何亚芳
- 作品数：24 被引量：55H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- iNOS抑制剂阻断由细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质细胞前体毒性作用的研究被引量：5
- 2009年
- 目的探讨由细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的活性小胶质细胞（MG）对少突胶质细胞（OL）前体的毒性作用及选择性iNOS抑制剂1400W对毒性作用的阻断效果。方法取2日龄SD大鼠脑内MG和OL前体共培养，分为共培养对照组，共培养LPS组以及共培养LPS＋1400W组。对共培养细胞经LPS100ng／ml诱导后48h，分别应用硝酸还原比色法检测一氧化氮（NO）含量，免疫细胞染色法检测过氧亚硝酸盐（ONOO^-）含量，Westernblot法检测诱生型一氧化氮合酶（Inducible Nitric Oxide Synthase，iNOS）蛋白合成量，Hochest33342／PI荧光染色观察细胞凋亡形态学改变，以及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与共培养对照组比LPS可诱导培养细胞内NO含量[（82．27±3．41）μmol／L vs．（167．86±9．87）μmol／L，t=8．593，P〈0．01]、ONOO^-含量[（6．14±1．27）×10^7／L vs．（34．38±7．75）×10^7／L，t=5．892，P〈0．01]以及iNOS蛋白合成量相对值[（0．18±0．027）VS．（0．79±0．068），t=9．26，P〈0．01]明显增高，OL前体的凋亡率亦显著增加[（6．73±1．39）％vs．（24．77±2．05）％，t=12．619，P〈0．01]。应用1400W10μmol／L则可显著抑制因LPS诱导而增高的NO含量[（69．55±5．07）μmol／L，t=8．896，P〈0．01]、ONOO^-含量[（10．33±3．47）×10^7／L，t=14．96，P〈0．01]以及iNOS蛋白的合成量（0．35±0．042，t=5．506，P〈0．01），并显著降低了OL前体的细胞凋亡率[（11．8±2．06）％，t=7．715，P〈0．01]。结论NO、iNOS以及ONOO^-等物质在LPS诱导OL前体的死亡通路中扮演了重要角色，1400W通过选择性抑制iNOS，减少了NO以及ONOO^-的生成，从而有效阻断了由LPS诱导活性MG对OL前体的毒性作用，提高了OL前体的存活率。
- 何亚芳陈惠金钱龙华陈冠仪
- 关键词：少突神经胶质小神经胶质细胞
- 优化后的汉族儿童哮喘易感基因预测模型在喘息儿童中的验证
- 在喘息儿童中验证优化后的汉族儿童哮喘易感基因预测模型(由IIL13R110Q、IL4-590C＞T、ADRB2R16G和FCER1B E237G构成).应用TaqMan实时荧光定量聚合酶链式反应方法对212名喘息儿童进行...
- 华丽鲍一笑王一卉包军刘全华李京阳何亚芳
- 关键词：儿童哮喘易感基因汉族患者
- IL-13R130Q多态性对支气管平滑肌细胞的功能影响
- 目的：探索IL-13R130Q 多态性对支气管平滑肌细胞收缩、分泌、增殖和迁移功能的影响。方法：野生型及变异型IL-13 重组蛋白,以不同浓度(1ng/ml,10ng/ml,50ng/ml,100ng/m)刺激原代培养的...
