钱龙华 作品数:77 被引量:253 H指数:9 供职机构: 上海市儿科医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市教委科研基金 上海市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
缺血启动脑白质损伤新生大鼠室管膜下区和白质的胶质源性内在修复功能 被引量:1 2013年 目的探讨缺血启动脑白质损伤新生大鼠室管膜下区(SVZ)和白质途径对损伤白质的内源性自我修复功能。方法建立5日龄脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠模型,随机分为PVL组和Sham组,光镜和电镜下评估脑白质病理和髓鞘形成,TUNEL法观察脑白质细胞凋亡,5-溴脱氧尿核苷(Brdu)示踪以及免疫荧光共标记技术观察SVZ和白质胶质源性祖细胞的激活、增殖、迁移和分化情况。结果建模后第7和21天,PVL组大鼠脑室周围白质的凋亡细胞数较Sham组增加,差异均有统计学意义(P<0.05);PVL组的脑白质均呈现轻度或重度病变;PVL组脑白质内髓鞘形成数目以及髓鞘厚度亦低于Sham组,差异均有统计学意义(P均<0.01)。PVL组在各时段的NG2+祖细胞和BrdU+(源自SVZ)以及GPR17+(源自白质)的O4+少突胶质细胞(OL)前体均较Sham组明显增多,差异均有统计学意义(P均<0.05);建模第7天,PVL组的GPR17+不成熟OL和成熟OL均未能检测到,代之为BrdU+不成熟OL和成熟OL;直至建模第21天,PVL组的不成熟OL和成熟OL一直呈低水平状态,低于Sham组(P均<0.05)。结论缺血可诱导PVL大鼠脑SVZ和白质这两条途径的胶质源性祖细胞激活和出现明显增殖,并沿OL系细胞分化和迁移至脑白质的损伤部位进行修复,但最终仅有极少量新生细胞能分化为未成熟和成熟OL。推测有限的内源性修复作用可能与不良的脑微环境密切相关。 李文娟 毛凤霞 陈惠金 钱龙华关键词:脑室周围白质软化 白质 5-溴脱氧尿核苷 G-蛋白偶联受体 经脑室神经干细胞移植治疗脑室周围白质软化新生大鼠电镜下脑病理评估 被引量:6 2008年 目的对经脑室植入神经干细胞(NSCs)的脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠进行电镜下脑病理和髓鞘形成评估,探讨NSCs移植对治疗早产儿PVL的可行性,以及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对NSCs治疗PVL的影响。方法采用颈部正中切开双侧颈总动脉结扎法制备PVL模型。采用孕14 d SD大鼠大脑皮质制备NSCs。2日龄新生大鼠随机分为PVL对照组(PVL组),PVL加NSCs移植组(PVL加NSCs组),PVL加NSCs移植及GDNF组(PVL加NSCs加GDNF组),假手术对照组(Sham组),Sham加NSCs移植组(Sham加NSCs组),以及Sham加NSCs移植及GDNF组(Sham加NSCs加GDNF组)。NSCs移植组将NSCs调整为5×107L-1,将2μL移植液以0.5μL/min注入侧脑室内。GDNF干预组以100μg/L GDNF加入NSCs移植液中注入侧脑室。对2日龄PVL新生大鼠在建模后72 h进行经脑室NSCs移植,分别于移植第21天行电镜下脑病理和髓鞘形成评估。结果移植第21天,电镜显示,PVL组可见部分神经元固缩变形,细胞器减少,罕见髓鞘形成。PVL加NSCs组皮质部位神经元形态基本正常,脑白质内髓鞘形成明显增加。PVL加NSCs加GDNF组皮质改善以及髓鞘形成增多情况较PVL加NSCs组则更为明显。假手术各组未见明显变化。结论经脑室NSCs移植对早产儿PVL具有很大的治疗潜力,GDNF可能具有增强NSCs的治疗作用。 贺月秋 陈惠金 钱龙华 陈冠仪关键词:脑室周围白质软化 神经干细胞 细胞移植 电镜 髓鞘形成 经脑室神经干细胞移植对脑室周围白质软化新生大鼠的脑病理评估 被引量:14 2008年 目的对经脑室植入神经干细胞(NSCs)的脑室周围白质软化(Periventricular leukolamacia,PVL)新生大鼠进行光镜下脑病理评估,探讨NSCs移植对治疗早产儿PVL的可行性。方法采用E14胎鼠大脑皮层制备NSCs。