陶德定
- 作品数：163 被引量：718H指数：14
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- Camptothecin(CPT)和Cytosine arabinoside(Ara-C)联合应用对MOLT-4细胞株周期特异性凋亡的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT— 4为模型 ,探讨作用于同一细胞周期的化疗药物Camptothecin(CPT)和Cytosinearabinoside(Ara C)联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点 (ckeckpoint)的影响。 方法 喜树碱 (CPT) ( 0 .2 5 μmol/L) ,阿糖胞苷 (Ara C) ( 1.0 0 μmol/L) ,及喜树碱 (CPT) ( 0 .2 5 μmol/L) +阿糖胞苷 (Ara C) ( 1.0 0 μmol/L)二药共同诱导急性早幼粒白血病细胞株MOLT 4细胞 4h ,分别采用激光共聚焦显微镜 (Confocal)观察其细胞的形态变化 ,采用Sub G1法 ,API法及cyclins/DNA双参数法 ,运用流式细胞术分析凋亡、凋亡细胞的周期时相性及CyclinE的表达规律。以Westernblot印迹法检测Bcl 2蛋白的表达。结果 喜树碱和阿糖胞苷联合应用时 ,凋亡细胞的数目明显增加 ,二者具有协同效应。发生凋亡的细胞大多数仍然是S期细胞。CyclinE的表达升高 ,bcl 2蛋白的表达降低。结论 作用于同一细胞周期的化疗药物CPT和Ara C联合应用时 ,具有协同效应但并不改变细胞周期的作用点(Checkpoint)。CyclinE和Bcl 2蛋白似乎在药物作用时起着关键性的调节作用 ,并对检测点的敏感性产生重要影响。
- 喻春钊吴丰华余源肖薇李小兰陶德定吴剑宏龚建平
- 关键词：化学疗法
- 孕妇外周血中胎儿细胞及胎儿DNA的检测被引量：4
- 2002年
- 目的 建立从孕妇外周血中分离有核红细胞 (NRBC)及DNA的可靠方法 ,并鉴定其来源。方法 对88例孕妇外周血分别通过密度梯度离心法 ,流式细胞术 (FCM )和荧光激活细胞分离技术 (FACS)分离NRBCs。应用套式PCR技术对 6 5例孕妇血浆DNA进行正常男性SRY基因检测。结果 ①NRBCs:2 7例样品经密度梯度离心 ,其中 14例分选到 1～ 10个NRBCs。FACS技术对 6 1例样品进行转铁蛋白受体阳性细胞 (CD71+ )分选 ,所有样品均有CD71+ 细胞 ,其浓度为 (0 35± 0 2 5 )× 10 -2 。②胎儿DNA :4 6例怀男胎孕妇血浆DNA中SRY基因检测出率为 6 5 2 2 % (30 / 4 6 ) ,怀女胎的 19例样品SRY基因未检出率为 94 74 % (18/ 19)。结论 从孕妇外周血中分选胎儿NRBCs和血浆中胎儿DNA的方法已取得较大进展。
- 陈汉平贺桂芳沈怡张汉凤陶德定马庭元
- 关键词：胎儿有核红细胞胎儿DNA产前诊断
- 奥沙利铂诱导人骨髓造血细胞凋亡及DNA损伤修复被引量：3
- 2015年
- 目的探讨在细胞毒药物奥沙利铂诱导下,人骨髓CD34^+前体造血细胞与CD34^-成熟造血细胞发生细胞凋亡及DNA损伤修复信号通路上相关基因表达的情况。方法采用免疫磁珠法分选出16例人骨髓单个核细胞中的CD34^+及CD34^-细胞,并应用流式细胞术检测其纯度。用奥沙利铂(终末浓度为10μg/mL)诱导2种细胞凋亡,检测诱导不同时间的2种细胞凋亡率的差异。提取细胞RNA,并利用基因芯片技术,分析比较药物诱导前后的CD34^+及CD34^-细胞中DNA损伤修复信号通路相关基因的表达情况。结果16份骨髓样本CD34^+阳性率为(4.75±1.82)%;免疫磁珠法分选后,流式细胞术检测CD34^+细胞的纯度为(81.24±5.68)%,所得CD34^-细胞的纯度为(97.67±1.21)%。