±1.2)%、(13.0±2.3)%、(17.1±3.1)%和(12.2±1.5)%(P<0.05)。结论 RPS29基因和蛋白均在Bel-7402/5-FU耐药细胞高表达;低表达RPS29可提高Bel-7402/5-FU耐药细胞对5-FU的敏感性。低表达RPS29可提高Hep G2/5-FU耐药细胞对5-FU的敏感性。RPS29与肝癌细胞对5-FU的耐药性有关。
- 孙林春张利张兰芳
- 关键词：BEL-7402肿瘤耐药5-氟尿嘧啶
- 一种试管架
- 本实用新型涉及一种试管架，包括底板、支撑板和调节板，底板和支撑板均水平设置，支撑板的两端分别通过滑动组件架设在底板的上方，且其可沿滑动组件上下移动；调节板水平设置在支撑板的上方，且其上设有连接板和多个贯穿其上下两侧面的试...
- 张兰芳孙林春胡正
- 文献传递
- 蛋白酶体β亚单位6作为蚊对溴氰菊酯抗性检测的靶标的应用
- 本发明公开了蛋白酶体β亚单位6（PSMB6）作为蚊对溴氰菊酯抗性检测的靶标的应用，当待测品系的蛋白酶体β亚单位6基因的表达量达到敏感品系的1.60倍时，可认为待测品系对溴氰菊酯具有抗性。本发明发现了一个蚊对溴氰菊酯抗性检...
- 沈波孙海波张东辉贺骥孙林春于婧张利马磊孙艳朱昌亮
- 文献传递
- 3种转染试剂介导siRNA转染蚊细胞的比较研究被引量：1
- 2011年
- 目的比较3种不同转染试剂介导siRNA转染蚊细胞的优缺点,选择最优方法用于转染后细胞存活率检测试验。方法分别用FuGENE HD,X-tremeGENE和siPORT Amine 3种转染试剂介导特定siRNA转染蚊细胞,转染48 h后采用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达。比较3种方法的干涉效率,转染试剂对细胞的毒性和不同方法的操作步骤对实验结果的影响。结果 FuGENE HD、X-tremeGENE和siPORT Amine转染后的干涉效率分别为70%、85%和29%;FuGENE HD和siPORT Amine对蚊C6/36抗性细胞毒性较小,X-tremeGENE对蚊细胞毒性较大;FuGENE HD的转染过程需要更换一次细胞培养液,X-tremeGENE的转染过程需要更换2次细胞培养液,siPORT A-mine的转染过程不需要更换培养液。结论转染试剂的转染效果对于实验结果有显著影响。在蚊细胞转染siRNA的实验中,FuGENE HD转染效率尚可,对细胞毒性小,转染过程只需1次换液操作;X-tremeGENE转染效率较高,对蚊细胞毒性较大,有2次换液操作;siPORT Amine毒性小且不需换液操作,但转染效率较低。综合评价:FuGENE HD更适用于转染siRNA后细胞存活率实验。
- 孙林春孙海波沈波张利于婧朱昌亮
- 关键词：转染RNA干涉GENEAMINE
- 手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群在病程中的变化及临床意义被引量：3
- 2013年
- 目的 观察386例手足口病（HFMD）患儿外周血T淋巴细胞亚群数量在整个病程中的变化，探讨其临床意义。方法用流式细胞仪对386例手足口病患儿（手足口病组）和78名健康儿童（健康对照组）外周血T淋巴细胞亚群进行检测。386例手足口病患儿按病情轻重程度分，325例为普通型（普通型手足口病组），61例为重症型（重型手足口病组）；按病程的不同阶段分，264例为发病期（发病期手足1：3病组），122例为恢复期（恢复期手足口病组）。统计分析手足V：I病患儿与健康儿童，普通型与重症型手足口病患儿，恢复期与发病期手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群数量的差异。结果手足口病组外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞相对计数和CD4＋／CD8＋比值依次为（47．4±10．6）％、（24．0±8．0）％、（23．2±7．4）％和1．0±0．5，与健康对照组各项指标[（68．4±7．5）％、（38．2±6．9）％、（18．8±4．6）％和2．0±0．4]比较差异均有统计学意义（￡值分别为3．16、4．62、2．23、2．51，P均〈0．05）；普通型手足口病组外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞相对计数和CD4＋／CD8’比值分别为[（53．0±9．8）％、（26．5±7．9）％、（20．4±7．5）％和1．3-t-0．6，与重型手足口病组各项指标[（42．3±10．9）％、（18．7±4．7）％、（24．2±7．4）％和0．7±0．4]比较差异均有统计学意义（t值分别为2．25、2．47、1．91、2．32，P均〈0．05）；发病期手足口病组外周血CD3＋、CD4＋细胞相对计数和CD4’／CD8’比值分别为（45．3±10．5）％、（21．6±8．4）％和0．9±0．5，与恢复期手足口病组[（54．7±9．9）％、（27．5±9．1）％和1．4±0．6]比较差异均有统计学意义（t值分别为2．41、1．87、2．92，P均〈0．05）。结论手足口病患儿的细胞免疫受损，T淋巴细胞功能处于抑制状态，且抑�
- 孙林春张兰芳张利胡正
- 关键词：手足口病T淋巴细胞亚群流式细胞仪
- 人RPS29基因作为检测靶点在制备诊断白血病的试剂盒上的应用
- 本发明公开了人RPS29基因作为检测靶点在制备诊断白血病的试剂盒上的应用。人核糖体蛋白S29作为检测靶点在制备白血病诊断试剂盒中的应用。检测人核糖体蛋白S29表达量的试剂在制备白血病诊断试剂盒中的应用。所述的检测人核糖体...