2日龄新生大鼠随机分为PVL对照组(PVL组),PVL+DMEM/F12培养基对照组(PVL+DMEM/F12组),PVL+神经干细胞(NSCs)移植组(PVL+NSCs组),假手术对照组(Sham组),Sham+DMEM/F12培养基对照组(Sham+DMEM/F12组),Sham+NSCs移植组(Sham+NSCs组),每组18~21只。对2日龄PVL新生大鼠在建模后72h进行经脑室NSCs移植,分别于移植后7,14,21d进行光镜下脑病理评估。结果随着移植后时间的增加,脑白质病变呈进一步改善。移植后21d光镜下病理证实,未移植组脑白质呈轻度和重度病变各占50%,神经元病理评分为1.28±0.86。移植组则有30%白质完全正常,轻度和重度病变各占40%和30%,神经元病理评分为0.32±0.16,两组在脑白质病变程度以及神经元病理评分之间的差异均呈非常显著性意义(x^2=10.7,P〈0.01;F=29.664,P〈0.01)。结论经脑室外源性NSCs移植可明显改善脑白质的病理损伤。经脑室NSCs移植对早产儿PVL具有很大的治疗潜力,为今后成功防治早产儿这一最常见的脑损伤顽症提供了新的可行性途径。 贺月秋 陈惠金 钱龙华 陈冠仪关键词:脑室周围白质软化 神经干细胞 细胞移植 病理 新生大鼠 蛙皮素对新生兔胃肠形态及细胞增殖的调节研究 2001年 目的 探讨蛙皮素对新生兔胃肠形态学及胃肠粘膜细胞增殖的调节作用。 方法 新生兔 2 4只 ,随机分为蛙皮素大、小剂量 [15μg/ (kg· d)及 30μg/ (kg· d) ]实验组及对照组 ,每组 8只 ,应用图像分析技术及电子显微镜检测新生兔胃肠形态学变化 ,并应用免疫组织化学技术测定胃肠粘膜上皮细胞增殖率。 结果 (1)新生兔大、小剂量组十二指肠绒毛高度分别为 (5 2 0± 76 )、(5 13±31)μm,较对照组的 (379± 44 )μm显著增高 (P <0 .0 0 1) ;空肠绒毛高分别为 (5 12± 37)、(4 2 7± 5 4)μm ,较对照组的 (372± 2 9)μm显著增高 (P<0 .0 5 ) ;回肠绒毛高度分别为 (4 6 8± 138)、(5 2 0± 112 )μm ,较对照组的 (2 5 3± 6 0 )μm显著增高 (P<0 .0 5 )。 (2 )蛙皮素能够使肠粘膜上皮细胞更为成熟 ,且胃肠粘膜细胞增殖率亦显著增加 (P<0 .0 5 )。 结论 蛙皮素在一定程度上能够促进胃肠形态发育 。 李振彪 吴圣楣 钱龙华关键词:铃蟾肽 胃肠系统 细胞分裂 新生兔 蛙皮素 细胞增殖 丙型肝炎病毒母婴垂直传播的研究 被引量:2 1999年 丙型肝炎病毒(HCV)的主要传播途径是经输血或使用血制品,但有50%的HCV感染者无明显受血史,表明HCV有其他传播途径。我们于1993年3月至1995年6月对8046例孕妇及其所分娩的4287例婴儿进行了HCV母婴传播的研究,现报告如下。一、资料与... 敖黎明 钱丽清 张东华 金根娣 张东华 蒋明华 金根娣 钱龙华 吴圣楣关键词:丙型肝炎病毒 母婴传播 脑缺氧缺血对GLUT1和GLUT3合成的影响 被引量:16 2004年 目的 探讨脑缺氧缺血 (HI)对葡萄糖转运蛋白 1(glucosetransporter 1,GLUT1)和葡萄糖转运蛋白 3(glucosetransporter 3,GLUT3)合成的影响。方法 在成功建立了缺氧缺血新生大鼠模型的基础上 ,应用免疫组化方法检测缺氧缺血新生大鼠脑内海马和皮质部位GLUT1和GLUT3的合成情况。结果 正常情况下 ,海马和皮质部位GLUT1和GLUT3的合成量随日龄增加而增高。海马部位的合成量高于皮质部位 ;缺氧缺血可引起GLUT1和GLUT3的合成增加 ,HI后 2 4h时达到高峰 ,其后呈下降趋势 ,尤其是GLUT3在HI后 7d降至极低水平。皮质部位的合成量高于海马部位。 结论 HI可调控脑内GLUT1和GLUT3水平 ,使其在HI后短期内合成增高 ,以增加脑内葡萄糖的转运 ,适应无氧酵解增加的需要。 杨友 陈惠金 钱龙华 蒋明华关键词:脑缺氧缺血 GLUT1 GLUT3 葡萄糖转运蛋白1 葡萄糖转运蛋白3 新生大鼠 未成熟脑白质缺血性损伤和谷氨酸异常信号传输 被引量:4 2019年 目的探讨缺血诱导谷氨酸异常信号传输对未成熟脑白质的损伤作用。方法分别制备2日龄新生大鼠少突胶质细胞(OL)前体氧糖剥夺(OGD)细胞模型和缺血型脑室周围白质软化(PVL)动物模型。