刘振格
- 作品数：10 被引量：49H指数：4
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：黑龙江农垦总局科技攻关项目国家科技支撑计划黑龙江省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法的建立及初步应用被引量：10
- 2014年
- 为建立一种快速诊断牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)病的方法,根据GenBank中登录的IBRV保守基因gB序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计1对特异引物,优化反应体系后,建立了IBRV PCR检测方法。特异性试验结果显示该方法可从IBRV DQ株中扩增出398 bp的特异性片段,而对牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒、MDBK细胞的扩增结果均为阴性。该方法检测IBRV的敏感性可达10-3 TCID50·mL-1。应用建立的PCR方法能够从发病的临床样品中检测出IBRV且比病毒分离方法更为敏感,操作简便。结果表明建立的PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于IBRV的临床检测。
- 王嵩林红丽王宇鹏刘振格王杰杨明发余丽芸侯喜林
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒聚合酶链反应
- 猪传染性胃肠炎病毒S截短蛋白在干酪乳杆菌表面展示表达的研究
- 2013年
- 为构建细菌外膜展示表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S截短蛋白的重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),本研究采用RT-PCR扩增TGEV S基因的截短片段BC和AD,构建了重组pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei,利用western blot、间接免疫荧光法(IFA)和流式细胞术(FACS)检测外源蛋白在干酪乳杆菌的表面表达与定位。IFA和FACS结果显示重组菌株pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei表面均能够检测到截短的S和PgsA融合表达蛋白与TGEV阳性血清的特异性荧光信号,而对照菌没有检测到荧光信号。表明本研究构建的的TGEV重组L.casei具有胞外展示表达TGEV抗原蛋白的功能,可以作为TGEV候选疫苗应用于动物试验研究。
- 田斌余丽芸侯喜林王桂华刘振格郭东伟刘秋晨齐浩林红丽
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒
- 仔猪源大肠杆菌分离株的血清型鉴定被引量：1
- 2012年
- 由大肠杆菌引起的仔猪腹泻（习惯上称为仔猪黄痢和仔猪白痢）是猪场最常见的传染性疾病之一。该病以严重腹泻、脱水或败血症为主要临床表现,病猪往往生长停滞或死亡,对仔猪危害较大,已成为养猪业一个有重要经济意义的疾病。因大肠杆菌血清型众多,变异较大,给本病的有效防控带来困难。本试验从冀东地区的滦县、迁安、昌黎、抚宁等地12个发病猪场分离鉴定出31株仔猪源大肠杆菌,
- 刘玉芹陈翠珍董淑珍刘振格房海
- 关键词：猪源大肠杆菌血清型鉴定分离株仔猪白痢仔猪腹泻仔猪黄痢
- 副猪嗜血杆菌病的诊断与防治被引量：3
- 2011年
- 副猪嗜血杆菌病又称格拉斯氏病,是由副猪嗜血杆菌引起的猪的多发性浆膜炎、浆液纤维素性心包炎、关节炎和脑膜炎为主要特征的传染病。
- 董淑珍刘玉芹杨彩然韩振兴刘振格
- 关键词：副猪嗜血杆菌病多发性浆膜炎纤维素性心包炎传染病
- 截短NDVF蛋白的原核表达被引量：1
- 2013年
- 根据NDV LaSota株F基因已知的抗原表位,对F蛋白进行分段表达。应用RT-PCR方法分段扩增F基因,并将其克隆到pET30a(+)原核表达载体上,得到重组质粒pET30-F780和pET30-F760,将质粒导入BL21(ED3)感受态中,经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白通过SDS-PAGE和Westem-blotting方法进行鉴定。表达的两段蛋白大小约为31.1 kDa和27.9 kDa,与预期的蛋白分子量大小相符。Western blot分析表明重组蛋白可以和NDV抗体发生特异性反应。成功构建了原核表达质粒pETF780和pET-F760,并获得了高效表达,通过Western blot分析表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。
- 王杰王宇鹏刘振格杨鸣发林红丽田斌侯喜林
- 关键词：新城疫病毒F蛋白
- 牛冠状病毒DQ株弱毒株的培育及其对BALB/c小鼠免疫效果研究
- 牛冠状病毒(Bovine coronavirus, BCoV)是引起新生犊牛腹泻和成年牛冬痢、呼吸道疾病最主要的病原体之一，临床上主要表现为新生犊牛腹泻、拉血样粪便、成年牛冬季严重水样腹泻(有时伴有血和黏液)等特征。给我...