CD34^+细胞在经过奥沙利铂诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(27.44±4.12)%、(53.58±7.89)%,(84.65±6.20)%,CD34^-细胞在诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(18.40±3.07)%、(39.11±5.28)%、(71.65±7.73)%,各时间点2种细胞的凋亡率差异均有统计学意义(均P<0.05)。基因芯片结果显示,在加入奥沙利铂诱导前,CD34^+细胞与CD34^-细胞表达差异2倍以上的基因有9种,其中前者有7种基因表达高于后者,2种基因表达低于后者,在奥沙利铂诱导8h后,CD34^+细胞与CD34^-细胞表达差异2倍以上的基因有14种,均为前者高于后者。结论在奥沙利铂诱导下,骨髓前体CD34^+细胞和成熟的CD34^-细胞相比,其DNA损伤修复系统相关基因表达水平较高,但更易于发生细胞凋亡。
- 邹游黄丹李小兰肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：CD34细胞凋亡DNA损伤奥沙利铂
- 高表达蛋白hSav1对人胚肾HEK293增殖能力的影响
- 2010年
- 目的 观察高表达人Salvadorl（hSav1）蛋白对人胚肾293（HEK293）细胞增殖的影响.方法 构建含有绿色荧光蛋白（GFP）的hSav1质粒GFP-N1-hSav1;将构建好的GFP-N1-hSav1质粒在脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染HEK293细胞,荧光显微镜下观察质粒转染效率;分别在转染后12、24、36、48 h通过噻唑蓝（MTT）比色法计算细胞增殖抑制率,抑制率=[（对照-空白）-（给药-空白）]/（对照-空白）×100%;转染后36 h加入5-溴-2＇-脱氧尿苷（BrdU）,通过其掺入比率来显示hSav1对细胞增殖的影响.结果 质粒GFP-N1-hSav1构建成功,转染效率为70%-80%左右,蛋白hSav1明显高表达;MTT结果显示转染质粒后12、24、36、48 h,高表达蛋白hSav1组的细胞增殖抑制率分别为2%、5%、15%、23%,而阴性对照分别为2%、3%、2%、2%;BrdU结果显示,在HEK293细胞中高表达蛋白hSav1后细胞增殖抑制率为（27.3±3.8）%,阴性对照组的细胞增殖抑制率为（12.9±5.3）%,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 在人胚肾HEK293中高表达蛋白hSav1可明显抑制细胞增殖能力.
- 李兆明董硕刘韦成蔡少鑫罗学来李小兰陶德定严群龚建平胡俊波
- 关键词：细胞增殖人胚肾细胞
- 鼠巨细胞病毒感染诱导小鼠精子凋亡及线粒体调控机制研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究鼠巨细胞病毒（MCMV）感染对小鼠精子凋亡的影响，探讨MCMV感染诱导小鼠精子凋亡的线粒体调控机制。方法建立小鼠睾丸MCMV急性感染模型（n=15），以正常小鼠作为对照（n=15），采用流式细胞术（FCM）与激光扫描共聚焦显微术（LCSM）对不同感染时段的小鼠附睾尾部成熟精子进行凋亡与线粒体膜电位的检测，同时应用电镜观察不同感染时段的精子线粒体超微结构的改变。结果MCMV感染第2天起精子凋亡率开始升高，第4天达最高值（39．3±1．0）％，随后逐渐下降（F=362．822，P〈0．05）。而感染第1天的精子线粒体膜电位增加至74．0±1．4，第2天开始下降至63．0±2．2，第4天降至最低40．2±2．3，随后缓慢回升（F=32．257，P〈0．05）。MCMV感染可引起精子线粒体超微结构的损伤，以感染第2～6天为重。结论生殖器官MCMV急性感染可诱导附睾尾部成熟精子的凋亡；精子线粒体主动参与并调控了精子的凋亡过程。
- 熊锦文熊承良李丹陈素华李小兰陶德定
- 关键词：精子凋亡线粒体
- 微量元素锌、铁、铬和铅对细胞端粒长度作用的研究
- 本文旨在通过研究锌、铁、铬和铅对正常肚细胞和肝癌细胞端粒长度的作用,探讨微量元素与衰老和肿瘤关系的生物学基础。实验以人肝细胞株L-02和肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,在细胞培养介质中分别补充80μmol/L硫酸...