- 何亚芳鲍一笑包军华丽刘全华王一卉
- 关键词：哮喘单核苷酸多态性IL-13功能活性
- 未成熟脑白质缺血性损伤和谷氨酸异常信号传输被引量：4
- 2019年
- 目的探讨缺血诱导谷氨酸异常信号传输对未成熟脑白质的损伤作用。方法分别制备2日龄新生大鼠少突胶质细胞(OL)前体氧糖剥夺(OGD)细胞模型和缺血型脑室周围白质软化(PVL)动物模型。于OGD后24小时,收集细胞及上清液,应用高效液相色谱仪测定OL前体胞外谷氨酸浓度,流式细胞仪检测胞内钙离子浓度以及OL前体凋亡率。新生大鼠于造模后第5天处死取脑,分别进行光镜下脑白质病理评估、免疫组化法检测髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性成熟OL百分比以及电镜下脑白质髓鞘化评估。结果体外与无氧糖剥夺的正常组OL前体相比,OGD组OL前体胞外谷氨酸呈大量蓄积(P<0.01),胞内钙离子浓度显著增加(P<0.01),OL前体的凋亡率和坏死率亦明显增高(P<0.01,P<0.05)。体内与假手术(Sham)组正常新生大鼠相比,PVL组所有大鼠脑白质均显现轻度或重度的病理改变,脑白质内MBP阳性成熟OL明显减少,髓鞘亦形成不良,表现为髓鞘数目明显减少和髓鞘厚度明显变薄(P均<0.01)。结论未成熟脑白质具有与成熟脑白质相似的谷氨酸信号传输特点。缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输。
- 何亚芳张建华陈惠金钱龙华
- 关键词：缺血
- 细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质前体毒性作用的体内研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨细菌脂多糖(LPS)诱导活性小胶质细胞(MG)激活对少突胶质前体(preOLs)毒性作用。方法 2日龄SD大鼠随机分为假手术组和脑室周围白质软化(PVL)模型组,每组24只。脑立体定位仪下对PVL组新生大鼠经脑室注入LPS1μg/g,建立感染型PVL新生大鼠动物模型;对假手术组新生大鼠经脑室注入相同体积的无菌PBS。于造模后第5天处死取脑,分别进行光镜下脑白质病理评估、硝酸还原法检测NO含量、还原比色法检测O2-含量、免疫组织化学染色检测过氧亚硝酸盐(ONOO-)含量以及OL前体的存活率。结果与假手术组相比,LPS诱导可引起新生大鼠的脑白质严重损伤(Z=7.498,P=0.000),脑内O2-含量(42.822±3.600比187.717±8.566,t=26.907,P=0.000)明显增加,NO含量[(1.097±0.079)μmol/gprot比(2.878±0.183)μmol/gprot,t=34.728,P=0.000]、ONOO-含量[(0.000±0.000)%比(11.000±1.732)%]均显著增加,脑白质内O4阳性OL前体[(11.513±0.775)%比(3.353±0.442)%,t=16.013,P=0.000]大量减少。结论从体内确认LPS诱导OL前体的死亡通路,是通过LPS诱导MG激活,促使生成大量NO、O2-和ONOO-,作用于OL前体,导致OL前体的死亡。
- 何亚芳陈惠金钱龙华陈冠仪
- 关键词：小胶质细胞脂多糖
- 胶质细胞源性营养因子和美金胺对脑室周围白质软化新生大鼠远期预后的影响被引量：3
- 2011年
- 目的评估胶质细胞源性营养因子(GDNF)和美金胺对脑室周围白质软化(PVL)新生Sprague-Dawley大鼠远期预后的影响。方法 32只5日龄新生大鼠随机分为假手术(Sham)组、PVL组、GDNF组以及美金胺(Mem)组。除Sham组外,其他3组均行右颈总动脉结扎及缺氧处理(PVL造模)。GDNF组和Mem组分别于造模后即刻注射GDNF 100μg/kg和Mem 20 mg/kg。每天对各组大鼠称重。于26日龄(造模后21 d)对各组大鼠进行Morris水迷宫测试及Rivlin斜板实验,记录水迷宫测试时的逃逸潜伏期(escape latency,EL)和游泳距离以及斜板测试时在斜板上至少停留5 s的最大倾斜角度。结果术后PVL组大鼠的平均体重明显低于Sham组和两个用药组(P<0.05);EI值和游泳距离均较Sham组和两个用药组显著延长(P<0.05或<0.01);在斜板上至少停留5 s的最大倾斜角度明显低于Sham组和两个用药组(P<0.05)。两个用药组和Sham组在体重、EI和游泳距离以及斜板的最大倾斜角度之间的差异均无统计学意义。结论 GDNF和Mem均可增强PVL大鼠的空间辨识、学习记忆和运动协调能力,促进体重增长,明显改善远期预后。
- 李文娟陈惠金钱龙华何亚芳陈冠仪
- 关键词：脑室周围白质软化美金胺新生大鼠
- 细菌溶解产物预防支气管哮喘儿童并发呼吸道感染的临床疗效观察被引量：18
- 2020年
