邓文艳
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MG132对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞ERK1／2及结缔组织生长因子表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨在高糖作用下泛素蛋白酶体途径（UPP）对大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）、结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达的影响，并用蛋白酶体抑制剂MG132为阻断剂，探讨泛素蛋白酶体途径在腹膜纤维化中的作用。方法胰蛋白酶消化法原代和传代培养RPMC，经鉴定后第2代用于实验。随机分为对照组、不同浓度葡萄糖组（1．5％、2．5％、4．25％葡萄糖作用24h）、高糖作用不同时间组（2．5％葡萄糖分别作用于RPMC0、12、24、48h）和MG132组（0．5、1、2umol／LMG132预孵30min后加2．5％葡萄糖作用24h）。Western印迹法检测ERK1／2蛋白的表达。ELISA法检测细胞培养上清液中CTGF蛋白的含量。结果与对照组相比，高糖可刺激RPMC磷酸化（P）ERKI／2蛋白表达上调，24h时达高峰（P〈0．01），48h时下调，但仍高于正常组（P〈0．01）。高糖诱导RPMCCTGF蛋白表达增高，且呈时间、剂量依赖性（P〈0．05）。与高糖组相比，MG132能明显降低高糖所致的腹膜间皮细胞p-ERK1／2、CTGF蛋白的表达（P〈0．05）。结论MG132可降低由葡萄糖诱导的腹膜间皮细胞p-ERK1／2、CTGF蛋白的表达；泛素蛋白酶体途径参与了由高糖诱导的腹膜纤维化，阻断泛素蛋白酶体途径有利于防治腹膜纤维化。
- 邓文艳马健飞樊怡孙立霞杨丽娜
- 关键词：丝裂原激活蛋白激酶类腹膜间皮细胞高糖MG132
- 高糖、脂多糖对腹膜间皮细胞β-连环蛋白表达及纤维化的影响
- 霍爱晶马健飞李程程孙丽霞范秋灵王力宁邓文艳
- 水飞蓟宾对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞整合素连接激酶、转化生长因子β1及α平滑肌肌动蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究水飞蓟宾对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）整合素连接激酶（ILK）、转化生长因子β1（TGF—β1）及α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。方法胰蛋白酶消化法原代及传代培养RPMC，经鉴定后第2代用于实验。细胞随机分组：（1）正常对照组；（2）高糖组：不同质量浓度的葡萄糖（1．5％、2．5％、4．25％）作用24h；2．5％葡萄糖分别作用RPMC12、24、48、72h；（3）水飞蓟宾组：不同质量浓度的水飞蓟宾（5、10、20mg／L）预孵育2h，加入2．5％葡萄糖再作用24h。实时定量PCR检测ILK及α-SMA mRNA的表达。Western印迹法检测ILK蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清液中TGF—β1的表达。结果与正常对照组相比，高糖可以刺激RPMCILK及α-SMAmRNA的表达增高（均P〈0．05）；高糖诱导RPMCILK及TGF-β1蛋白的表达增高（均P〈0．05）；与高糖组相比，水飞蓟宾能显著降低高糖所致的RPMCILK、TGF-β1及d．SMA的高表达（均P〈0．05）。结论高糖可上调RPMCILK、TGF—β1及α-SMA的表达；水飞蓟宾可以抑制高糖所致的RPMCILK、TGF-β1及α—SMA的高表达。
- 孙立霞马健飞樊怡杨丽娜邓文艳王力宁
- 关键词：细胞转分化整合素连接激酶转化生长因子Β1Α平滑肌肌动蛋白
- 水飞蓟宾对脂多糖作用下大鼠腹膜间皮细胞整合素连接激酶、TGF-β_1及α-SMA表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:研究水飞蓟宾(SB)对脂多糖(LPS)作用下大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)整合素连接激酶(ILK)、转化生长因子β1(TGF-β1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法:胰蛋白酶消化法原代及传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验。细胞随机分组:(1)正常对照组;(2)不同浓度的LPS(1mg/L、10mg/L、100mg/L)作用24h组;(3)不同时间LPS组:10mg/LLPS分别作用于RPMC12h、24h、48h、72h;(4)水飞蓟宾组:不同浓度的SB(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)分别预孵育2h,加入10mg/LLPS再作用24h。实时定量PCR检测ILK及α-SMAmRNA的表达;Western印迹法检测ILK蛋白表达;ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1的表达。