焦颖
- 作品数:4 被引量:11H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- O型口蹄疫病毒VP1基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析被引量:7
- 2010年
- 利用毕赤酵母系统表达O型口蹄疫病毒VP1基因,并对表达的蛋白进行免疫原性鉴定。将VP1基因克隆入毕赤酵母分泌性表达载体pPICZα-C中,获得重组表达载体pPICZαC-VP1。将重组质粒pPICZαC-VP1线性化后,用电穿孔法转入酵母菌X-33,用Zeocin+YPDS平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物,并用酵母表达的VP1蛋白免疫小鼠,然后通过ELISA检测抗体水平。结果表明,酵母所表达的VP1蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。
- 焦颖龚劲峰何校澎黄辉荣刘德辉张春红吴锋黄毓茂
- 关键词:口蹄疫病毒VP1毕赤酵母免疫原性
- 蝉新型抗菌肽Cryptonin在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定被引量:3
- 2010年
- 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的Cryptonin基因片段。基因克隆到pPICZα-C质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pPICZα-C-Cryptonin。pPICZα-C-Cryptonin通过限制性内切酶SacⅠ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞X-33内。PCR检测Cryptonin基因与毕赤酵母染色体稳定结合,Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子。在AOX(醇氧化酶)启动子调控下,Cryptonin蛋白获得分泌表达,其相对分子质量约为2700。表达产物耐热性强,在100℃条件下10min内抗菌活性不变,煮沸30min以上仍具有活性。琼脂糖孔穴扩散法检测显示表达产物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有很好的抑菌活性。
- 刘德辉焦颖徐蕙吴锋张春红黄毓茂
- 关键词:基因设计分泌表达抑菌活性
- FMDV VP1基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性的研究
- 口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起猪、牛、羊等偶蹄兽的一种急性热性高度接触性传染病,严重危害家畜的生产力和畜产品质量安全,被OIE列为烈性传染病。我国目前通过接种合成肽疫苗和灭活苗的方法来控制该病的流行,合成...
- 焦颖
- 关键词:毕赤酵母免疫原性口蹄疫聚合酶链式反应
- 蝉抗菌肽基因密码子优化及其毕赤酵母表达载体构建被引量:1
- 2009年
- 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的抗菌肽Cryptonin基因片段。基因克隆到pGAPZα-A质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pGAPZ-αA-Cryptonin。经酶切分析、PCR和测序鉴定证明载体构建成功。表达载体的正确构建为Cryptonin的高效表达和生物学活性研究奠定基础。
- 刘德辉黄毓茂徐蕙焦颖
- 关键词:密码子优化