王小玲
- 作品数:10 被引量:21H指数:3
- 供职机构:山东大学更多>>
- 发文基金:国家大学生创新性实验计划山东省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生理学更多>>
- 没药倍半萜成分的分离鉴定及抗肿瘤活性被引量:9
- 2008年
- 目的从没药提取物中分离纯化倍半萜单体成分,并探讨其抑制肿瘤细胞增殖的生物活性。方法没药石油醚提取部分经硅胶柱层析分离得到二十多个倍半萜类化合物。其中化合物1和2的结晶分别经熔点测定、薄层层析1、H-NMR和13C-NMR数据分析以及与已知化合物比较,确定其化学结构。利用MTT法检测化合物1和2对大肠癌细胞HT-29和激素非依赖型前列腺癌细胞PC-3、PC-3M、DU-145及正常肝的永生化细胞LO2细胞增殖的影响。结果经理化性质鉴定、波谱分析,确定化合物1的结构为[1(10)E,2R,4R]-2-甲氧基-8,12-环氧吉玛-1(10),7,11-三烯-6-酮;化合物2的结构为2-甲氧基-5-乙酰基-4-呋喃吉玛-1(10)-烯-6-酮,二者同属没药吉玛烷型倍半萜类化合物。MTT结果表明,化合物1和2对大肠癌细胞增殖的抑制作用较弱。而对三种激素非依赖型前列腺癌细胞的增殖有非常显著的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖性。另外,化合物对正常肝永生化细胞的增殖无明显影响。结论经分离纯化、理化性质鉴定和波谱分析,确定了没药吉玛型倍半萜化合物1和2的结构,该化合物对前列腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用。
- 吉恺孔峰沈涛王小玲许爱辉苑辉卿张秀田
- 关键词:没药前列腺癌细胞株
- 巴比妥酸衍生物修饰的二硫化钼二维纳米材料及其应用
- 本发明公开了一类具有多样化亲疏水性质和电荷的硫代巴比妥酸衍生物类分子修饰的二硫化钼二维纳米材料,是式(Ⅰ)至式(IX)所示的Ligand 1~Ligand 9配体分子化合物分别修饰的二硫化钼纳米材料,依次命名为MoS<S...
- 翟淑梅王小玲闫兵王深清江翠娟
- 文献传递
- 没药倍半萜抑制前列腺癌细胞的增殖活性初探被引量:5
- 2007年
- 目的初步探讨没药两个倍半萜单体化合物抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制。方法应用倍半萜单体化合物处理人前列腺癌细胞株LNCaP后,MTT检测化合物对细胞增殖的影响;流式细胞术进一步分析细胞周期时相的变化;反转录PCR(RT-PCR)检测细胞周期相关蛋白p21WAF/CIP1(p21)和cyclinD的表达水平。结果两个没药倍半萜单体化合物对前列腺癌细胞均有显著的抑制活性(P<0.001),使细胞停滞于G0/G1期;并且能在mRNA水平诱导p21的表达,同时降低cyclinD的表达。结论没药倍半萜化合物抑制前列腺癌细胞增殖,可能是通过上调p21的表达、下调cyclinD蛋白的表达来实现的。
- 王小玲孔峰许爱辉吉恺蔡捷任凯苑辉卿
- 关键词:没药前列腺癌细胞株细胞周期蛋白D
- 巴比妥酸衍生物修饰的二硫化钼二维纳米材料及其应用
- 本发明公开了一类具有多样化亲疏水性质和电荷的硫代巴比妥酸衍生物类分子修饰的二硫化钼二维纳米材料,是式(Ⅰ)至式(IX)所示的Ligand 1~Ligand 9配体分子化合物分别修饰的二硫化钼纳米材料,依次命名为MoS<S...
- 翟淑梅王小玲闫兵王深清江翠娟
- 文献传递
- PSA启动子介导的TAT-p21^(WAF1/CIP1)融合蛋白在前列腺癌细胞中的特异表达及活性初探被引量:1
- 2008年
- 目的:设计并构建含有前列腺组织特异性抗原(PSA)启动子的TAT-p21WAF1/CIP1融合蛋白真核表达载体(pPSA-TAT-p21),使由TAT蛋白转导结构域(TAT)介导的抑癌基因蛋白p21WAF1/CIP1(p21)能够在前列腺癌细胞中实现特异性的跨膜转运,增强p21对前列腺癌的抑制作用。方法:利用PCR技术构建含有PSA启动子、TAT蛋白转导序列和p21读码框架的真核表达载体pPSA-TAT-p21,并进行酶切、测序鉴定。脂质体法在前列腺癌LNCaP细胞和大肠癌HT-29细胞中转染上述表达载体及对照质粒后进行反转录PCR(RT-PCR),检测p21的mRNA以及蛋白在不同细胞中的表达情况。MTT法检测转染pPSA-TAT-p21后LNCaP细胞的增殖情况。结果:成功构建pPSA-TAT-p21真核表达载体。RT-PCR和Western blotting结果显示PSA-TAT-p21在前列腺癌细胞中有明显表达,在大肠癌细胞中基本不表达,呈现特异性的表达,而由CMV启动子介导的p21(pCMV-21)对照组在两个细胞株中均有表达。细胞增殖实验结果显示,含有TAT蛋白转导结构域的PSA-TAT-p21的融合蛋白对前列腺癌细胞增殖的抑制作用明显高于不含TAT的PSA-p21蛋白。结论:pPSA-TAT-p21能够在前列腺癌细胞中特异性地高效表达,为前列腺癌基因的靶向治疗提供了实验依据。
- 蔡捷苑辉卿孔峰任凯王小玲吉恺胡晓燕张建业
- 关键词:LNCAP细胞HT-29细胞
- 没药倍半萜化合物抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制研究
- 前列腺癌(prostate cancer,PCa)在欧美国家的发病率居男性恶性肿瘤的第二位,在我国发病率相对较低,但近年来呈上升趋势,位于泌尿系肿瘤的第3位。前列腺癌潜伏期长,恶性程度高,死亡率高,其发病机制及生物学特性...