结果:与正常对照组相比,LPS可刺激RPMCILKmRNA和蛋白的表达增高,且在一定范围内呈时间和剂量依赖性(P<0.05);LPS诱导RPMCα-SMAmRNA呈时间和剂量依赖性表达增高(P<0.05);LPS诱导RPMCTGF-β1蛋白表达升高,呈现时间和剂量依赖性(P<0.01);水飞蓟宾组能浓度依赖性地降低LPS所致的RPMCILK、TGF-β1及α-SMA的表达(P<0.05),随水飞蓟宾浓度的增加,抑制作用越强。结论:LPS可以上调RPMCILK、TGF-β1及α-SMA的表达;水飞蓟宾可以抑制LPS所致的RPMCILK、TGF-β1及α-SMA的过度表达。ILK参与了腹膜透析相关性腹膜炎腹膜纤维化的病理过程,水飞蓟宾对腹膜透析相关性腹膜炎具有一定的抑制作用,并具有抑制腹膜纤维化的作用。
- 孙立霞马健飞樊怡杨丽娜邓文艳王力宁
- 关键词：腹膜间皮细胞脂多糖整合素连接激酶Α-平滑肌肌动蛋白
- 高糖和脂多糖对腹膜间皮细胞中骨桥蛋白的表达及其所致纤维化的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察高糖、脂多糖(LPS)单独及联合作用对大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)中骨桥蛋白(OPN)的表达及其所致纤维化的影响。方法将培养的RPMC分为正常对照组,不同浓度葡萄糖组(1.5%,2.5%,4.25%,24 h),高糖(2.5%)作用不同时间组(8,12,24,34,48 h),不同浓度LPS组(50,100μg/mL),LPS(50μg/mL)作用不同时间组(8,12,24,34,48 h)及联合作用组(2.5%葡萄糖+LPS 50μg/mL,24 h)。采用细胞免疫组织化学法检测OPN在RPMC内的表达情况,Real-time RT-PCR技术检测OPN和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达。结果高糖、LPS单独及联合作用均可刺激RPMC的OPN表达增加,呈剂量及时间依赖性,2者联合作用时OPN表达量较高糖、LPS单独作用时增高,差异有统计学意义(P<0.05)。高糖、LPS单独及联合作用均可导致TGF-β1表达增加,作用8 h时表达水平升高,12 h降低,24 h达到高峰,48 h仍存在,与0 h组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论高糖及LPS通过上调OPN的表达引起腹膜损伤,导致腹膜纤维化,2者联合作用时通过影响OPN的表达加速了腹膜透析合并腹膜炎过程中腹膜纤维化的病理进程。
- 霍爱晶马健飞李程程邓文艳王力宁
- 关键词：高糖脂多糖腹膜间皮细胞骨桥蛋白
- 高糖和脂多糖对腹膜间皮细胞β连环蛋白表达及纤维化的影响被引量：1
- 2012年
- 腹膜间皮细胞（PMC）在腹膜纤维化中起着关键作用,在炎性反应及非生理性高糖透析液的环境下,其形态、结构及功能都发生了变化.在糖尿病肾病发病过程中,肾小管上皮细胞内的β连环蛋白（ β-catenin）含量及表达上调,使下游转分化及致炎、致纤维化因子高表达[1].一、材料与方法1.实验动物：SD大鼠,体质量160～200 g,普通级,由中国医科大学实验动物中心提供.2.药品和试剂：DMEM-F12干粉培养基（美国Hyclone）,胎牛血清（天津灏阳）,Trizol试剂（美国Invitrogen）,实时RT-PCR试剂盒（大连TaKaRa）,PCR引物由北京华大基因公司合成,兔抗3-catenin多克隆抗体、SABC试剂盒、DAB显色液（武汉博士德）,Wnt通路中的关键酶GSK-3β.
- 霍爱晶马健飞李程程邓文艳王力宁
- 关键词：腹膜间皮细胞腹膜纤维化高糖脂多糖实验动物中心
- 高糖对大鼠腹膜间皮细胞整合素连接激酶、结缔组织生长因子及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞(rat peritoneal mesothelial cells,RPMC)整合素连接激酶(integrin liked kinase,ILK)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的情况,为防治腹膜透析相关性腹膜纤维化提供新的思路。方法胰蛋白酶消化法原代及传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验。细胞随机分组:①正常对照组;②高糖组:不同浓度的高糖(1.5%、2.5%、4.25%)作用24h;2.5%高糖分别作用RPMC12h、24h、48h、72h。实时定量PCR检测ILK及α-SMAmRNA的表达。Western印迹法检测ILK蛋白的表达。ELISA法检测细胞培养上清液中CTGF的表达。结果与正常对照组相比,高糖可刺激RPMCILK及α-SMA的表达增高(均P<0.05),高糖诱导RPMCCTGF的表达增高(P<0.05)。结论高糖可上调RPMCILK、CTGF及α-SMA的表达。ILK及CTGF参与了高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞腹膜纤维化过程,为防治腹膜透析相关性腹膜纤维化提供新的思路。
- 孙立霞马健飞邓文艳
- 关键词：腹膜间皮细胞高糖整合素连接激酶结缔组织生长因子
