黄湘
- 作品数:108 被引量:461H指数:11
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗人hnRNP A1单克隆抗体的制备及在颅咽管瘤组织中的应用被引量:1
- 2008年
- 目的制备核不均一核糖核蛋白A1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1)的单克隆抗体,探讨hnRNP A1蛋白的生物学功能。方法利用重组hnRNP A1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗hnRNPA1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA、Western Blot和免疫组织化学实验等方法分别对其效价和特异性进行鉴定。结果成功地建立了3株稳定分泌抗hnRNPA1的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为E006、E009和E012。3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。3株单克隆抗体通过组织化学实验和Western Blot实验都能特异性地结合真核细胞内源性的hnRNPA1蛋白。结论获得了效价高、特异性好的抗hnRNP A1蛋白的单克隆抗体,这为进一步研究hnRNP A1的生物学功能及它在癌发生事件中的作用奠定了基础。
- 王穗海赵玉梅黄湘潘华政李明姚小艳
- 关键词:HNRNPAL抗体单克隆组织化学
- 血红蛋白电泳联合地中海贫血基因检测对地中海贫血患者的诊断价值被引量:14
- 2017年
- 目的探讨血红蛋白电泳联合地中海贫血基因检测在地中海贫血患者临床诊断中的应用价值。方法收集2015年2月至2016年11月期间来我院接受婚检的11069对夫妇双方标本,先进行血常规检测,若夫妇一方MCV≤82fl或MCH≤27pg,则夫妇双方均进行血红蛋白电泳分析,若双方血红蛋白电泳结果均异常,则均接受地中海贫血基因检测,观察研究对象血红蛋白电泳检测的HBA值、HBA2值、HBF值以及地中海贫血基因检测结果。结果经血常规和血红蛋白电泳初筛后,共有466对夫妇接受地中海贫血基因检测,其中580例为α-地中海贫血携带者,夫妇双方均为携带者45例,166例为β-地中海贫血携带者,夫妇双方均为携带者9例。经血红蛋白电泳检测发现,α-地中海贫血患者和β-地中海贫血患者的HBA值、HBA2值均低于阴性者(P<0.05),HBF值高于阴性者(P<0.05)。结论血红蛋白电泳用于诊断地中海贫血具有良好的应用价值,但与地中海贫血基因检测联合应用,能够进一步提高地中海贫血的检出率,减少重型地贫的出生。
- 张艳芳谢丰华万志丹黄湘
- 关键词:血红蛋白电泳地中海贫血基因检测血常规
- pCDNA3.1-MT2A真核表达载体的构建及亚细胞定位被引量:3
- 2014年
- 目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。
- 谭家余陈敬林黄湘李冬秀袁春雷万志丹
- 关键词:细胞定位
- miR-34a在子宫内膜癌中的表达及临床意义被引量:3
- 2016年
- 目的分析mi R-34a在子宫内膜癌中的表达及临床意义,为临床诊断及治疗提供参考。方法随机选取该院2010年3月—2014年12月期间诊治的子宫内膜癌患者50例进行研究,分析mi R-34a与子宫内膜癌患者临床分期及预后的相关性。以医院同期子宫肌瘤切除子宫患者50例为对照组。结果正常子宫内膜组织中mi R-34a的阳性率为92.0%,子宫内膜癌组织mi R-34a的阳性率为26.0%,差异有统计学意义(P<0.05);随着患者临床分期的增加,mi R-34a的表达逐步降低(P<0.05),且mi R-34a的表达与患者的预后呈明显的正相关性。结论 mi R-34a对子宫内膜癌临床诊断具有重要的参考价值,且与患者临床分期和预后呈明显负相关性。
- 孙广范栾峰颜友良黄湘尚雪
- 关键词:子宫内膜癌微小RNA预后
- PSMA7对A549细胞表面黏附分子表达的影响被引量:1
- 2014年
- 目的探讨PSMA7表达量的变化对A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44表达的影响。方法采用流式细胞仪分别检测高表达PSMA7的A549细胞[pcDNA3.1(-)/PSMA7组]和低表达PSMA7的A549细胞(shPSMA7组)表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44的表达情况。结果与高表达阴性对照组[pcDNA3.1(-)组]相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组的ICAM-1(t=86.325,P=0.000)和VCAM-1(t=16.337,P=0.000)的表达量均显著降低,CD44表达量则无明显变化(t=-0.545,P=0.615),而与低表达阴性对照组(shNC组)相比,shPSMA7组ICAM-1(t=-119.827,P=0.000)和VCAM-1(t=-26.68,P=0.000)表达量均显著增高,CD44表达量则无明显变化(t=-848,P=0.444)。与pcDNA3.1(-)组相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组穿膜侵袭细胞的数量明显减少(t=3.553,P=0.024),而shPSMA7组明显高于shNC组(t=-3.207,P=0.033)。结论高表达或干扰PSMA7可影响A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1的表达,提示PSMA7可能因此参与肺腺癌细胞的侵袭和转移。