- 刘琼胡德聪王红丁朝建姜亮陶德定徐辉碧
- 文献传递
- 5-氟尿嘧啶联合奥沙利铂对SW480细胞成瘤性及其Galectin-3表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合奥沙利铂对SW480细胞成瘤性及其对肿瘤中Galectin-3(半乳糖凝集素-3)表达的影响。方法以人结肠癌SW480细胞建立裸鼠移植瘤模型,实验分5-Fu组,奥沙利铂组,5-Fu+奥沙利铂组和注射等体积生理盐水的对照组。采用免疫组织化学方法检测移植瘤中Galectin-3的表达,以图像信号采集与分析系统进行图像扫描分析。结果 5-Fu组、奥沙利铂组和5-Fu+奥沙利铂组抑瘤率分别为30.53%、34.15%和67.22%;免疫组化显示给药组肿瘤组织中Galectin-3表达明显减弱,Galectin-3在联合用药组肿瘤组织中表达(28.875±7.491)较对照组(281.438±45.639)和单独用药组(157.644±33.721,150.682±25.539)明显减弱,图像灰度值统计分析显示差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 5-Fu和奥沙利铂可抑制肿瘤细胞生长,二者联用抑瘤作用增强。肿瘤的生长体积与Galectin-3的表达具有同向性,提示两者之间可能存在直接或间接的联系。
- 支国俊邹游刘韦成杨锐李小兰陶德定龚建平胡俊波严群
- 关键词：5-氟尿嘧啶奥沙利铂SW480细胞半乳糖凝集素-3
- 糖原累积病与丙氨酸转氨酶异常的关系:附10例报告被引量：4
- 1998年
- 糖原累积病是儿童肝脏肿大中相对常见的病因之一。一般认为其主要临床特征(Ⅰ型)是肝肿大、低血糖及代谢性酸中毒,而肝功能(主要指丙氨酸转氨酶,ALT)正常,但在临床实践中我们发现此类患儿ALT多数不正常。因此,搞清楚糖原累积病与ALT之间的关系,对于临床诊断及鉴别诊断是十分重要的。现将我们收治的lo例糖原累积病分析如下。
- 熊正明陶德定董永绥官阳
- 关键词：糖原累积病儿童丙氨酸转氨酶ALT
- 乙型肝炎病毒X基因对肝细胞凋亡的影响及其作用机制被引量：3
- 2006年
- 乙型肝炎病毒X基因（HBx）在HBV慢性感染导致肝硬化，原发性肝癌（HCC）的发生过程中，起着重要的作用。X连锁凋亡抑制因子（XIAP）为凋亡抑制蛋白（IAPs）家族成员，是一种强效的凋亡抑制蛋白，可以抑制半胱氨酸蛋白酶活性，阻断细胞凋亡过程。我们观察了肝癌细胞株以及正常肝细胞株在转染HBx前后凋亡抑制蛋白XIAP表达的差异，了解和分析HBx对不同肝细胞系细胞凋亡的作用及其是否与凋亡抑制蛋白XIAP基因相关。
- 叶露齐俊英李高鹏陶德定
- 关键词：细胞凋亡
- FuGENE6介导雌激素受体质粒HEGO5转染不同乳腺癌细胞株后受体的表达
- 2004年
- 背景及目的:基因转染技术是研究乳腺癌细胞雌激素受体(estrogenreceptor,ER)的表达及其作用机制的重要手段。本研究检测不同人类乳腺癌细胞株以FuGENE6试剂为载体进行转染时的转染效率,以及ER质粒HEGO5转染后ER的表达情况。方法:不同乳腺癌细胞株先用pEGFP-N1质粒转染,流式细胞术(flowcytometry,FCM)对转染效率进行测定。将转染效率高的细胞株分别再用HEGO5转染,用FCM和Westernblot方法对ER的表达情况进行检测。结果:乳腺癌细胞株MM-231、MM330、MM134Ⅵ、MM175Ⅶ、MM157、MM361、MM436、MM453、UaCC812、UaCC893、BT-549、BT-20、HBL-100、Hs578t、MCF-7、T-47d、ZR-75-1的转染效率存在很大差异。细胞株HBL-100重复性转染实验的变异系数为5.1。几种转染效率较高的细胞株MCF-7、HBL-100、Hs578t、MM436、MM453和BT-20用HEGO5转染后,ER阳性的表达率介于12.9%～54.8%之间,与pEGFP-N1的转染效率相当;不同细胞ER的FCM和Westernblot检测结果一致。此外,ER的表达具有一定的细胞周期特异性。结论:FuGENE6试剂介导乳腺癌细胞进行转染时重复性好、结果稳定。HEGO5转染后ER的表达情况可分别用Westernblot和FCM进行定性、定量检测。
- 陶德定江敏冯永东吴剑宏龚建平
- 关键词：转染效率乳腺癌细胞株雌激素受体质粒EGFP介导
