梁东春
- 作品数：132 被引量：505H指数：11
- 供职机构：天津医科大学代谢病医院内分泌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- IL-6与肥胖和胰岛素抵抗的关系被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨血清IL-6水平以及IL-6基因多态性与肥胖和胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:选取肥胖2型糖尿病患者55例(肥胖组),非肥胖2型糖尿病患者49例(非肥胖组),健康对照50例(对照组),应用酶联免疫法检测血清中IL-6水平,并应用PCR-RFLP方法检测IL-6-174启动子区基因多态性。结果:肥胖组血清IL-6水平较非肥胖组及对照组明显增高,在糖尿病组中IL-6-174G等位基因携带者体质量指数(BMI)及IR均高于IL-6-174C等位基因携带者。结论:IL-6与BMI和IR有关,携带IL-6-174G等位基因者更易于发生IR。
- 孙蓓王宝利梁东春左爱军郭刚张镜宇
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α白细胞介素6胰岛素抗药性
- 人白细胞抗原B位点基因芯片分型技术研究被引量：1
- 2006年
- 目的 探讨基因芯片技术在进行北方汉族人群人白细胞抗原B位点（HLA-B）分辨度分型的价值.方法 根据中国北方汉族人群HLA-B常见基因位点及临床分型分辨度特征,设计特异性寡核苷酸中分辨度分型探针,制成HLA-B基因分型芯片.采用荧光标记引物和不对称聚合酶链反应（PCR）扩增HLA-B 2、3外显子,产物与芯片探针杂交后经荧光扫描,并用特定软件分析判断阳性探针,以确定样品基因型.结果 用中分辨度探针从30份北方汉族人标本中可分出HLA-B 7～83范围的42个B抗原等位基因,与顺序特异引物聚合酶链反应（PCR-SSP）分型方法对比,多检出3个HLA-B14、73和82新等位基因.结论 HLA-B基因芯片具有较高的精确度和特异性,可一张芯片多人份检测,适合用于临床HLA-B抗原分型.
- 张明新郭刚张瑞梁东春孙蓓
- 关键词：基因型基因芯片
- 可定向克隆启动子并研究其活性的T载体及其构建方法
- 本发明公开了一种可直接定向克隆启动子并研究启动子活性的T载体及其构建方法，包括以下步骤：1)制备含有XcmI盒(或AhdI盒)的前T载体，包括间隔DNA序列即带有与出发载体具有不同抗性基因或其它选择标记的序列，紧密连接于...
- 王宝利李晓霞郭刚张镜宇梁东春左爱军孙蓓张瑞
- 文献传递
- 生长激素受体外显子3缺失多态性在矮小儿童与正常儿童中的分布比较被引量：3
- 2011年
- 目的:研究生长激素受体(GHR)基因外显子3缺失多态性在矮小症儿童与正常儿童的人群分布,并比较二者有无差异。方法:选择矮小症儿童143例为试验组,包括生长激素缺乏症(GHD)58例,小于胎龄儿(SGA)40例,特发性矮小症(ISS)45例。采用多重聚合酶链反应(PCR)的方法对GHR外显子3缺失进行多态性分析,与同期健康儿童170例(对照组)对比。结果:试验组GHR外显子3缺失多态性fl/fl、fl/d3、d3/d33种基因型分别为71、58、14例,对照组为110、49、11例,前者fl/d3和d3/d3的比例明显高于后者,2组多态性分布差异有统计学意义(P<0.05)。试验组d3等位基因频率0.301(86/286)高于对照组的0.209(71/340),差异有统计学意义(P<0.05)。不同地区正常人群中3种基因型及等位基因频率分布对比差异有统计学意义(P<0.05),而SGA和GHD患者间分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:GHR外显子3多态性在矮小症儿童与正常儿童中的分布存在差异,推测可能与矮小症发病有一定关系。
- 崔敬茹郑荣秀刘戈力杨箐岩梁东春
- 关键词：受体促生长素外显子小于胎龄
- 不同碘营养状态对大鼠肝组织Ⅰ型脱碘酶和脑组织Ⅱ型脱碘酶活性的影响
- 2007年
- 不同碘营养状态Wistar大鼠分别于饲养3、6、12个月时处死,放射免疫法测定血清甲状腺激素水平。放射性核素分析法检测大鼠脑组织Ⅱ型脱碘酶(DⅡ)和肝组织Ⅰ型脱碘酶(DⅠ)的活性。结果显示在早期碘缺乏状态下,动物出现以低T_4为主要表现的甲减,DⅠ和DⅡ活性代偿性上调。高碘在转录后直接抑制DⅠ的活性,使血清TT_3和FT_3下降,而DⅡ的活性增高,可能是由于T_4和T_3对酶的底物诱导失活所致。
- 孙蓓左爱军梁东春郭刚赵学勤阎玉芹陈祖培张镜宇
- 关键词：碘化物过氧化物酶碘缺乏碘过量
- 双启动子shRNA真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。方法:通过PCR分别扩增带有BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有BglⅡ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamHⅠ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO。再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功。结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段。
