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黄丹: 作品数：15 被引量：55H指数：4; 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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腹壁巨大切口疝一期并肠造口还纳修补治疗体会被引量：2: 2017年; 目的总结腹壁巨大切口疝一期并肠造口还纳修补的治疗体会,探讨存在污染风险切口一期疝修补的可行性。方法腹壁巨大切口疝并肠道单腔造口患者7例,均行一期肠造口还纳和切口疝无张力修补术,其中置入补片4例。结果术后均3~5天排气,原造口处切口感染2例,排便不规律6例,术后半年出现不全性肠梗阻1例,原造口处皮肤凹陷5例,均无肠瘘、腹腔间隔室综合征等并发症。平均住院时间(22±5)天,现随访1年,均诉满意。结论肠造口还纳并腹壁巨大切口疝一期手术安全可行,有一定污染风险的切口并不是一期疝修补以及补片应用的绝对禁忌证。; 李昂黄丹魏欣曹志新杨传永; 关键词：切口疝一期修补

共转染CDK1、CDK2siRNA对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响: 2009年; 目的研究共转染CDK1、CDK2siRNA同时抑制CDKI、CDK2蛋白表达对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响，探讨细胞周期主要调控分子在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象，用脂质体lipofectamine2000同时转染CDKl和CDK2siRNA。在转染后48、60h收集细胞，用Western印迹检测CDKl、CDK2蛋白的表达，AnnexinV／PI检测转染细胞的凋亡，流式细胞术DNA含量检测分析细胞周期。转染细胞进行瑞氏一姬姆萨染色（Wright—Giemsa）后在显微镜下观察其形态变化i结果共转染CDKl、CDK2siRNA后48和60h，Western印迹结果显示CDKl和CDK2蛋白的表达都同时降低。共转染CDKl、CDK2siRNA后，细胞周期S期和G1／M期比例与对照相比有明显增加；共转染细胞经瑞氏一姬姆萨染色后在显微镜下可见双核或多核细胞增多；AnnexinV／PI检测结果显示共转染CDK1、CDK2siRNA的细胞在48和60h细胞凋亡率与对照相比有显著的升高。结论siRNA干扰导致的CDKI、CDK2表达同时降低不仅导致细胞周期s期和G1／M期的阻滞，也诱导了肿瘤细胞的凋亡。; 肖徽魏欣于东东徐向上黄丹王贵华李小兰陶德定胡俊波龚建平; 关键词：细胞周期依赖性蛋白激酶细胞周期阻滞肿瘤细胞凋亡

紫外线诱导的Molt-4细胞旁观者效应的研究被引量：1: 2008年; 目的探讨紫外线诱导的凋亡细胞是否具有旁观者效应。方法将Molt=4细胞分为阴性对照组、DID对照组、空白对照组和细胞密度分别为2×10^5／ml和8×10^5／ml的两个实验组。每个实验组细胞被平分为两部分：一部分作为效应细胞，被标记示踪剂DID染料并予以UV照射40s；另一部分作为旁观者细胞，不经任何特殊处理。细胞联合培养共24h，每4h收获1次。运用Annexin V—FITC／PI法检测旁观者细胞的细胞凋亡率，激光共聚焦显微镜检测旁观者细胞的形态学变化。结果阴性对照组、DID对照组和空白对照组在0、4、8、12、16、20和24h各个时间点细胞凋亡率均小于5％。2×10^5／ml实验组旁观者细胞凋亡率在0～24h分别为3．47％、4．58％、7．32％、10．41％、14．82％、19．37％和25．66％。8×10^5／ml实验组旁观者细胞凋亡率在相应时间点分别为3．76％、5．77％、10．17％、14．71％、18．92％、32．28％和38．90％。与对照组相比，实验组旁观者细胞凋亡率随时间的延长而明显升高，且旁观者细胞凋亡率随细胞密度增高而增加。对旁观者细胞进行激光共聚焦显微镜检测，发现一些经典的凋亡和坏死表现，如细胞染色体浓集、磷脂酰丝氨酸翻转、凋亡小体形成、细胞崩解等。结论经紫外线照射的Molt-4细胞对旁观者细胞具有旁观者效应，且该效应与细胞密度相关。; 黄丹杨长永陶德定冷彦胡俊波龚建平; 关键词：旁观者效应紫外线细胞凋亡流式细胞术