于OGD后24小时,收集细胞及上清液,应用高效液相色谱仪测定OL前体胞外谷氨酸浓度,流式细胞仪检测胞内钙离子浓度以及OL前体凋亡率。新生大鼠于造模后第5天处死取脑,分别进行光镜下脑白质病理评估、免疫组化法检测髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性成熟OL百分比以及电镜下脑白质髓鞘化评估。结果体外与无氧糖剥夺的正常组OL前体相比,OGD组OL前体胞外谷氨酸呈大量蓄积(P<0.01),胞内钙离子浓度显著增加(P<0.01),OL前体的凋亡率和坏死率亦明显增高(P<0.01,P<0.05)。体内与假手术(Sham)组正常新生大鼠相比,PVL组所有大鼠脑白质均显现轻度或重度的病理改变,脑白质内MBP阳性成熟OL明显减少,髓鞘亦形成不良,表现为髓鞘数目明显减少和髓鞘厚度明显变薄(P均<0.01)。结论未成熟脑白质具有与成熟脑白质相似的谷氨酸信号传输特点。缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输。 何亚芳 张建华 陈惠金 钱龙华关键词:缺血 尿苷二磷酸葡萄糖促进未成熟脑白质内在修复潜能的体内研究 被引量:1 2013年 目的探讨体内应用尿苷二磷酸葡萄糖(UDP糖)对未成熟脑白质内在修复潜能的促进作用。方法 5日龄大鼠随机分为Sham组、脑室周围白质软化(PVL)组和UDP组,Sham组为假手术组,PVL组和UDP组建立PVL模型,UDP组缺氧后即刻经腹腔一次性注射UDP糖2000mg/kg。应用免疫荧光三标技术检测体内新生祖细胞的增殖和分化情况,末端转移酶标记技术(TUNEL法)观察脑白质细胞的凋亡情况,并分别于建模后7 d及21 d进行光、电镜脑白质病理和髓鞘形成情况评估。结果 UDP组白质新生神经元-神经胶质2型抗原(NG2+)阳性祖细胞数、新生少突胶质细胞前体标记物(O4+)阳性、少突胶质细胞(OLs)前体、环核苷磷酸二酯酶(CNPase+)阳性、不成熟OL和髓鞘碱性蛋白(MBP+)阳性、成熟OL数均多于同时段PVL组,差异有统计学意义(P均<0.05);白质凋亡细胞数、光镜下病理改变、白质髓鞘形成个数及髓鞘厚度均优于PVL组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论体内应用UDP糖能明显促进白质胶质祖细胞的激活、增殖及进一步分化和成熟,并能明显降低白质新生细胞凋亡率,改善脑白质病变和髓鞘形成。 毛凤霞 陈惠金 钱龙华 李文娟关键词:脑室周围白质软化 脑白质 少突胶质细胞 一氧化氮与小儿系膜增殖性肾小球肾炎的相关研究 被引量:1 1998年 本研究探讨一氧化氮(NO)与小儿系膜增殖性肾小球肾炎(MsPGN)发病的关系。本组系膜增殖性肾小球肾炎28例,对照组25例,采用重氮化反应法测定MsPGN患者血清、尿中NO代谢产物水平。实验结果证明,MsPGN组血中NO水平与对照组无明显差异,但尿中NO水平明显低于对照组,MsPGN患者肾组织内产生NO能力处于抑制或缺陷状态。 陈敏怡 何威逊 陈难 钱龙华 吴圣楣关键词:系膜增殖性 肾小球肾炎 一氧化氮 儿童 宫内至断乳前持续被动吸烟幼鼠脑组织凋亡相关基因的表达 2001年 目的 探讨不同浓度香烟暴露对宫内至断乳前持续被动吸烟幼鼠脑组织凋亡相关基因BaxmR NA及Bcl- 2mRNA相对表达量的影响。方法 SD雌鼠于交配后第 2天 ,入低、中、高 3种香烟浓度的被动吸烟箱中 ,每日 5h ,待其自然分娩 ,幼鼠置与宫内相同香烟浓度的被动吸烟箱中 ,每日 5h ,至 2 1d断乳。用快速竞争性RT -PCR法测定幼鼠脑组织BaxmRNA及Bcl- 2mRNA的相对表达量。结果 各组幼鼠脑组织BaxmRNA相对表达量 :对照组 0 .3 1,低浓度被动吸烟组 0 .4 7,中浓度被动吸烟组 0 .5 5 ,高浓度被动吸烟组 0 .60 ,中浓度及高浓度被动吸烟组幼鼠脑组织BaxmRNA的相对表达量明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;各组Bcl- 2mRNA变化不显著 (P >0 .0 5 )。结论 幼鼠脑组织凋亡启动基因BaxmRNA相对表达量的增高提示细胞凋亡在宫内至断乳前持续被动吸烟幼鼠脑损害机制中可能起一定作用。 孟菂 吴圣楣 沈永年 钱龙华关键词:被动吸烟 脑组织 组织凋亡