唐大运
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金广西教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体制备及其生物学特性鉴定被引量：3
- 2012年
- 【目的】制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础。【方法】利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性。【结果】通过间接ELISA筛选及3次亚克隆后,共获得5株大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6D3、6B4、7D2、7D1和7D4。经鉴定,发现5株杂交瘤细胞染色体数为90～110条,均大于亲本细胞,其亚类鉴定分别属于IgG2b、IgM、IgM、IgG1和IgM,其轻链均为κ型;5株单克隆抗体(6D3、6B4、7D2、7D1、7D4)的上清效价分别为1:400、1:3200、1:25600、1:6400和1:6400,腹水效价分别为1:104、1:104、1:105、1:107和1:106;而表位测定结果表明,5株单克隆抗体中,6D3与7D1、7D2以及7D4与7D1、7D2作用于不同表位,6D3与6B4可能识别同一表位或重叠表位,或同一表位有空间位阻,7D4与6D3以及6B4与7D4、7D1、7D2可能具有空间位阻;5株单克隆抗体的相对亲和力为:6B4>7D4>7D1>6D3>7D2;5株杂交瘤细胞株均能稳定地分泌单克隆抗体。【结论】制备获得的分泌排泄抗原单克隆抗体可用于大片吸虫病的诊断和免疫机理等方面的进一步研究。
- 李晓栩王华俊林贤陈汉忠曹池唐大运孟盟刘明如
- 关键词：大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体生物学特性
- Myostatin基因沉默转基因羊的培育探索
- Myostatin(肌肉生长抑制素)基因是肌肉生长发育的负调控因子，该基因的突变或缺失的牛肌肉发达，实验室获得的该基因沉默的转基因鼠和斑马鱼肌肉发达程度均显著增强。Myostatin基因在肌肉发育中的作用已被广泛认可，因...
- 唐大运
- 关键词：RNA干扰慢病毒转基因核移植
- 文献传递
- 抗大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体的制备及生物学活性的鉴定
- 利用杂交瘤技术，以大片吸虫分泌排泄抗原作为免疫原，制备了5株大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株，分别命名为6D3、684、7D2、7D1、7D4。经鉴定5株杂交瘤细胞染色体计数为90—110条，均大于亲本细胞，其...
- 李晓栩王华俊林贤陈汉忠曹池唐大运孟盟刘明如
- 关键词：大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体生物活性
- 崂山奶山羊Myostatin基因真核表达载体的构建及其在成纤维细胞中的表达研究被引量：2
- 2012年
- 试验克隆了崂山奶山羊Myostatin基因序列,构建了其真核表达载体,并验证了其在成纤维细胞中的表达。本研究通过从崂山奶山羊肌肉组织中提取RNA,反转录后采用巢式PCR方法扩增出Myostatin基因序列,构建真核表达载体,通过转染成纤维细胞,采用RT-PCR方法验证其表达。结果表明,克隆出崂山奶山羊Myostatin基因的全长cDNA序列,大小为1128bp,GenBank登录号:GU377303.1;构建pcDNA-MSTN真核表达载体,转染成纤维细胞48h后通过RT-PCR检测,结果显示,Myostatin表达量显著增加,表明成功构建pcDNA-MSTN真核表达载体,为进一步研究Myostatin的生物学功能及转基因羊培育奠定基础。
- 唐大运陈晓亮吴健敏朱化彬杜卫华王栋赵学明陈汉忠林秀坤
- 关键词：崂山奶山羊肌肉生长抑制素真核表达载体成纤维细胞巢式PCR
- 水牛伊氏锥虫间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2009年
- 利用伊氏锥虫的优势变异型虫体作为可溶性抗原,通过试验研究和条件优化,建立了一种水牛伊氏锥虫间接ELISA方法。测试结果表明,该法灵敏度高,特异性强,对实验感染样本的检测获得了较好的效果,为一种有效的ELIAS方法,为广西水牛伊氏锥虫病的诊断奠定了技术基础。
- 何木荣曾小飞陈汉忠李晓栩唐大运白波吴桂贤
- 关键词：伊氏锥虫水牛酶联免疫吸附试验
- 一种快速建立转基因阳性细胞系的方法
- 一种快速建立转基因阳性细胞系的方法。本发明公布了一种快速建立转基因阳性细胞系的方法。该方法将慢病毒与流式细胞仪的优点结合起来，首先将目的基因插入带EGFP基因的慢病毒穿梭质粒中，包装病毒，浓缩病毒颗粒，将病毒颗粒感染细胞...
- 林秀坤唐大运朱化彬陈晓亮
- 文献传递
- 双抗体夹心ELISA检测大片吸虫分泌排泄抗原方法的建立
- 用单克隆抗体7DI包被ELISA板，用大片吸虫分泌排泄抗原免疫家兔，按常规方法制备兔多克隆抗体作为第二抗体，建立了检测大片吸虫ES抗原的双抗体夹心EL ISA方法。结果表明，该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为：单克隆...
- 李晓栩孟盟陈汉忠曹池唐大运
- 关键词：大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体酶联免疫吸附测定
- Myostatin基因沉默绵羊成纤维细胞系的建立被引量：8
- 2011年
- 旨在获得肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因沉默的成纤维细胞系,为进一步探索Myostatin的调控机理,获得Myostatin的基因沉默的转基因羊奠定基础。针对小尾寒羊Myostatin的基因序列,设计4条siRNA干扰序列,构建pSilencer干扰载体,转染成纤维细胞,采用RT-PCR进行筛选;构建慢病毒干扰载体,包装病毒,感染成纤维细胞,采用流式细胞技术分选阳性细胞,阳性细胞予以测序鉴定并检测沉默效果。结果,获得Myostatin基因沉默效率约90%的RNA干扰片段PSL1,包装病毒获得滴度为1×108的病毒颗粒,流式细胞技术分选得到纯度达99%的Myostatin基因沉默成纤维细胞系。采用慢病毒感染接合流式细胞术分选,能较快获得无抗性标记的转基因阳性细胞系,为培育Myostatin基因沉默的转基因羊及探索Myostatin的调控机理奠定基础。
- 唐大运朱化彬吴健敏杜卫华王栋赵学明陈汉忠林秀坤
- 关键词：肌肉生长抑制素RNA干扰慢病毒