- 黄湘王莹袁春雷谭家余
- 关键词:A549细胞黏附分子
- 广东佛山地区19297名孕妇脊髓性肌萎缩症携带者筛查及产前诊断被引量:9
- 2022年
- 目的对广东佛山地区19297名孕妇进行脊髓性肌萎缩症(SMA)突变的携带者筛查,探讨佛山地区人群运动神经元生存基因1(SMN1)突变的情况。方法采用实时荧光定量PCR技术对19297名孕妇进行SMN1基因第7和第8外显子(E7、E8)缺失检测,对结果为阳性的孕妇配偶进行基因缺失检测,为双方同为携带者的夫妇进行产前SMN1基因分析,并采用多重连接探针扩增技术(MLPA)对胎儿基因结果进行验证。结果在19297例孕妇中,共检出SMA携带者286例(SMN1基因E7、E8杂合缺失258例,单纯E7杂合缺失28例),携带者频率为1.48%。检出双方同为SMA携带者的夫妇6对,经产前诊断基因分析,最终检出SMN1基因E7、E8纯合缺失胎儿1例,SMN1基因E7、E8杂合缺失胎儿4例,正常基因型胎儿1例,与MLPA复核结果一致。结论阐明广东佛山地区SMA突变的携带频率可为遗传咨询和产前诊断提供依据,并对高风险胎儿进行介入性产前基因诊断,可有效预防SMA患儿的出生,对出生缺陷防控具有重要意义。
- 周成宋春林黄湘陈淑芬巫福娟杨兴坤
- 关键词:脊髓性肌萎缩症产前诊断
- 兰州地区婴幼儿病毒性腹泻的分子流行病学研究
- 研究背景:腹泻病是一组多病原多因素引起的胃肠道疾病,为我国儿童的高发病,对儿童健康危害极大,是造成小儿营养不良、生长发育障碍及死亡的重要原因之一。在小儿腹泻病中以细菌和病毒感染性腹泻的发病率为最高。近年来,在引起病毒性腹...
- 黄湘
- 关键词:腹泻婴幼儿轮状病毒杯状病毒星状病毒分子流行病学
- 文献传递
- 兰州地区婴幼儿轮状病毒腹泻的分子流行病学研究被引量:12
- 2006年
- 目的通过分子流行病学调查研究兰州地区婴幼儿轮状病毒(RV)腹泻的分型特点。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR),对2003年7月~2004年6月兰州地区收集的624例婴幼儿腹泻粪便标本中的271份进行轮状病毒病原检测。并对阳性标本进行分型。结果ELISA法RV阳性率为56.46%(153/271),阳性率与性别无关。不同年龄段的感染率以6~11个月和12-23个月年龄段最高,分别为57.38%、63.33%,但各年龄段间无显著差异。不同月份的感染率具有显著性差异,发病高峰在10、11月份,分别为86.27%和73.81%。在ELISA阳性标本中RT—PCR法检出G394例(61.44%),G24例(2.61%),G93例(1.96%),未发现G1、G4型和混合感染。52例(33.99%)未能分型。G分型阳性标本中检出P[8]型28例(40.58%)。其他未能分型。结论轮状病毒是兰州地区婴幼儿非细菌性腹泻的主要病原,其流行的主要血清型为G3型。
- 黄湘金玉方肇寅谭家余王端可谢华萍章菁
- 关键词:腹泻婴幼儿轮状病毒分子流行病学
- PSMA7在多种肿瘤细胞的表达及意义被引量:3
- 2009年
- 目的了解人蛋白酶体α亚基PSMA7在多种肿瘤细胞的表达情况。方法通过Western blot检测比较PSMA7在不同肿瘤细胞中的表达水平。结果Westernblot检测显示PSMA7在所有检测细胞中广泛表达。与人胚肾293T细胞(正常细胞对照)相比,PSMA7在A549,BACP-37,HeLa,HO-8910,MCF-7和NCI-H446细胞中差异无显著性(均P>0.05),而在Lovo中表达降低(P<0.05),SW480中增高(P<0.05)。与人chang肝细胞(正常细胞对照)相比,PSMA7在肝癌细胞系Bel7402和QGY7703中差异无显著性(P>0.05),在SMMC7721和HepG2中明显增高(P<0.05)。结论PSMA7在肿瘤细胞中广泛表达,具有一定的组织特异性。
- 谭家余罗雅玲黄湘孙海霞
- 关键词:肿瘤细胞WESTERNBLOT
- 一种抗人蛋白RN181的单克隆抗体及杂交瘤细胞株3952与试剂盒
- 本发明公开了一种抗人蛋白RN181的单克隆抗体及杂交瘤细胞株3952与试剂盒。一种杂交瘤细胞株,其保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC3952。一种抗人蛋白RN181的单克隆抗体,由上述杂交瘤细胞株...
- 李明王穗海黄湘李月董慧敏