- 王小玲
- 关键词:没药P21CYCLIND雄激素受体
- 文献传递
- 前列腺组织特异性启动子介导的TAT-EGFP的靶向表达被引量:1
- 2008年
- 目的构建由前列腺特异抗原(PSA)启动子介导、表达带有蛋白转导结构域序列(TAT)的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白pPSA-TAT-EGFP表达载体,使TAT所携带的目的蛋白能够在靶组织中高效表达,提高其特异性及表达效率。方法以pEGFP-1载体为模板,设计包含TAT序列的引物,PCR技术扩增含有酶切位点的小片段SalI-TAT-EGFP-Not I,经胶回收纯化,连接到T克隆载体。双酶切及测序鉴定后,提取质粒、双酶切后胶回收得到目的小片段。含有PSA启动子的pPSA-EGFP载体经Sal I和Not I双酶切后,胶回收含有PSA启动子序列的大片段。过夜连接目的小片段与PSA启动子大片段,得到pPSA-TAT-EGFP表达载体。转化、筛选阳性克隆后酶切与测序鉴定。将构建载体分别转染前列腺癌细胞和大肠癌细胞检测其表达情况。结果成功构建pPSA-TAT-EGFP表达载体。转染结果显示其能够在前列腺癌细胞中特异性表达。结论引入了PSA组织特异性启动子的TAT所携带的目的蛋白能够在前列腺癌组织中表达。
- 吉恺王小玲许爱辉胡志敏苑辉卿
- 关键词:蛋白转导结构域增强型绿色荧光蛋白
- 鞘脂激活肽真核表达载体的构建及其对前列腺癌细胞增殖的影响
- 2007年
- 目的:构建含有鞘脂激活蛋白原神经营养序列短肽-鞘脂激活肽NP(neurotrophic peptide,NP)的真核表达载体以及NP与TAT的融合蛋白真核表达载体(TAT-NP),探讨NP在前列腺癌细胞中的作用。方法:根据NP和TAT的氨基酸序列合成其DNA序列,利用基因克隆技术构建含有TAT和NP读码框架的真核表达载体pcDNA-TAT-NP和pcDNA-NP。在前列腺癌PC3、LNCaP细胞中转染上述载体后通过RT-PCR、MTT和流式细胞术,分别检测TAT-NP、NP的mRNA的表达,NP对前列腺癌细胞的增殖情况以及对细胞周期的影响。结果:经测序鉴定,成功构建pcDNA-TAT-NP和pcDNA-NP真核表达载体。RT-PCR结果显示,TAT-NP、NP能够在前列腺癌细胞中表达。MTT结果表明,TAT-NP、NP均对前列腺癌细胞增殖具有促进作用。流式细胞结果显示,TAT-NP、NP具有促进细胞进入S和G2/M期的作用。结论:外源表达的鞘脂激活肽NP能够促进前列腺癌细胞的增殖,并能影响细胞周期各时相的变化。
- 任凯苑辉卿孔峰蔡捷王小玲胡晓燕徐霞张建业
- 关键词:流式细胞术前列腺肿瘤细胞株
- 没药倍半萜诱导的p21^(WAF/CIP1)蛋白参与抑制前列腺癌细胞增殖被引量:5
- 2008年
- 目的探讨没药的两个倍半萜单体化合物抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制。方法应用细胞增殖实验噻唑蓝(MTT)法检测化合物对人前列腺癌细胞株LNCaP的影响;流式细胞术进一步分析前列腺癌细胞经化合物处理后细胞周期时相的变化;Western blot检测化合物对细胞周期相关蛋白p21WAF/CIP1(p21)和cyclin D表达的影响;利用细胞转染技术检测化合物对cyclin D启动子表达活力的影响。结果两个没药倍半萜单体化合物对前列腺癌细胞均有显著的抑制活力,使细胞停滞于G0/G1期;且能在蛋白水平诱导p21WAF/CIP1的表达,同时降低cyclinD的表达。结论没药倍半萜化合物抑制前列腺癌细胞的增殖,可能是通过上调p21WAF/CIP1的表达、下调cyclinD蛋白的表达来实现的。
- 王小玲孔峰吉恺蔡捷任凯龚磊胡志敏苑辉卿
- 关键词:没药前列腺癌P21
- 金属有机框架和二氧化锆纳米粒子影响巨噬细胞炎症相关基因表达的研究
- 王小玲