朱化彬 作品数:327 被引量:831 H指数:13 供职机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 经济管理 更多>>
崂山奶山羊Myostatin基因真核表达载体的构建及其在成纤维细胞中的表达研究 被引量:2 2012年 试验克隆了崂山奶山羊Myostatin基因序列,构建了其真核表达载体,并验证了其在成纤维细胞中的表达。本研究通过从崂山奶山羊肌肉组织中提取RNA,反转录后采用巢式PCR方法扩增出Myostatin基因序列,构建真核表达载体,通过转染成纤维细胞,采用RT-PCR方法验证其表达。结果表明,克隆出崂山奶山羊Myostatin基因的全长cDNA序列,大小为1128bp,GenBank登录号:GU377303.1;构建pcDNA-MSTN真核表达载体,转染成纤维细胞48h后通过RT-PCR检测,结果显示,Myostatin表达量显著增加,表明成功构建pcDNA-MSTN真核表达载体,为进一步研究Myostatin的生物学功能及转基因羊培育奠定基础。 唐大运 陈晓亮 吴健敏 朱化彬 杜卫华 王栋 赵学明 陈汉忠 林秀坤关键词:崂山奶山羊 肌肉生长抑制素 真核表达载体 成纤维细胞 巢式PCR 促卵泡素对体外培养牛卵泡类固醇合成相关基因表达的影响 2019年 本研究旨在探究促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)处理对体外培养的牛有腔卵泡颗粒细胞和膜细胞类固醇激素合成相关基因表达的影响。采集牛卵巢表面直径9~11 mm的有腔卵泡,用含不同浓度FSH的DMEM/F12体外培养牛有腔卵泡24 h。提取卵泡颗粒细胞、膜细胞RNA并反转录成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测卵泡颗粒细胞、膜细胞中类固醇激素合成酶基因(CYP11A1、3β-HSD、CYP17A1、CYP19A1、17β-HSD)和促性腺激素受体基因(FSHR、LHR)的表达水平。结果显示,FSH处理上调了颗粒细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP19A 1基因表达,其中,25 ng/mL FSH处理极显著上调了CYP11A 1基因表达(P<0.01),10 ng/mL FSH处理显著上调了3β-HSD基因表达(P<0.05),50 ng/mL FSH处理显著上调了CYP19A 1基因表达(P<0.05);50 ng/mL FSH处理显著或极显著上调了膜细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因表达(P<0.05;P<0.01),但在10和25 ng/mL FSH处理组中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因表达显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01)。对FSHR、LHR基因研究结果显示,不同浓度FSH处理对颗粒细胞中FSHR、LHR基因的表达均无显著影响(P>0.05),只有25和50 ng/mL FSH处理显著或极显著上调了膜细胞中LHR基因表达水平(P<0.05;P<0.01),且不同处理组之间膜细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因的表达变化与LHR基因表达变化趋势较一致。结果表明,FSH处理可提高牛有腔卵泡颗粒细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因的表达,膜细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因对LH的刺激更敏感,FSH可能通过影响LHR基因的表达来调节膜细胞中类固醇合成酶基因的表达。 王洋洋 许慧韬 赵善江 庞云渭 郝海生 邹惠影 朱化彬关键词:有腔卵泡 体外试验 牛精子全蛋白二维电泳等电聚焦程序优化及染色方法的比较 2008年 以牛精子全蛋白为试验材料进行二维电泳试验研究,优化和改进了一向等电聚焦参数,比较了不同的染色方法,并运用Image Master 6.0软件分析了二维电泳图谱。结果表明,采用24 cm,pH3-10线性IPG胶条进行牛精子全蛋白二维电泳,等电聚焦80000 Vh和结合硝酸银染色方法可得到较多蛋白点和较高分辨率的二维电泳图谱。 陈龙 朱化彬 王栋 郝海生 杜卫华 沙里金关键词:二维电泳 精子动力学参数与其体内、体外受精能力的相关性分析 <正>引言/目的众所周知,在分离和冷冻过程中性控分离精子的线粒体膜电位、DNA完整性、质膜结构等均受到损伤,导致精子的运动性能和受精能力降低。