- 于婧康美云贾占军方拥军杨运文李树珍夏薇薇孙林春
- 文献传递
- Caspase-3抑制剂所致氧化应激状态下肾小管上皮细胞差异表达基因的筛选及功能验证
- 2023年
- 目的:研究caspase-3抑制剂引起的氧化应激状态下肾小管上皮细胞基因表达特点,筛选潜在的候选基因,为揭示caspase-3调控活性氧(reactive oxygen species,ROS)损伤肾小管上皮细胞的机制奠定基础。方法:将人肾小管上皮细胞HK-2用H2O2(300μmol/L)处理6 h后,随机分为对照组和caspase-3抑制剂组(Ac-DEVD-CHO,15μmol/L),运用Illumina Hiseq 2500测序平台完成基因测序,筛选差异基因并进行相关富集分析,用定量PCR对筛选到的前10位差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)进行验证。将H2O2(300μmol/L)处理6 h后的HK-2细胞随机分为对照组、caspase-3抑制剂组(Ac-DEVDCHO,15μmol/L)、CTNNB1组[pcDNA3.1(+)-CTNNB1]、caspase-3抑制剂+CTNNB1组[Ac-DEVD-CHO,15μmol/L+pcDNA3.1(+)-CTNNB1]以及caspase-3抑制剂+CTNNB1 NC组[Ac-DEVD-CHO,15μmol/L+pcDNA3.1(+)-CTNNB1 NC],MTT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡和ROS水平,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果:芯片共筛选出185个DEG,经定量PCR验证,显著性差异排名前10的基因中FIS1、EZR、COL7A1、RPL5、MAP4、CEBPB和CTNNB1 mRNA在caspase-3抑制剂组细胞中低表达(P均<0.05),SNRPB mRNA高表达(P<0.05)。Caspase-3抑制剂组增殖率高于对照组(P<0.05),CTNNB1组增殖率低于对照组(P<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组增殖率低于caspase-3抑制剂组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。Caspase-3抑制剂组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平低于对照组(P均<0.05),CTNNB1组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平高于对照组(P均<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平均较caspase-3抑制剂组高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。caspase-3抑制剂组ROS较对照组降低(P<0.05),CTNNB1组ROS较对照组升高(P<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组ROS较caspase-3抑制剂组高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。结论:Caspase-3抑制剂引起的肾小管上�
- 骆长亮张秋红孙林春
- 关键词：肾损伤氧化应激Β-连环蛋白
- 一种细胞过滤组件及其组成的细胞过滤系统
- 本实用新型公开了一种细胞过滤组件及其组成的细胞过滤系统，所述细胞过滤组件包括过滤器、过滤壳和离心管，所述过滤器为一个竖直设置且开口朝上的槽体，所述过滤器的槽底布满筛孔；所述过滤壳为竖直设置且内部中空壳体，所述过滤壳的上端...
- 孙林春张兰芳胡正
- 文献传递
- 一种流式细胞仪料液桶密封结构
- 本实用新型涉及一种流式细胞仪料液桶密封结构，包括桶盖和驱动组件，桶盖活动设置在料液桶桶口的上方，桶盖上设有供料液管穿过的管孔一；驱动组件设置在桶盖的一侧用以驱动桶盖上下移动，驱动组件驱动桶盖靠近或远离桶口以封住或敞开桶口...
- 孙林春张兰芳陈倩胡正
- 文献传递