- 目的观察细菌溶解产物对于支气管哮喘儿童并发急性呼吸道感染的临床疗效和安全性。方法采用前瞻性研究,选取2016年1月至2018年12月上海交通大学医学院附属新华医院收治的120例支气管哮喘缓解期患儿,采用随机方法将患儿平均分为两组:对照组和治疗组,每组各60例。对照组患儿仅采用常规吸入性糖皮质激素治疗,治疗组患儿在常规吸入性糖皮质激素治疗的基础上,给予细菌溶解产物治疗(3.5 mg/d,每月10 d,连续3个月),连续随访1年,比较两组患儿治疗9个月、12个月时急性呼吸道感染发生次数、哮喘累计发作次数、喘息累计发作天数及鼻塞发作次数,记录两组患儿血液淋巴细胞亚群及用药后不良反应发生情况。结果治疗组患儿的急性呼吸道感染发生次数(2.89±1.07、4.30±1.06)低于对照组(3.50±1.282、5.00±1.262),差异具有统计学意义(P<0.01);治疗组患儿哮喘发作次数(0.36±0.65、0.44±0.71)低于对照组(0.68±1.12、1.00±1.62),差异具有统计学意义(P<0.01);治疗组鼻塞发作次数(0.36±0.65、0.45±0.78)低于对照组(0.36±0.65、0.76±0.98),差异具有统计学意义(P<0.01)。治疗组患儿3个月随访患儿血清CD3^+%、CD4^+%、CD4^+/CD8^+水平高于对照组CD3^+%、CD4^+%、CD4^+/CD8^+,差异具有统计学意义(P<0.01),但两组患儿的CD8^+%水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。细菌溶解产物治疗期间共报道5例不良事件,均轻微短暂,未导致受试药品停用。结论应用细菌溶解产物可以预防支气管哮喘儿童并发呼吸道感染,可显著减少患儿呼吸道感染发生次数、喘息发作次数、鼻塞发作次数和喘息累计发作天数,增强细胞免疫机能,且安全性较高。
- 杨芬华丽刘海沛何亚芳王一卉包军陈嫕
- 关键词：儿童支气管哮喘呼吸道感染细菌溶解产物淋巴细胞亚群
- IL-13R130Q多态性对支气管平滑肌细胞的功能影响
- <正>目的:探索IL-13R130Q多态性对支气管平滑肌细胞收缩、分泌、增殖和迁移功能的影响。方法:野生型及变异型IL-13重组蛋白,以不同浓度(1ng/ml,10ng/ml,50ng/ml,100ng/m)刺激原代培养...
- 何亚芳鲍一笑包军华丽刘全华
- 文献传递
- IL-13R130Q多态性分子构象及功能研究
- <正>目的:探讨IL-13R130Q多态性对其蛋白分子构象及功能的影响。方法:本研究通过Uniprot软件获取IL-13的氨基酸序列及ID号,应用Project H叩e软件预测IL-13R130Q错义突变对氨基酸特性、蛋...
- 何亚芳鲍一笑包军华丽刘全华
- 文献传递
- 美金胺对缺血诱导未成熟脑白质谷氨酸异常信号传输的体内外阻断研究被引量：3
- 2020年
- 目的探讨非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂美金胺对缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输的体内外阻断效果。方法制备2日龄新生大鼠少突胶质细胞(OL)前体氧糖剥夺(OGD)细胞模型,分为对照组、OGD组及美金胺组。应用高效液相色谱仪测定OL前体胞外谷氨酸水平,流式细胞仪检测胞内钙离子浓度和OL前体凋亡率。制备缺血型脑室周围白质软化(PVL)动物模型,分为假手术组、PVL组及美金胺组。分别进行光镜下脑白质病理评估、免疫组织化学法检测脑白质髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性OL表达率及电镜下进行脑白质髓鞘形成状况评估。结果体外与对照组相比,OGD组OL前体胞外谷氨酸水平增高[(24.60±2.42)μmol/L比(9.49±1.08)μmol/L,t=9.28,P<0.01],胞内钙离子浓度显著增加[(32.9±6.9)%比(6.9±3.5)%,t=4.41,P<0.01],OL前体凋亡率亦明显增高[(24.77±2.05)%比(6.65±1.39)%,t=15.01,P<0.01]。经美金胺处理后,胞外谷氨酸水平[(14.70±1.70)μmol/L]、胞内钙离子浓度[(23.1±2.0)%]和OL前体凋亡率[(11.80±2.06)%]均显著降低,差异均有统计学意义(t=5.68、6.13、5.18,均P<0.01)。体内与假手术组相比,PVL组大鼠脑白质均呈中至重度病变,脑白质内MBP阳性OL表达率[(5.94±1.37)%比(15.40±3.22)%,t=4.63,P<0.01]明显降低,髓鞘数目(4.00±1.00比14.67±2.70,t=6.11,P<0.01)明显减少,髓鞘厚度[(33.83±3.21)nm比(79.67±6.45)nm,t=10.43,P<0.01]明显变薄。予美金胺处理后,脑白质病理(Z=88.479,P<0.01)、髓鞘数目(10.30±1.50,t=6.01,P<0.01)及髓鞘厚度[(57.21±4.05)nm,t=7.47,P<0.01]均显著改善,脑白质内MBP阳性OL表达率[(11.02±1.35)%,t=4.40,P<0.05]亦明显增高。结论缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输是发生缺血性PVL的重要途径,美金胺可有效阻断此异常信号传输,有望为早产儿缺氧缺血PVL的防治提供新途径。
- 何亚芳张建华陈惠金钱龙华
- 关键词：美金胺缺血谷氨酸