- 刘振格
- 关键词：牛冠状病毒免疫
- 文献传递
- 牛轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：15
- 2011年
- 用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法。该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg.mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5μg.mL-1,样品反应时间60 min,酶标抗体工作浓度为1∶5 000,以OD450 nm≥0.432作为阳性判定标准。该方法的板间、板内重复性变异系数小于10%,最低检测浓度为1.41μg.mL-1,并与牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛冠状病毒(BCV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)等病原无交叉反应。用建立的ELISA方法与BRV RT-PCR方法同时检测40份临床粪便样品,符合率达到95%。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有较好的特异性和较高的敏感性,可用于BRV的快速检测。
- 侯美如侯喜林高俊峰刘振格王杰杨明发
- 关键词：牛轮状病毒双抗体夹心酶联免疫吸附试验
- 冀东地区猪源大肠杆菌分离株的耐药性调查被引量：3
- 2012年
- 现代养殖业的持续发展离不开抗菌药物，然而，抗菌药物的广泛使用和不合理滥用导致耐药现象日趋严重，给临床用药带来很大难度。而且大肠杆菌作为人和动物的肠道共栖菌和条件性致病菌，其可以通过耐药质粒和耐药基因传递等多种方式将耐药性传播给人类，给食品安全和人类健康带来潜在危害。对动物源大肠杆菌耐药性的调查和监测不仅为兽医临床合理用药提供科学依据，
- 刘玉芹陈翠珍杨彩然董淑珍刘振格房海
- 关键词：猪源大肠杆菌耐药性分离株抗菌药物临床用药
- BRSV和BPIV-3双重PCR检测方法的建立及初步应用被引量：9
- 2014年
- 为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了BRSV和BPIV-3的双重PCR检测方法。采用该方法检测BRSV和BPIV-3参考毒株,特异性良好。对参考毒株进行梯度稀释检测,结果该方法检测BRSV的敏感性可达10 TCID50·100μL-1,BPIV-3可达10 TCID50·100μL-1。应用建立的双重PCR方法能够从临床样品中检测出BRSV和BPIV-3。表明建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于BRSV和BPIV-3的临床检测。
- 王嵩林红丽王宇鹏刘振格王杰杨明发余丽芸侯喜林
- 关键词：牛呼吸道合胞体病毒
- 牛冠状病毒DQ株感染BALB/c小鼠的敏感性研究被引量：5
- 2014年
- 为研究牛冠状病毒DQ株（BCoV-DQ）对BALB／c小鼠的敏感性，本研究将该病毒以不同剂量、不同途径感染小鼠，观察比较临床表现、体重变化、剖检及组织病理学变化。分别以100TCID50-700TCID50感染小鼠，结果显示300TCID50病毒可使试验小鼠出现明显的临诊症状和可见的病理变化。采用滴鼻、灌胃、腹腔注射三种途径感染小鼠，结果显示灌胃组个体变化差异大，组织器官病变明显，为最佳感染途径。取主要病变部位组织进行病毒基因组的RT—PCR扩增，证实该病毒可以在小鼠肠道内成功增殖。本实验表明BALB／c小鼠可以作为BCoV．DQ研究的替代动物。
- 刘振格侯喜林余丽芸王宇鹏王杰田斌
- 关键词：牛冠状病毒BALBC小鼠敏感性
