李振梅
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山东大学公共卫生学院病毒学研究室更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 风疹病毒E1—374糖蛋白生物活性检测及其初步应用被引量：1
- 2013年
- 目的分泌表达风疹病毒E1-374糖蛋白并检测其免疫原性。方法将E1—374蛋白的cDNA插入表达载体pGAPZotA中构建出表达质粒pGAPZctA—E1—374，经BlnI酶线性化后通过电转的方法导入毕赤酵母菌，博来霉素筛选阳性菌落。间接免疫荧光和WesternBlot检测E1—374蛋白的表达及免疫反应性。免疫小鼠后应用间接ELISA检测风疹病毒IgG抗体。结果SDS-PAGE和WesternBlot显示E1-374蛋白的相对分子质量为46．89×10^3。ELISA法检测免疫小鼠的抗血清为阳性。建立的间接ELISA方法的最佳工作条件是抗原包被浓度为5．5μg／ml，血清最佳稀释度为1：100，板内变异系数值为0．36％-12．45％。结论E1-374蛋白能够引起小鼠体液免疫应答，是风疹亚单位疫苗的重要候选成分，并可应用于风疹病毒IgG抗体的检测。
- 李振梅温红玲林彬孙成玺褚福禄袁晓晶宋艳艳许洪芝王志玉
- 关键词：风疹病毒毕赤酵母酶联免疫吸附测定
- 人副流感病毒3型HN糖蛋白N-糖链的功能研究被引量：3
- 2013年
- 为了研究人副流感病毒3型(hPIV3)HN糖蛋白N-糖链的功能,采用基因定点突变技术构建糖基化位点突变体,然后检测各突变株的蛋白电泳速率、细胞表面表达量、受体结合活性、神经氨酸酶活性和促细胞融合活性。HN分子的G1、G2、G3和G4 4个糖基化位点分别和联合突变后发现G1、G2和G4及其联合突变株(G12、G14、G24和G124)电泳速率加快,而G3突变株电泳速率没有变化。各突变株的表达效率,神经氨酸酶活性与野毒株相比差别无统计学意义(P>0.05),但受体结合活性和促细胞融合活性均有不同程度的降低(P<0.05)。G1、G2和G4位点突变后受体结合活性分别为突变前的83.94%、76.45%和55.32%,而促细胞融合活性降为突变前的80.84%、77.83%和64.16%。联合突变株G12、G14、G24和G124血吸附活性进一步降低,为突变前的33.07%、20.67%、19.96%和15.11%,促细胞融合活性进一步降低为突变前的46.36%、12.04%、13.43%和4.05%。结果表明:hPIV3HN糖蛋白的糖链对HN糖蛋白的受体结合活性和促细胞融合活性有重要影响,推断糖链的丢失可能会引起HN糖蛋白头部结构(受体结合活性位点所在区域)或者方向的改变或者无法与宿主细胞膜表面的凝集素受体(一种与N-糖链结合的受体)结合,进而导致受体结合活性和促细胞融合活性的降低。
- 褚福禄温红玲侯桂华林彬张文强宋艳艳任桂杰孙成玺李振梅王志玉
- 关键词：细胞融合神经氨酸酶
- 风疹病毒诱导细胞凋亡分子机制的研究进展被引量：5
- 2013年
- 风疹病毒是披膜病毒科风疹病毒属的唯一成员,能够诱导细胞发生细胞凋亡。Ras-Raf-MEK-ERK和PI3KAkt信号通路是病毒增殖与细胞生存的必要通路,在细胞凋亡过程中起着必不可少的作用。p53蛋白和TAp63蛋白能够进入细胞核与DNA特异结合,抑制Bcl-2的表达,促进Bax的表达,导致线粒体内外膜间的物质(细胞色素C等)释放,进而引起caspase级联反应,最终导致细胞凋亡。本文从风疹病毒感染的细胞系,病毒感染导致的细胞病理改变和病毒诱导的细胞凋亡信号通路及其相关因子等方面对风疹病毒诱导细胞凋亡的分子机制进行了综述。
- 李振梅褚福禄刘颖王志玉
- 关键词：风疹病毒衣壳蛋白信号通路
- 新城疫病毒HN糖蛋白促细胞融合区域内保守氨基酸基因突变分析
- 2012年
- 目的确定新城疫病毒（NDV）血凝素神经氨酸酶（HN）糖蛋白促细胞融合区域内的保守氨基酸功能，探讨HN糖蛋白的促细胞融合机制。方法采用PCR定点突变与体内同源重组相结合的方法将HN糖蛋白促细胞融合区域内6个保守氨基酸突变为丙氨酸（A），在BHK21细胞内表达后，流式细胞仪定量分析蛋白的表达效率，并分别检测其促细胞融合活性、血细胞吸附能力（也称为受体识别活性）和神经氨酸酶活性。结果L74A蛋白表达效率降低为72．7％，各突变株蛋白表达效率与野毒株相比差别无统计学意义（P〈0．05）。各突变株蛋白促细胞融合活性都有不同程度的下降，其中1103A下降幅度最大，为野毒株的9．1％，各突变株蛋白血细胞吸附能力也都出现不同程度的降低，其中1103A的下降最明显，为28．2％，各突变株蛋白的神经氨酸酶活性变化程度不同，其中L74A略有升高，为118．6％，L110A下降幅度最大，为5．2％，1103A仅次于L110A，为5．7％。结论新城疫病毒HN糖蛋白促细胞融合区域内的保守氨基酸在细胞融合中发挥着重要作用，第103位异亮氨酸（Ⅰ）是此区域内的关键氨基酸。
- 褚福禄温红玲林彬孙成玺李振梅宋艳艳许洪芝王志玉
- 关键词：新城疫病毒细胞融合