- 娜仁郭刚张瑞赵郁汪蓓蕾梁东春杨宇虹
- 关键词：聚合酶链反应质粒
- 护骨素配基反义RNA对破骨细胞样细胞生成的影响
- 2004年
- 目的 :研究护骨素配基 (OPGL)反义RNA对成骨细胞OPGL和护骨素 (OPG)mRNA表达及破骨细胞样细胞 (OLC)生成的影响。方法:构建小鼠OPGLcDNA反义表达载体 ,转染小鼠成骨细胞 ,筛选稳定表达细胞 ,通过RT -PCR研究其OPGL和OPGmRNA表达的变化。将转染有OPGL反义基因的成骨细胞与小鼠骨髓细胞共培养 ,观察OPGL反义RNA对OLC生成的影响。结果:转染有反义OPGLcDNA的成骨细胞OPGLmRNA表达水平显著降低 ,OPGmRNA表达不受影响。其诱导的OLC数目显著减少。结论:OPGL反义RNA抑制了OPGL基因的表达 ,使得成骨细胞促进破骨细胞形成、分化的能力减弱。
- 王宝利邱明才梁东春郭刚张镜宇
- 关键词：反义RNA成骨细胞小鼠基因表达
- 重组人干扰素大肠杆菌高效表达系统的建立被引量：3
- 2006年
- 目的:构建重组人干扰素-α2b(rhIFN-α2b)原核表达系统,以获得rhIFN-α2b在大肠杆菌中的高效表达。方法:依据大肠杆菌遗传密码子频率表,在不改变氨基酸组成的情况下,人工半合成适于在大肠杆菌中表达的rhIFN-α2b编码序列;经PCR扩增后,克隆人表达型质粒载体pDH;筛选阳性菌落,温度诱导表达,表达产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(WesternBlot)鉴定,并以人羊膜细胞-水泡性口炎病毒(WISH-VSV)系统鉴定rhIFN-α2b抗病毒活性。结果:PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定可见与预期大小符合的512bp的DNA条带;重组质粒pDH/IFN-α2b经序列分析,证实含有与预期相符且读码框架正确的hIFN-2b编码序列;SDS-PAGE可见与IFN-α2b分子质量大小一致的蛋白质条带,WesternBlot鉴定此条带为rhIFN-2b,其比活性达(1.8～2)×108U/mg。结论:rhIFN-α2b在大肠杆菌中的高效表达系统构建成功,且能高水平地表达出具有生物活性的rhIFN-α2b。
- 刘新宇梁东春左爱军郭刚张镜宇
- 关键词：基因表达原核表达系统遗传密码
- 间歇低氧选择性激活内皮细胞转录因子-κB核内转位的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨间歇低氧/再氧合(IH/ROX)和持续低氧(CH)条件下的内皮细胞转录因子(NF)-κB核内转位情况及其诱导的炎症损伤。方法:在细胞培养舱中程控产生预置的IH/ROX和CH暴露条件,将人脐静脉内皮细胞可传代细胞株ECV304暴露于该环境;采用酶联免疫吸附法测定内皮细胞核/质抽提物中NF-κB的光密度标化水平和培养基中白细胞介素(IL)-6的浓度。结果:在IH/ROX循环时,内皮细胞实际动脉O2分压的暴露条件为(76.28±1.29)mmHg～(54.94±1.05)mmHg,可以模拟睡眠呼吸暂停时内皮细胞暴露条件。IH组核内NF-κB的光密度标化水平明显高于低氧累计时间和程度相同的CH组(P<0.01);无论核内NF-κB水平还是培基IL-6浓度,CH累加IH组均低于IH组(均P<0.01);经过120min恢复,IH组核内NF-κB仍未恢复至对照组水平(P<0.01),而CH组核内NF-κB水平始终没有明显变化(P>0.05);胞浆NF-κB水平在各组间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:IH/ROX暴露时,是ROX时相而非IH时相导致NF-κB总含量增加且核内转位,诱导炎症产生,其程度明显强于CH;即使IH暴露结束以后,炎症反应基础在相当长时间内仍持续存在。
- 冯靖陈宝元郭美南曹洁赵海燕梁东春
- 关键词：缺氧内皮细胞脐静脉NF-ΚB
- 骨组织工程材料生长因子复合物与成骨细胞相容性研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究复合有生长因子的骨组织工程材料与成骨细胞的相容性 ,以及所复合的生长因子对成骨细胞增殖、分化的作用。方法:自新生大鼠颅盖骨分离培养成骨细胞接种于复合有BMP_2、IGF_1等生长因子的骨组织工程材料上。培养72h后计算材料上所附着的细胞数以及细胞内碱性磷酸酶的活性。结果:材料上所复合的BMP_2可明显增加成骨细胞内碱性磷酸酶的活性,但对细胞的增殖无影响。多聚赖氨酸可促进细胞对材料的黏附 ,IGF_1对成骨细胞的增殖促进作用明显。结论:复合有生长因子的骨组织工程材料与成骨细胞的相容性良好 ,材料上所载的生长因子对所黏附的成骨细胞增殖。
- 梁东春左爱军刘燕青郭刚张镜宇
- 关键词：骨组织工程生物材料复合物成骨细胞骨缺损