奥沙利铂诱导人骨髓造血细胞凋亡及DNA损伤修复被引量：3: 2015年; 目的探讨在细胞毒药物奥沙利铂诱导下,人骨髓CD34^+前体造血细胞与CD34^-成熟造血细胞发生细胞凋亡及DNA损伤修复信号通路上相关基因表达的情况。方法采用免疫磁珠法分选出16例人骨髓单个核细胞中的CD34^+及CD34^-细胞,并应用流式细胞术检测其纯度。用奥沙利铂(终末浓度为10μg/mL)诱导2种细胞凋亡,检测诱导不同时间的2种细胞凋亡率的差异。提取细胞RNA,并利用基因芯片技术,分析比较药物诱导前后的CD34^+及CD34^-细胞中DNA损伤修复信号通路相关基因的表达情况。结果16份骨髓样本CD34^+阳性率为(4.75±1.82)%;免疫磁珠法分选后,流式细胞术检测CD34^+细胞的纯度为(81.24±5.68)%,所得CD34^-细胞的纯度为(97.67±1.21)%。CD34^+细胞在经过奥沙利铂诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(27.44±4.12)%、(53.58±7.89)%,(84.65±6.20)%,CD34^-细胞在诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(18.40±3.07)%、(39.11±5.28)%、(71.65±7.73)%,各时间点2种细胞的凋亡率差异均有统计学意义(均P<0.05)。基因芯片结果显示,在加入奥沙利铂诱导前,CD34^+细胞与CD34^-细胞表达差异2倍以上的基因有9种,其中前者有7种基因表达高于后者,2种基因表达低于后者,在奥沙利铂诱导8h后,CD34^+细胞与CD34^-细胞表达差异2倍以上的基因有14种,均为前者高于后者。结论在奥沙利铂诱导下,骨髓前体CD34^+细胞和成熟的CD34^-细胞相比,其DNA损伤修复系统相关基因表达水平较高,但更易于发生细胞凋亡。; 邹游黄丹李小兰肖徽陶德定胡俊波龚建平; 关键词：CD34 细胞凋亡 DNA损伤奥沙利铂

人胆囊癌SP细胞的分离及ABCG2和Oct-4的表达被引量：4: 2008年; 目的探索在人胆囊癌细胞系中是否存在具有干细胞特性的SP细胞（side population cells）以及SP细胞、非SP细胞、GBCSD细胞系之间在耐药基因ABCG2和胚胎干细胞表面标志Oct-4表达方面的差异性。方法采用FACS（流式激活细胞分选）技术分选出人胆囊癌SP细胞和非SP细胞，通过RTPCR、Western blot以及流式技术来检测SP细胞、非SP细胞以及GBC—SD细胞系在ABCG2和Oct-4表达方面的差异情况。结果人胆囊癌GBC—SD细胞系中存在着具有干细胞潜能的SP细胞，其所占的比例为（0．64±0．08）％。并且ABCG2在胆囊癌SP细胞中呈现出高表达的状态[（89．56±3．86）%]．在非SP细胞中几乎不表达[（1．32±0．49）％]，两者之间的差异具有统计学意义（P〈0．05）．在GBCSD细胞系中呈弱表达[（12．37±1．61）％]。Oct-4在三种细胞中的表达分别为：（94．87±1．40）％、（88．16±2．34）％、（90．17±1．61）％，三者之间差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论人胆囊癌的起源与肿瘤干细胞密切相关并且在胆囊癌细胞系中存在着具有干细胞特性并且高表达耐药基因ABCG2的人胆囊癌SP细胞。; 胡均秦仁义黄丹陈敏王敏杜志勇刘文松; 关键词：胆囊肿瘤肿瘤干细胞 OCT-4

三参数流式细胞术分析紫外线诱导的MOLT-4细胞旁观者效应: 2009年; 目的应用三参数流式细胞术探讨紫外线（UV）诱导的MOLT4细胞的旁观者效应（BSE）。方法以人类T细胞白血病细胞株MOLT-4为对象，以紫外线为诱导剂。将经UV照射的MOLT4细胞与DiD荧光阳性的MOLT-4细胞联合培养作为试验组，未经任何打击的DiD阳性细胞为对照组。用FITC—AnnexinV／PI法检测细胞凋亡率，用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）观察其荧光及形态学改变，以检测其旁观者效应。结果实验组中旁观者细胞凋亡及坏死比例在0、2、4、8、12、18、24h分别为6．84％、8．09％、9．88％、13．50％、22．50％、30．99％、37．93％。而对照组为4．28％、4．93％、5．22％、5．39％、6．54％、6．77％、7．14％。试验组旁观者细胞的凋亡及坏死比例随着时间的延长而逐步增高。LSCM观察可见部分旁观者细胞出现磷脂酰丝氨酸（PS）翻转、核边集、核浓集、核碎裂等形态学改变。结论在MOLT-4细胞株，用非离子射线——UV诱导的凋亡细胞对联合培养的旁观者细胞具有旁观者效应。; 黄丹王尊张鹏陶德定胡俊波龚建平; 关键词：旁观者效应流式细胞术脱噬作用紫外线