因此,在人工授精前预测分离精子的受精能力有重要意义。本研究文对三头公牛的精子活... 李凤 胡庭溪 刘霞 郝海生 赵学明 杜卫华 朱化彬奶牛体内超数排卵反应性状研究进展 被引量:1 2023年 奶牛超数排卵与胚胎移植(multiple ovulation and embryo transfer,MOET)是现代奶牛养殖中的重要生物技术,MOET技术可加快牛群遗传改良速度。然而,不同供体母牛对超数排卵的反应(简称超排反应)存在较大差异,这限制了MOET技术的广泛应用。因此,探究供体母牛超排反应差异的形成原因并预测外源激素处理的效果,进而筛选合适的供体母牛是目前亟待解决的问题。母牛的超排反应受遗传影响,对母牛的超排反应性状进行选育或将大幅提高母牛超数排卵的效率。研究中通常将奶牛的超排反应性状定义为单次超数排卵获得的总胚胎数和可移植胚胎数,这类性状受季节、供体母牛月龄、超排程序及操作人员等非遗传因素的影响,是一类具有中低遗传力的新型繁殖性状,研究发现超排反应性状与多种调控繁殖激素表达及调控细胞生长分化的基因存在显著关联。在遗传育种领域,国内研究人员对奶牛超排反应性状的研究相对较少,目前仅有少量关于超排反应候选基因关联分析的报道。作者从性状定义、非遗传因素建模分析、遗传参数估计和候选基因挖掘鉴定等方面系统综述奶牛超排反应性状的研究进展,并对奶牛超排反应性状的遗传学研究和选育应用进行了展望。 黄越川 张海亮 赵善江 刘展鹏 朱化彬 黄锡霞 王雅春关键词:奶牛 超数排卵 候选基因 一种提高玻璃化冷冻卵母细胞体外受精能力的方法 本发明提供了一种提高玻璃化冷冻牛卵母细胞受精能力的方法。本发明在玻璃化冷冻处理前,将牛卵母细胞采用含有钆和CLC的溶液联合处理,再进行玻璃化冷冻;解冻后采用甲基化‑β‑环糊精处理,而后进行体外受精。结果表明,该方法能够显... 赵学明 朱化彬 郝海生 赵亚涵 杜卫华 刘岩 庞云渭内毒素脂多糖对产后奶牛繁殖性能的影响及其机制 被引量:1 2016年 实际生产中,奶牛产后繁殖疾病高发,尤其是上生殖道产后感染疾病,对奶牛繁殖性能造成严重的不良影响。革兰氏阴性菌是产后奶牛上生殖道感染最主要的细菌之一,其细胞壁的裂解产物内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为一种病原模式分子(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),可被子宫内膜上皮细胞膜表面Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)识别、结合,然后激活TLR4-核转录因子p65(transcription factor p65)通路,引发盆腔炎性反应,造成子宫上皮黏膜损伤。同时,LPS能够透过已被破坏的子宫上皮黏膜移行进入血液循环,甚至进入卵泡液中,影响下丘脑-垂体-子宫/卵巢轴的正常生殖内分泌功能以及子宫和卵巢的正常机能,最终降低奶牛繁殖性能。近年来,关于LPS对奶牛繁殖性能的影响已有广泛研究,本文着重阐述脂多糖LPS对产后奶牛生殖内分泌、子宫与卵巢机能的影响及其机制,以期为奶牛生产工作中提高产后奶牛繁殖性能提供理论支持。 赵善江 郝海生 杜卫华 赵学明 王皓宇 朱化彬关键词:卵巢 革兰氏阴性菌 LPS 一种鉴别牛及其早期胚胎性别的方法 通过改善传统PCR反应的技术参数,本发明建立了一种操作时间短、污染几率低、结果准确可靠的牛性别,特别是牛早期胚胎性别的鉴定方法。首先将传统PCR方法的三温度循环改变为两温度循环,并且减少每个温度的反应时间。具体地说,本发... 朱化彬 王栋 郝海生 王宗礼 程金华 杨波文献传递 和牛体内生产胚胎与移植试验 引言超数排卵处理和牛供体母牛生产纯种和牛体内胚胎,并移植受体母牛是快速繁育和牛纯种群的有效技术途径。为增加我国肉牛遗传资源,提高我国肉牛生产性能,目前国内一些企业从国外引进和牛胚胎,通过胚胎移植繁殖纯种和牛。本试验研究和... 郝海生 耿绍旺 杜卫华 王琨 刘明革 秦彤 王栋 赵学明 朱化彬文献传递 玻璃化冷冻牛卵母细胞支持体细胞克隆胚的体内外发育研究 本研究目的是研究牛卵母细胞经玻璃化冷冻后的体内外发育能力及对克隆胚发育的支持.采用EDFS30、EDFS40、EDFSF30和EDFSF40玻璃化冷冻液,对牛体外成熟培养16h的卵母细胞实施OPS法冷冻保存,冷冻解冻后卵... 侯云鹏 戴蕴平 朱士恩 朱化彬 吴通义 龚国春 王海平 王莉莉 刘颖 李荣 万荣 李宁关键词:OPS法 玻璃化冷冻 卵母细胞 胎儿成纤维细胞 体细胞克隆牛 文献传递