痔手术严重并发症19例被引量：3: 2017年; 目的痔手术后的严重并发症预防及治疗。方法对2010年6月至2016年6月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治及院外会诊19例痔手术后的严重并发症病人进行回顾性分析。结果 19例痔手术后严重并发症病人,包括5例吻合口裂开,4例直肠穿孔,6例术后大出血(其中2例合并血友病),4例肛门狭窄,均获治愈。结论痔手术虽然相对简单,但术后并发症并不少见,增加对疾病的理解,及时和恰当的处理可以避免病症的加剧甚至生命危险。; 黄丹魏欣吴剑宏罗学来邹游杨传永曹志新; 关键词：痔上黏膜环形切除术吻合口瘘直肠穿孔

人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立被引量：3: 2007年; 目的运用人重组Fas配体(rhFasL),体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型,为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台。方法以白血病细胞系(Molt-4和Jurkat细胞系)和进入细胞周期的外周血淋巴细胞为载体,用人重组Fas配体诱导细胞6～36h后,用亚G1峰法、传统的AnnexinⅤ/PI和改良后的API法进行标记并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果改良后的API法显示人重组Fas配体诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性及始动位点;传统的AnnexinⅤ/PI显示在将细胞凋亡控制在10%～20%并以早期细胞凋亡为主时诱导的模型最典型;亚G1峰法只能检测晚期细胞凋亡和进行DNA直方图分析。结论人重组Fas配体体外诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期,联合应用传统的Annex-in-Ⅴ/PI及改良后的API法能为建立稳定而又典型的体外Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型提供技术支撑。; 何小军肖田王尊葛军娜黄丹徐惠婷李小兰肖徽陶德定龚建平; 关键词：细胞周期细胞凋亡流式细胞术

双参数流式细胞术检测Molt-4和Jurkat细胞膜受体途径凋亡的始动位点被引量：1: 2010年; 目的：建立稳定的膜受体途径的细胞凋亡模型，探讨Cyclin／DNA双参数流式细胞术检测膜受体途径细胞凋亡的周期特异性的方法。方法：用典型的受体途径诱导剂TNF-α分别处理Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞；应用膜联蛋白V（AnnexinV）／碘化丙啶（PI）、API和Cyclin／DNA双参数流式细胞术等方法检测细胞凋亡。结果：AnnexinV／PI法检测早期凋亡细胞，早期凋亡率控制在8％～18％的周期特异性凋亡模型最典型；API法显示膜受体介导的细胞凋亡主要发生在细胞周期的G，期。Cyclin／DNA双参数流式细胞术显示受体途径的细胞周期特异性细胞凋亡的始动位点为G．早期。结论：应用AnnexinV／PI和API法能为建立稳定而典型的受体途径周期特异性细胞凋亡模型提供技术支撑；Cyclin／DNA双参数流式细胞术能够精确显示受体途径的细胞周期特异性细胞凋亡的始动位点。; 杨长永陈传波陶德定黄丹龚建平; 关键词：MOLT-4细胞 JURKAT细胞

膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系被引量：9: 2006年; 背景与目的:线粒体介导的细胞凋亡大部分与细胞周期相关,但膜受体介导的细胞凋亡是否与细胞周期有关尚不清楚。本研究旨在观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞周期特异性,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。方法:用肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体分别处理指数生长期的Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞;应用AnnexinV/PI和API等方法,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期特异性。结果:处于静止期的外周血淋巴细胞对凋亡诱导剂不敏感,凋亡率是6%～8%。Molt-4、Jurkat细胞以及加入植物血凝素刺激的外周血淋巴细胞经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后出现了明显的细胞凋亡,凋亡率是15%～28%。膜受体介导的细胞凋亡主要发生在细胞周期的早G1期。结论:膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期相关,具有细胞周期特异性。; 杨长永谢大兴周毅黄丹龚建平; 关键词：膜受体细胞周期凋亡白血病 JURKAT细胞株外周血淋巴细胞

黄丹

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